
NOMO1细胞系(人急性髓细胞白血病细胞系)
- 来源:骨髓
- 细胞特征:悬浮细胞 ,单个圆形细胞
- 培养基:1640+10% FBS+1% P/S
- 其他:NOMO1细胞在细胞质中表现出强的溶菌酶活性;NOMO1细胞对TPA(12-O-辛基苯并[a]芘)诱导分化有反应
NOMO-1细胞系源自一名31岁女性患者的骨髓样本,患有急性髓性白血病(AML FAB M5a)并经历了二次复发。NOMO-1细胞被广泛用于AML研究,特别是因为其细胞质中表现出显著的溶菌酶活性和吞噬能力。
NOMO1细胞系特性特征
NOMO1细胞表现出强的溶菌酶活性和吞噬活性,具有一定的免疫功能。
NOMO-1细胞对TPA(12-O-辛基苯并[a]芘)诱导分化有反应,能够在特定条件下向成熟细胞转化。
基因变异:NOMO-1细胞携带t(9;11)(p22;q23)染色体易位,导致KMT2A-MLLT3(MLL-AF9)基因融合突变
NOMO1细胞系参数表
细胞名称 | NOMO1细胞系(人急性髓细胞白血病细胞系) |
细胞别称 | Nomo-1; NOMO1 |
组织来源 | 骨髓 |
疾病特征 | 急性髓系白血病(AML FAB M5a) |
细胞形态 | 圆形单颗、悬浮 |
生长特性 | 悬浮生长 |
倍增时间 | 约35-48小时 |
细胞代数 | 10代以内 |
支原体检测 | 阴性 |
培养基 | RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S |
培养条件 | 气相:95%空气 + 5%二氧化碳;温度:37℃ |
冻存条件 | 55% 基础培养基 + 40% FBS + 5% DMSO,液氮储存 |
传代比例 | 1:2 - 1:3 |
换液频次 | 每2-3天一次 |
生物安全等级 | BSL-1 |
细胞保藏中心 | DSMZ; ACC-542 |
培养教程
NOMO1人急性髓细胞白血病细胞系培养教程
NOMO1细胞复苏
收到冻存的NOMO1细胞后,首先检查冻存管的完好性。准备好完全培养基RPMI-1640,加入10%胎牛血清(FBS)和1%青霉素-链霉素(P/S)作为抗生素。
将NOMO1细胞冻存管迅速放入37℃的水浴中,轻轻摇动,解冻时间约1-2分钟。解冻后,立即将细胞悬液转移到含有4 mL预热的培养基中,轻轻混匀。
将混匀后的NOMO1细胞悬液置于1000 rpm离心3分钟,弃去上清。重新加入1-2 mL新鲜的完全培养基,轻轻吹打使细胞均匀分散。
将细胞悬液转移至T25培养瓶,加入适量培养基,并将培养瓶置于37℃、5% CO₂的培养箱中培养过夜。复苏后第3天,检查NOMO1细胞状态并更换培养基。
NOMO1细胞传代
当NOMO1细胞密度达到80%-90%时,可以进行传代。传代通常每2-3天进行一次。
小心弃去旧的培养基,用无钙镁的PBS缓冲液清洗一次,以去除残留培养基中的代谢废物。
加入0.25%胰蛋白酶至培养瓶中,使NOMO1细胞脱附。当细胞开始回缩并变圆时,立即加入新鲜的完全培养基中止消化过程。
将消化后的NOMO1细胞悬液转移至15 mL离心管中,在1000 rpm下离心5分钟。弃去上清液,并用12 mL的完全培养基重新悬浮NOMO1细胞。
按1:2至1:3的比例分瓶传代。例如,将一个T25培养瓶中的NOMO1细胞分配到两个新的T25瓶中。细胞分瓶后,继续在37℃、5% CO₂的培养箱中培养。
NOMO1细胞冻存
当NOMO1细胞达到80%覆盖率并且状态良好时,可以进行冻存操作。
按照传代步骤清洗并消化NOMO1细胞。
将消化后的NOMO1细胞用冻存液重悬,冻存液通常为90%胎牛血清和10%二甲基亚砜(DMSO)的混合物。每个冻存管中加入适量的NOMO1细胞悬液。
将冻存管先置于-20℃环境下预冻1-2小时,再转移至-80℃冰箱过夜。最终将冻存管转移至液氮中长期保存。
注意事项
收到NOMO1细胞后,应立即检查包装是否破损,确保无液体泄漏。
在处理NOMO1细胞过程中,所有接触表面必须用75%酒精消毒,防止污染。
操作应在无菌条件下进行,避免细菌、真菌等微生物污染NOMO1细胞。
定期观察并记录NOMO1细胞状态,包括细胞形态和增殖速率等。
确保使用相同的培养基配方,以避免因环境变化引起的NOMO1细胞生长问题。
相关资料
STR鉴定及相关
Amelogenin | X |
CSF1PO | 11,12 |
D2S1338 | 17,23 |
D3S1358 | 15,17 |
D5S818 | 11,13 |
D7S820 | 8,10 |
D8S1179 | 13,14 |
D13S317 | 8,10 |
D16S539 | 9,11 |
D18S51 | 17,21.2 (DSMZ=ACC-542) |
17,22 (PubMed=25877200) | |
D19S433 | 13,14 |
D21S11 | 29,32.2 |
FGA | 21,22 |
Penta D | 9,12 |
Penta E | 15,17 |
TH01 | 6,9 |
TPOX | 8,12 |
vWA | 17,18 |