EOL-1细胞（急性髓细胞－嗜酸粒细胞－白血病细胞）

EOL-1细胞系源自于1984年诊断的33岁男性急性髓系（嗜酸性粒细胞）白血病患者的外周血。EOL-1细胞系以其携带的KMT2A (MLL)部分串联重复为特征，广泛应用于研究急性髓系白血病的生物学特性和病理机制，以及药物筛选的研究。
EOL-1细胞在标准培养条件下展示了成肌细胞的特征，并能够在多种刺激下分化为成熟的嗜酸性粒细胞，是研究免疫反应和嗜酸性粒细胞功能的有价值模型。

EOL-1细胞携带一个MLL部分串联重复部分、也被用于评估针对分化簇-37（CD37）的抗体-药物偶联物AGS67E在治疗B/T细胞恶性肿瘤中的作用，以及抗血管细胞粘附分子-1（VCAM-1）单克隆抗体在小鼠哮喘模型中的抑制效果。这使得EOL-1细胞不仅在白血病研究中具有重要意义，也在免疫和过敏反应研究中发挥了关键作用。

EOL-1细胞特性特征

• 分化能力：在适当的刺激下，EOL-1细胞能够分化为功能成熟的嗜酸粒细胞，这使其成为研究嗜酸粒细胞生物学及其在免疫反应中的作用的重要模型。

• 基因特征：EOL-1细胞携带KMT2A (MLL)的部分串联重复，这与多种白血病的发生相关。

• 抗原表达：EOL-1细胞表达多种与嗜酸粒细胞相关的标志物，包括白血球介素3、颗粒白血球-巨噬细胞集落刺激因子受体CD95及CD49d等。

• 功能特征：EOL-1细胞在分化过程中会合成嗜伊红性白血球阳离子蛋白，表明其在嗜酸粒细胞功能中的活跃参与

EOL-1细胞参数表

EOL-1急性髓细胞－嗜酸粒细胞－白血病细胞培养教程

细胞复苏

• 从液氮中取出冻存管，立即将其放入37°C水浴中，迅速解冻（约1-2分钟），并轻轻摇晃以加速解冻过程。
  

• 将解冻后的EOL-1细胞悬液转移至含有4 mL完全培养基（RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S）的离心管中，轻轻混合均匀。
  

• 在1000 rpm下离心4分钟，弃去上清液。
  

• 向离心管中加入1-2 mL完全培养基，轻轻吹打混匀。
  

• 将EOL-1细胞悬液转移至T25培养瓶中，添加约8 mL的完全培养基，然后放入37°C、5% CO₂的培养箱中静置过夜。
  

• 第二天检查EOL-1细胞状态，并更换培养基。
  

细胞传代

• 当EOL-1细胞密度达到80%-90%时进行传代。
  

• 弃去培养上清，使用不含钙、镁离子的PBS洗涤EOL-1细胞1-2次。
  

• 加入1 mL消化液（0.25%胰酶 + 0.53 mM EDTA），在37°C培养箱中消化1-2分钟，观察细胞是否大部分变圆并脱落。
  

• 消化结束后，加入适量的完全培养基终止消化，轻轻吹打使EOL-1细胞悬浮。
  

• 在1000 rpm下离心4分钟，弃去上清液。根据需要，将EOL-1细胞按1:2的比例分配到新的培养瓶中，添加适量的完全培养基（通常为8 mL）。
  

细胞冻存

• 弃去培养基后，用PBS清洗EOL-1细胞。加入1 mL胰酶，待细胞变圆并脱落后，加入等体积的含血清培养基终止消化。
  

• 在1000 rpm下离心4分钟，弃去上清液。
  

• 将EOL-1细胞重悬在冻存液中，通常每管约为1 mL，并分装到冻存管中。
  

• 将冻存管放入-80°C冰箱中缓慢冷冻24小时，然后转移至液氮罐中保存。
  

细胞培养注意事项

• 初期生长：EOL-1细胞在复苏后初期生长较慢，可能需要长达5天才能达到适合传代的状态。

• 簇状细胞团：避免过度吹散EOL-1细胞团，因为这些细胞通常以簇状形式生长。

• 培养基颜色：培养基的颜色变化可以作为EOL-1细胞健康状态的指示。EOL-1细胞在微酸性条件下生长更佳，建议使用含15%胎牛血清的培养基以优化复苏效果。

• 细胞污染：定期检查EOL-1细胞是否受到污染，发现污染应及时处理并报告。

EOL-1细胞在微酸性条件下的优势

• 在微酸性环境中，EOL-1细胞表现出更高的存活率和增殖能力。这种环境促进EOL-1细胞代谢活性，提高对培养基中营养物质的吸收，从而加快细胞生长。
  

• 微酸性条件有助于EOL-1细胞有效分化为成熟的嗜酸性粒细胞，并增加特定标志物的表达，如白血球介素3和颗粒白血球-巨噬细胞集落刺激因子受体，增强免疫功能。
  

• 在微酸性条件下，EOL-1细胞能够更好地合成嗜酸性粒细胞的功能相关蛋白，如嗜伊红性白血球阳离子蛋白，这有助于提升细胞对过敏反应和寄生虫感染的抵抗力。
  

• 在微酸性条件下处理EOL-1细胞复苏能够显著提高复苏后的存活率。使用含15%胎牛血清的培养基可以更好地支持EOL-1细胞从冷冻状态复苏，提升其生长状态和活力。
  

• 使用适当配方的培养基（如RPMI-1640 + 10% FBS），并维持微酸性环境，优化EOL-1细胞的生长条件。这种配方提供必要的营养物质，并维持适宜的pH值，从而支持EOL-1细胞的健康生长。