
SKNO1细胞(人急性髓系白血病细胞)
- 来源:骨髓
- 细胞特征:悬浮细胞,多细胞聚集,淋巴细胞样
- 培养基:RPMI-1640+10%FBS+10ng/ml GM-CSF+1%P/S
- 其他:SKNO-1细胞系具有t(8;21)染色体易位,导致AML1-RUNX1T1(AML1-ETO)融合基因的表达
SKNO-1细胞系源自一名22岁急性髓系白血病(AML)男性患者的骨髓样本,于1990年建立。SKNO-1细胞具有t(8;21)染色体易位,这一易位通常伴随RUNX1-RUNX1T1(AML1-ETO)融合基因的表达,是研究AML病理机制的关键模型之一。SKNO-1细胞系对粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)有依赖性,且其增殖周期为48至72小时,表现出较强的增殖能力。形态上,SKNO-1细胞呈圆形或多形性,能够在悬浮培养条件下生长。是研究白血病细胞生物学行为的理想工具,尤其是在化疗后复发以及特定遗传异常(如17号染色体单体缺失)背景下的研究中具有重要意义。
SKNO1细胞特性特征
易位特征:SKNO-1具有t(8;21)染色体易位,这种易位通常与急性髓系白血病相关,导致AML1-RUNX1T1(AML1-ETO)融合基因的表达。
基因重排:AML1基因位于21号染色体上,经过重排后在SKNO-1细胞中表达。
p53基因:SKNO-1细胞中检测到p53基因的过表达和突变,这可能与疾病进展有关。
融合转录本:SKNO-1细胞中表达AML1-MTG8融合转录本,这进一步支持其作为AML模型的重要性。
培养依赖性:SKNO-1细胞依赖于粒细胞-巨噬细胞刺激因子(GM-CSF)进行生长,且生长和存活完全依赖于该因子。
增殖能力:SKNO-1细胞在悬浮液中生长,增殖时间约为48至72小时,表现出良好的增殖能力。
细胞形态:SKNO-1细胞呈现为圆形至多形性,形态上类似于成熟的髓母细胞。
SKNO-1细胞系被广泛用于研究急性髓系白血病的发病机制、药物敏感性以及治疗策略,为科学家提供了重要的实验模型
SKNO1细胞参数表
细胞名称 | SKNO1细胞(人急性髓系白血病细胞) |
别称 | Skno-1; SKNO1 |
种属来源 | 人类 |
年龄/性别 | 22岁/男性 |
组织来源 | 骨髓 |
肿瘤类型 | 急性髓系白血病(AML M2) |
建立年份 | 1990年 |
生物安全等级 | BSL-1 |
细胞形态 | 圆形至多形性,淋巴细胞样 |
生长特性 | 悬浮生长,单独或成小簇聚集 |
生长培养基 | RPMI-1640 + 10% FBS + 10 ng/ml GM-CSF + 1% P/S |
培养条件 | 37℃, 5% CO₂, 95%空气 |
倍增时间 | 35-50小时 |
传代比例 | 2.9-4.3 x 10^5 cells/mL |
换液频次 | 每2-3天一次 |
最大密度 | ~2.5 x 10^6 cells/mL |
冻存液 | 55% 基础培养基 + 40% FBS + 5% DMSO |
冻存条件 | 液氮保存 |
运输方式 | 干冰冷冻运输或复苏发货 |
染色体特征 | t(8;21)易位,17号染色体单体缺失 |
融合基因 | AML1-RUNX1T1(AML1-ETO)融合基因表达 |
p53基因状态 | 突变与过表达 |
无菌检测 | 阴性(细菌、真菌、支原体) |
病原体检查 | HIV、乙型肝炎、丙型肝炎均为阴性 |
应用领域 | 药物测试、基因功能研究、动物模型研究 |
培养教程
SKNO1人急性髓系白血病细胞培养教程
复苏SKNO1细胞
从液氮取出SKNO1细胞冻存管后,立即将其放入37℃水浴中迅速解冻,过程中轻轻摇晃以确保均匀解冻。
解冻后,将SKNO1细胞悬液转移至含有4 mL新鲜培养基的无菌离心管中,轻轻混合。
在1000 rpm下离心3-4分钟,去除上清液,保留SKNO1细胞沉淀。
使用1-2 mL新鲜培养基重新悬浮SKNO1细胞,并将其转移至含适量培养基的培养瓶中,置于培养箱中过夜培养。
传代SKNO1细胞
传代条件:当SKNO1细胞密度达到**80%-90%**时,应进行传代以保持细胞活力和良好的生长状态。
弃去旧培养液,用无菌的PBS缓冲液轻轻清洗SKNO1细胞1-2次。
添加0.25%胰蛋白酶消化液,待SKNO1细胞回缩变圆后,加入完全培养基终止消化反应。
将细胞悬液转移至15 mL离心管,在1000 rpm下离心5分钟。
弃去上清液,使用12 mL完全培养基重新悬浮SKNO1细胞。
按照1:2或1:5的比例进行分瓶传代,随后将SKNO1细胞放入37℃、5% CO₂的培养箱继续培养。
冻存SKNO1细胞
选取生长状态良好的SKNO1细胞,按传代步骤处理。
消化并重悬后,加入冻存液(FBS:DMSO=9:1),使SKNO1细胞浓度达到理想冻存密度。
将SKNO1细胞悬液分装到冻存管中,先放置在**-20℃冷冻1.5小时**,随后移至**-80℃保存过夜**。最后,将SKNO1细胞转移至液氮中进行长期保存。
注意事项
复苏时检查:收到SKNO1细胞后,首先检查冻存管是否完好,观察是否有漏液或浑浊。如有异常,及时联系供应商。
消毒和检测:复苏前,使用75%酒精消毒SKNO1细胞瓶外表面,并在显微镜下观察细胞状态。建议初次传代前进行细胞状态拍照记录,以便后续参考和与技术支持沟通。
悬浮细胞操作:对于悬浮生长的SKNO1细胞,离心后需要用新鲜培养基重悬。
培养基稳定性:在传代前几天,建议使用相同成分的完全培养基,以帮助SKNO1细胞适应新环境。
仅供科研使用:SKNO1细胞仅用于科研用途,不得用于临床诊断或治疗。
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FGA | 23 |
Penta D | 9 |
Penta E | 11,12 |
TH01 | 7 |
TPOX | 8,9 |
vWA | 14,17 |