
skm-1细胞株(人急性髓系白血病细胞株)
- 来源:外周血
- 细胞特征:悬浮生长,淋巴母细胞样 ,圆形,单个细胞
- 培养基:RPMI-1640+10%FBS+1%P/S
- 其他:KM-1细胞中Bmi-1基因在mRNA和蛋白水平上均显著高于正常骨髓组织;
SKM-1细胞系于1989年建立,来源于一名76岁男性患者的外周血。患者被诊断为骨髓增生异常综合征(MDS),并发展为急性单核细胞白血病(AMLM5)。SKM-1细胞系的特征包括遗传不稳定性、DNA修复缺陷及细胞增殖和分化控制的异常,这使其成为急性髓系白血病研究的理想模型。SKM-1细胞系为研究急性髓系白血病及其发病机制提供了重要实验材料,尤其是在探索耐药机制和药物作用方面,如地西他滨(DAC)。
skm-1细胞株特性特征
Bmi-1基因:在SKM-1细胞中,Bmi-1基因的mRNA和蛋白表达水平显著高于正常骨髓组织,这表明其在MDS的发病中可能具有重要作用。
ras基因突变:最初患者存在多个ras基因的点突变,但在疾病进展过程中这些突变消失,同时伴随有p53抗肿瘤基因的染色体异常,这与遗传不稳定性相关。
核型异常:研究发现SKM-1细胞伴有染色体缺失(如del(9)(q13;q22))和重排(如der(17)t(17;?)(p13;?)),这些异常与MDS及其向AML转化的过程密切相关。
药物耐药性:SKM-1细胞对地西他滨(DAC)的耐药性研究表明,hENT1基因的沉默会降低细胞对DAC诱导凋亡和去甲基化作用的敏感性,这为理解药物耐药机制提供了重要线
skm-1细胞株参数表
细胞名称 | skm-1细胞株(人急性髓系白血病细胞株) |
细胞别称 | SKM-1;SKM1 |
组织来源 | 外周血(骨髓增生异常综合征患者) |
细胞类型 | 肿瘤细胞 |
肿瘤类型 | 急性单核细胞白血病(AMLM5) |
年龄(性别) | 男性;76岁 |
生物安全等级 | BSL-1 |
倍增时间 | 48小时 |
细胞形态 | 淋巴母细胞样,圆形,单个细胞 |
生长特性 | 悬浮生长 |
细胞代数 | 10代以内 |
支原体检测 | 无 |
培养基 | RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S |
培养条件 | 气相:95%空气 + 5% CO₂;温度:37℃ |
换液频次 | 每周2-3次 |
传代比例 | 1:2 - 1:4 |
离心条件 | 离心速率:1200 rpm(约250g),离心时间:3分钟 |
冻存液 | 55% RPMI-1640 + 40% FBS + 5% DMSO |
冻存方式 | 液氮储存 |
运输方式 | 冻存发货需加干冰运输费用;复苏发货免运输费用 |
供应限制 | 限于科学研究,不得用于动物或人类疾病的治疗产品 |
基因特征 | Bmi-1基因高表达,ras基因突变,p53抗肿瘤基因异常 |
表达特征 | hENT1基因在耐药机制中发挥重要作用 |
核型异常 | 染色体缺失和重排(如del(9)(q13;q22)) |
注意事项 | skm-1细胞为悬浮细胞,请注意离心收集细胞悬液;请勿直接倒掉细胞培养液 |
培养教程
skm-1人急性髓系白血病细胞株培养教程
SKM-1细胞复苏
从液氮罐中取出冻存的SKM-1细胞,迅速放入37°C水浴中解冻,约需1-2分钟,直至完全融化。
将解冻的SKM-1细胞转移至含10% FBS的RPMI-1640培养基中,轻轻混匀。
以500×g离心3分钟,去除上清液,加入新鲜的完全培养基,重悬SKM-1细胞。
将SKM-1细胞接种于适当的培养瓶中,放入CO₂培养箱中培养。
SKM-1细胞培养
每2-3天更换一次培养基,以去除代谢废物并提供新鲜营养。
定期观察SKM-1细胞的生长状态,待细胞密度达到80%-90%时进行传代。
SKM-1细胞传代步骤
收集悬浮的SKM-1细胞,转移至无菌离心管中,500×g离心3分钟。
弃去上清液,用新鲜的RPMI-1640完全培养基重悬SKM-1细胞。
根据实验需要调整接种密度,通常为1:2至1:4,将SKM-1细胞接种至新的培养瓶中。
将接种后的SKM-1细胞放入CO₂培养箱中继续培养。
注意事项
定期检查SKM-1细胞培养基的颜色变化(酚红指示),若出现变黄现象需及时更换。
使用显微镜观察SKM-1细胞状态,如发现异常需采取相应措施。
SKM-1细胞冻存步骤
在传代过程中,收集健康的SKM-1细胞,离心后去除上清。
将SKM-1细胞加入冻存液(55% RPMI + 40% FBS + 5% DMSO),轻轻混匀。
将混合液分装至冻存管中,标记清晰。
将冻存管放入程序降温设备中,按照设定程序降温至−80°C,然后转移至液氮罐中保存。
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STR鉴定及相关
Amelogenin | X (Cosmic-CLP=909722; JCRB=JCRB0118) |
X,Y (DSMZ=ACC-547; PubMed=25877200) | |
CSF1PO | 10,12 |
D2S1338 | 19,23 |
D3S1358 | 18 |
D5S818 | 10,12 |
D7S820 | 10,11 |
D8S1179 | 11,13 |
D13S317 | 11,13 |
D16S539 | 9,11 |
D18S51 | 14,15 |
D19S433 | 14,15 |
D21S11 | 31.2,32.2 |
FGA | 22,23 |
Penta D | 9,12 |
Penta E | 15,19 (DSMZ=ACC-547) |
15,20 (PubMed=25877200) | |
TH01 | 7,9 |
TPOX | 8,11 |
vWA | 18 |