kg-1a细胞系（人急性骨髓性白血病细胞）

KG-1a细胞系源自急性髓系白血病（AML）患者的骨髓，是KG-1细胞的衍生变异亚系，最早由H.P. Koeffler和D.W. Golde建立。患者最初诊断为红白血病，随后病情演变为急性髓性白血病，其骨髓细胞被用于构建此模型。KG-1a细胞系以未成熟髓系祖细胞的特征为主，具备较低的分化水平和明显的白血病干细胞特性。

kg-1a人急性骨髓性白血病细胞特性特征

• KG-1a细胞呈圆形或椭圆形，体外以悬浮状态生长，属于未分化的早幼粒细胞，分化程度较低，表现出原始髓系细胞的表型。

• 表型特征：表达CD34、CD45、HLA-DR等造血干/祖细胞相关分子

• 生物学特征：kg-1a细胞增殖活跃，分化受阻，具备抗凋亡能力。

• 遗传学特点：基因组存在多种染色体异常，如缺失、易位和插入，尤其在第8号染色体长臂存在部分多倍体（hexasomy）现象，为AML分子机制研究提供稳定模型

• 表达部分未成熟T细胞相关分子：低水平的T细胞受体β mRNA，高水平的T3δ mRNA和细胞内T3蛋白，以及CD7/gp40膜抗原

• kg-1a细胞表面也有CD109抗原，该抗原在急性髓系白血病中有较高表达，与白血病细胞的活性有关

• KG-1a细胞能够表达突变的AML1-ETO融合基因，提供早期AML分子病理研究的模型

• kg-1a细胞对集落刺激因子(如GM-CSF)有反应

• kg-1a细胞系用于白血病干细胞的研究、药物诱导分化分析和信号通路机制的探讨
  

kg-1a细胞系参数表

kg-1a细胞系（人急性骨髓性白血病细胞）培养教程

KG-1A细胞复苏（Thawing）

• 预热完全培养基（IMDM + 20% FBS）至37℃。

• 从液氮罐中取出KG-1A细胞冻存管，先置于-80℃几分钟以挥发残余液氮。

• 将冻存管立即放入37℃水浴锅中轻轻摇动，约1分钟使KG-1A细胞完全解冻。

• 注意水位不要超过瓶口，避免污染。

• 用75%酒精擦拭冻存管外壁。

  将细胞悬液转移至含6–7 mL预热完全培养基的15 mL离心管。

• 室温下1100 rpm离心4分钟，弃去上清液。

• 以1 mL新鲜培养基吹打重悬KG-1A细胞沉淀。

• 转移至含4 mL完全培养基的T25瓶或6 cm皿。

• 标记细胞信息后，置于37℃、5% CO₂培养箱中继续培养。

• 初次复苏KG-1A细胞时不建议直接使用T75瓶或10 cm皿，以免细胞浓度过低。

• 提示：复苏初期FBS浓度建议保持20%，待KG-1A细胞状态恢复稳定后可调整至常规条件。

KG-1A细胞传代（Subculture）

• 当KG-1A细胞密度达2–10 × 10⁵/mL，或培养基明显变黄、碎片增多时，需要进行传代。
  

• 轻轻混匀瓶内悬浮细胞，收集培养液。

• 1000 rpm离心3–5分钟，弃去上清。

• 使用新鲜IMDM + 20% FBS重悬KG-1A细胞。

• 计数后按1:2至1:4比例分装至新容器，补足培养基。

• 注意：KG-1A细胞为典型悬浮系，不需要胰酶消化。状态良好时可采用半换液的方式维持培养。

KG-1A细胞冻存（Cryopreservation）

• 选择对数生长期、活力较高的KG-1A细胞进行冻存。

• 以1100 rpm离心4分钟，弃去上清液。

• 配制冻存液：90% FBS + 10% DMSO，或50% IMDM + 40% FBS + 10% DMSO。

• 将KG-1A细胞重悬于预冷冻存液中，调整密度至5 × 10⁶ – 1 × 10⁷ 个/mL。

• 分装入冻存管，每管1 mL。

• 标签需注明KG-1A细胞、传代号及日期。

• 将冻存管放入4℃预冷的程序降温盒内约15分钟。

• 过渡至-80℃冰箱过夜，或使用程序降温夹逐步降温。

• 最终转入液氮罐长期保存。

KG-1A细胞培养注意事项

• 全程需在无菌条件下进行，避免污染。

• KG-1A细胞较为脆弱，培养密度过高或操作不当会降低活率。

• 初次复苏建议使用优质胎牛血清，并可短期提高浓度以改善存活。

• 定期观察KG-1A细胞形态和生长状态，确保培养体系稳定。