
MEG-01细胞(人成巨核细胞白血病细胞)
- 来源:人成巨核细胞转换期的骨髓细胞
- 细胞特征:半贴半悬 , 淋巴母细胞样
- 培养基:RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
- 其他:抗原表达:CD41+;CD61+;CDw14+
MEG-01细胞系源自一名患有慢性粒细胞白血病(CML)的55岁男性患者的骨髓成巨核细胞转换期。
MEG-01细胞的分离和研究始于1983年,由日本名古屋大学医学院完成。MEG-01细胞是超二倍体;模态数=56至58;费城染色体(Ph1)存在。
MEG-01细胞特性
MEG-01细胞表达细胞质因子VIII和表面球蛋白IIb/IIIa、高碘酸-Schiff(PAS)反应阳性、α醋酸萘酯酶和酸性磷酸酶阳性。
MEG-01细胞髓过氧化物酶、α丁酸萘酯酶、氯化醋酸AS-D萘苯酚酯酶和碱性磷酸酶阴性。
MEG-01细胞使用单克隆抗体BA-1(抗B细胞,粒性白细胞)、HPL-3(抗球蛋白IIb/IIIa)和20.3(抗单核细胞,血小板)染色,呈阳性。
MEG-01细胞对其他淋巴和骨髓类抗体染色呈阴性。
抗原表达:CD41+;CD61+;CDw14+
MEG-01细胞参数表
细胞名称 | MEG-01细胞(人成巨核细胞白血病细胞) |
细胞别称 | Meg-01; MEG01; Meg01; 人成巨核细胞白血病细胞 |
种属来源 | 人 |
组织来源 | 骨髓 |
疾病特征 | 慢性粒细胞白血病 |
细胞形态 | 淋巴母细胞样 |
生长特性 | 半贴半悬 |
生长培养基 | RPMI-1640+10% 胎牛血清 (FBS)+1% 青霉素/链霉素 (P/S) |
培养条件 | 气相:95% 空气 + 5% CO2,温度:37°C |
冻存液 | 60% 基础培养基 + 30% FBS + 10% DMSO,液氮冻存 |
倍增时间 | ~35-48 小时 |
推荐传代比例 | 1:2 - 1:3 |
推荐换液频率 | 每周 2-3 次 |
安全等级 | BSL1 |
质量检测 | 细菌、真菌、支原体检测均为阴性 |
基础参数 | 细胞直径约为10-15μm,生长速度中等,形态保持稳定,无细胞凋亡迹象。 |
培养相关的参数 | 培养密度约每平方厘米1-2×10^5个细胞,推荐在培养初期密度不要过高以避免细胞死亡。 |
其他参数 | 可耐受0.25%三乙胺叔丁酸酯(EDTA)和0.05%胰酶,但应避免长时间暴露于消化酶。 |
保藏机构 | ATCC; CRL-2021; JCRB; IFO50151 |
培养教程
MEG-01人成巨核细胞白血病细胞培养教程
细胞特性与培养要点
MEG-01细胞在培养过程中通常呈现少量黑点样碎片,无需特殊处理。大部分细胞呈不规则圆形悬浮状态,同时存在少量梭形贴壁细胞。
培养方法(以T25培养瓶为例)
MEG-01细胞属于半贴壁半悬浮细胞类型,建议维持细胞密度在3-10×10^5 cells/mL。初始接种密度不低于3×10^5 cells/mL,当细胞达到约10×10^5 cells/mL时进行传代。
培养操作
每隔3天进行一次细胞计数,根据密度调整操作。若细胞密度低于3×10^5 cells/mL,可使用小容器(如孔板)继续培养。
传代方法
半换液方法:当细胞密度不足8×10^5 cells/mL时,进行半换液。缓慢吸出一半培养液,以1200 rpm离心3分钟,收集细胞后加入等体积新鲜培养基轻轻吹打,接回原瓶继续培养。
1:2稀释传代:当细胞密度接近10×10^5 cells/mL时,将细胞等体积分装到两个新培养瓶中,每瓶补充新鲜培养基至总体积5 mL。
特殊注意事项
MEG-01细胞增殖较慢,对培养环境和操作敏感,需减少移动操作并保持稳定的培养温度。
尽可能减少吹打次数,传代和取样时轻轻吹打3-5次即可。
每天监测细胞状态,若密度过高未及时处理,易导致细胞死亡,需严格控制培养密度。
每3天至少进行一次半换液或传代,每周进行一次全离心换液。
冻存与复苏方法
推荐冻存密度:3~5×10^6 cells/mL。
冻存液配比:55% RPMI-1640 + 40% FBS + 5% DMSO。使用程序冻存盒进行梯度降温冻存,过夜置于-80°C冰箱后转移至液氮储存。
相关资料
STR鉴定及相关
Amelogenin | X,Y |
CSF1PO | 10 |
D2S1338 | 19 |
D3S1358 | 15 |
D5S818 | 13 |
D7S820 | 11 |
D8S1179 | 14,15 |
D13S317 | 8 |
D16S539 | 9 |
D18S51 | 18,22 |
D19S433 | 14,16 |
D21S11 | 29 |
FGA | 26 |
Penta D | 11,13 |
Penta E | 15 |
TH01 | 7 |
TPOX | 8,11 |
vWA | 16 |