
mm.1r细胞(人多发性骨髓瘤细胞)
- 来源:外周血;女性多发性骨髓瘤患者的外周血
- 细胞特征:悬浮和轻微的贴壁同时存在,成淋巴瘤细胞
- 培养基:生长培养基:1640+10% FBS+1% P/S
- 其他:mm.1r细胞系对地塞米松具有耐药性,而MM.1S细胞系对地塞米松敏感。
MM.1R细胞是1990年从一名42岁的黑人女性多发性骨髓瘤患者的外周血中分离,是一种B淋巴母细胞系。MM.1R细胞对地塞米松具有耐药性。MM.1R细胞是从母细胞株MM.1中衍生出来的,MM.1细胞是一种对类固醇疗法产生抗药性的多发性骨髓瘤患细胞。
mm.1r细胞特性
mm.1r细胞系对地塞米松具有耐药性,而MM.1S细胞系对地塞米松敏感。
mm.1r细胞复苏后需要大约两周才能恢复正常生长。
抗原表达:CD25阴性、CD38阳性、CD52阳性、CD59阳性
基因表达:λ轻链免疫球蛋白表达。
表达标记:表达糖皮质激素受体,但不表达。
mm.1r细胞参数表
细胞名称 | mm.1r细胞(人多发性骨髓瘤细胞) |
别称 | MM1R细胞, MM1.R细胞, MM-1R细胞, MM1-R细胞 |
中文名称 | 人多发性骨髓瘤细胞 |
细胞来源 | ATCC CRL-2975 |
组织来源 | 外周血 |
疾病特征 | 多发性骨髓瘤,对类固醇疗法耐药 |
患者年龄 | 42岁 |
患者性别 | 女性 |
生物安全等级 | 1 |
生长方式 | 悬浮和轻微贴壁 |
细胞形态 | 淋巴母细胞样 |
完全培养基 | RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S |
培养条件 | 37℃, 5% CO2 |
培养环境 | 气相:95%空气+5%二氧化碳;饱和湿度 |
传代比例 | 1:2至1:4,每周2次,或每2-3天一次 |
传代周期 | 3-5天 |
换液频率 | 2-3天一次 |
冻存条件 | 90%完全培养基+10% DMSO,液氮储存 |
抗原表达 | CD25-, CD38+, CD52+, CD59+ |
受体表达 | 糖皮质激素受体,未表达 |
基因表达 | λ轻链免疫球蛋白 |
运输方式 | 常温运输(T25培养瓶)或干冰运输(冻存管) |
支原体检测 | 阴性 |
倍增时间 | 32-48小时 |
细胞描述 | MM.1R细胞是从一位对类固醇疗法产生抗药性的多发性骨髓瘤患者的外周血中建立的,MM.1R对地塞米松耐药,近缘细胞系MM.1S对地塞米松敏感。 MM.1R细胞复苏后需要两周左右才能恢复正常生长。 |
培养教程
mm.1r人多发性骨髓瘤细胞培养教程
细胞传代
mm1r细胞生长至适当密度(通常为培养瓶表面的80%覆盖),首先弃去培养上清液。
用PBS润洗mm1r细胞:加入不含钙和镁离子的PBS,轻轻润洗mm1r细胞1-2次。
消化mm1r细胞:加入足量的0.25%胰蛋白酶-0.53mM EDTA消化液,确保消化液充分覆盖所有mm1r细胞表面。将培养瓶置于37℃培养箱中,通常1分钟后观察mm1r细胞是否变圆脱落。
终止消化:当大部分mm1r细胞开始变圆并脱离表面时,快速将培养瓶移回操作台,轻轻敲击几下培养瓶,并加入适量完全培养基终止消化过程。
收集mm1r细胞:将mm1r细胞悬液转移到15ml离心管中,以1000rpm离心4-5分钟,去除上清液。
mm1r细胞重悬:用1-2ml完全培养基轻轻悬浮mm1r细胞沉淀,然后根据需要按1:2的比例分配到新的含有充足培养基的培养瓶中。
培养条件:将培养瓶放入37℃、5% CO2的细胞培养箱中培养。在传代后24小时内更换新的培养基,以促进mm1r细胞生长和健康状态。
细胞冻存
mm1r细胞收集和计数:当mm1r细胞达到适当的生长状态时,可以进行冻存。收集mm1r细胞及培养液,转移至无菌离心管中。
离心和洗涤:以1000rpm离心4-5分钟,去除上清液,并用PBS洗涤一次。
mm1r细胞计数和冻存液配制:根据mm1r细胞计数,将mm1r细胞重悬于适量的冻存液中(通常为90% FBS + 10% DMSO),使mm1r细胞浓度在5×10^6~1×10^7细胞/ml之间。
冻存管标记和冷冻:将冻存液中的mm1r细胞按1ml/支分装入冻存管中,确保每支冻存管都标记清楚细胞类型、传代数、日期等信息。首先在-20℃冰箱中快速冷冻1.5小时,然后转移到-80℃冰箱中过夜,最终存储在液氮中长期保存。
细胞复苏
mm1r细胞解冻:从液氮中快速取出冻存管,将其迅速置于37℃水浴中,直到冻存管中的冰块完全融化。注意避免过度搅动或振荡,以免对mm1r细胞造成损伤。
mm1r细胞重悬:将冻存管中的mm1r细胞悬液缓慢加入到15ml离心管中,用预热的完全培养基轻轻悬浮mm1r细胞沉淀。
mm1r细胞分配:将悬液按需要分配到新的含有适量培养基的培养瓶中,通常每个T25瓶需要添加6ml完全培养基。
培养:将培养瓶放入37℃、5% CO2的细胞培养箱中培养。观察mm1r细胞的生长情况和密度,根据需要在培养后24小时内进行液体更换。
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Amelogenin | X |
CSF1PO | 9,14 |
D1S1656 | 11,12 |
D2S441 | 11 |
D2S1338 | 21,22 |
D3S1358 | 16,17 |
D5S818 | 8,12 |
D7S820 | 10,11 |
D8S1179 | 14 |
D10S1248 | 12,15 |
D12S391 | 17,24 |
D13S317 | 13 |
D16S539 | 12 |
D18S51 | 11,16 |
D19S433 | 13 |
D21S11 | 29,30 |
D22S1045 | 10,11 |
FGA | 20,24 |
Penta D | 2.2,9 |
Penta E | 13,15 |
TH01 | 7,8 |
TPOX | 8 |
vWA | 15,17 |