
原代小鼠骨髓间充质干细胞(bmscs细胞)
- 来源:骨髓
- 细胞特征:贴壁细胞 , 成纤维细胞样
- 培养基:原代细胞专用培养基
- 其他:BMSCs细胞具有免疫调节作用,通过分泌多种细胞因子(如IL-6、TGF-β等)抑制免疫反应
相关培养基&试剂
小鼠骨髓间充质干细胞(Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells, BMSCs)来源于小鼠骨髓的成体干细胞,具有高度自我更新能力和多向分化潜能,可分化为骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞等多种细胞类型,广泛应用于再生医学和干细胞研究。
BMSCs细胞通常从成年小鼠的胫骨或股骨骨髓腔中分离,通过冲洗和离心等步骤获得富含间充质干细胞的细胞悬液,其在骨髓中的比例较低,仅占有核细胞总数的0.001%~0.1%。小鼠BMSCs细胞在体外培养时表现为成纤维细胞样形态,依赖贴壁生长,其增殖和分化易受种植密度、培养基成分、血清比例、温度及pH值等条件的影响。由于其优良的多向分化能力、低免疫原性及良好的扩增性,BMSCs细胞在组织修复、软骨再生、神经损伤修复及细胞治疗研究中具有重要价值。
原代小鼠骨髓间充质干细胞(bmscs细胞)特性特征
BMSCs细胞具有高度的自我更新能力,能够在适当的培养条件下持续增殖而不失去干细胞特性,在体外培养时可以获得大量细胞供研究和应用使用。
BMSCs细胞能够向多种细胞类型分化,包括:
成骨细胞:在成骨诱导条件下,BMSCs能够分化为骨细胞,参与骨组织的形成与修复。
软骨细胞:在适当的诱导条件下,BMSCs可分化为软骨细胞,有助于关节和软骨的再生。
脂肪细胞:通过特定的诱导因子,BMSCs能够转变为脂肪细胞,参与脂肪组织的形成。
BMSCs细胞具有一系列特定的表面标志物,包括:CD90(Thy-1)、CD73、CD105。不表达造血干细胞标志物如CD45和CD34。
BMSCs细胞在基因水平上表现出与干细胞相关的基因表达,如:Oct4、Sox2、Nanog等与干细胞自我更新和多能性相关的转录因子。
在分化过程中,BMSCs细胞会激活特定基因,例如成骨相关基因(如Runx2、Osterix)和成脂肪相关基因(如PPARγ)。
BMSCs细胞具有免疫调节作用,能够通过分泌多种细胞因子(如IL-6、TGF-β等)抑制免疫反应。
原代小鼠骨髓间充质干细胞(bmscs细胞)参数表
细胞名称 | 原代小鼠骨髓间充质干细胞(bmscs细胞) |
英文名称 | Mouse Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells , BMSCs,MSCs |
种属来源 | 小鼠,C57BL/6品系 |
组织来源 | 骨髓 |
细胞形态 | 成纤维细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
特性 | BMSC在骨髓中的比例0.001%-0.1% |
培养基 | 原代成纤维细胞专用培养基 |
传代比例 | 1:3 - 1:6 |
传代周期 | 每48-72小时更换培养液 |
培养条件 | 气相:95%空气 + 5% CO₂,温度:37℃ |
pH值 | 7.2 - 7.4 |
冻存液组成 | 60%基础培养基 + 30% FBS + 10% DMSO |
冻存方式 | 液氮储存 |
微生物检测 | 无细菌、真菌、支原体污染 |
毒素检测 | <10 EU/mL |
表面标志物 | CD90、CD73、CD105阳性;CD45、CD34阴性 |
基因表达特征 | Oct4、Sox2、Nanog等干细胞相关基因表达 |
自我更新能力 | 高度自我更新能力 |
多向分化潜能 | 向骨、软骨、脂肪等多种细胞类型分化 |
再生医学 | 用于组织修复和再生 |
免疫调节 | 在自身免疫疾病和移植排斥反应中的应用 |
注意事项 | 建议用多聚赖氨酸 PLL(0.1mg/ml)或明胶(0.1%)对接种培养皿包被处理 |
培养教程
原代小鼠骨髓间充质干细胞(bmscs细胞)培养教程
BMSCs细胞培养
将单细胞悬液调整至适当浓度(约25×10⁶细胞/mL),分装到6孔板或培养瓶中。
每孔添加1.5 mL培养基,接种后放置于37℃、5% CO₂的培养箱中培养,确保BMSCs细胞快速贴壁生长。
初始培养48小时内不更换培养基,便于BMSCs细胞贴壁。
48小时后,用PBS轻轻清洗,去除未贴壁的悬浮细胞,并补充新鲜培养基。
每2-3天更换一次培养基,保持培养基清洁和细胞营养供给。
定期通过显微镜观察BMSCs细胞的生长状态,贴壁细胞呈纤维状且快速增殖。
BMSCs细胞传代
当培养瓶或培养孔的BMSCs细胞融合度达到80%-90%时,可进行传代。
用PBS清洗培养瓶,随后加入0.25%胰蛋白酶(2 mL),室温作用1-2分钟至细胞松散。
加入等量新鲜培养基终止消化,轻轻吹打混匀后离心收集细胞。
将BMSCs细胞沉淀重悬于新鲜培养基中,按1:2或1:3的比例重新接种。
BMSCs细胞的质量检测与鉴定
第三代BMSCs细胞可通过流式细胞仪检测表面标志物,如CD90和CD73,验证细胞的间充质特性。
可通过成骨和成脂实验检测BMSCs细胞的分化能力,以进一步确认细胞特性。
注意事项
培养过程中应避免BMSCs细胞过度传代,以保证干细胞特性。
所有试剂和操作需保持无菌条件,避免污染对BMSCs细胞的影响。
STR鉴定及相关
参考文献
- bEnd.3细胞来源外泌体促成骨效应的体外研究 中华实验外科杂志 > 2021年3期
- 摘要:目的:观察小鼠脑微血管内皮细胞bEnd.3来源的外泌体对骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨...
- 人骨髓间充质干细胞对HCC827肺癌移植瘤血管生成的影响 《山西医科大学》 2016年
- 摘要:目的:1、探讨经尾静脉输入的人骨髓间充质干细胞(h BMSCs)在人HCC827肺腺癌皮下...
- 查看完整内容 >
上一篇:小鼠原代前脂肪细胞
下一篇:原代小鼠脐带间充质干细胞