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货号：STM-CL-5343 规格：1×10⁶cells/T25培养瓶或1mL冻存管
U266细胞（U266B1人多发性骨髓瘤细胞）
- 来源：骨髓瘤；B淋巴细胞
- 细胞特征：悬浮细胞， 淋巴母细胞样
- 培养基：RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S
- 其他：基因表达：免疫球蛋白，单克隆抗体，白细胞介素-6 (IL-6) ；同种型：IgE，λ轻链
U266 [U266B1]人多发性骨髓瘤细胞是从一名53岁男性多发性骨髓瘤患者的外周血中分离出的B淋巴细胞，常用于研究免疫系统疾病和免疫学。U266细胞系在1970年由N.K. Nilsson建立，源于骨髓瘤患者的B淋巴细胞，具备浆细胞的特征。
U266细胞特性特征
U266细胞主要为悬浮生长，部分细胞可能附着在培养瓶底
U266细胞表达与体内骨髓瘤细胞相同的免疫球蛋白；产生人白细胞介素-6 (IL-6)；产生IgE和λ轻链
基因表达：表达免疫球蛋白基因、表达单克隆抗体基因、表达白细胞介素-6基因；
U266细胞参数表
| 细胞名称 | U266细胞（U266B1人多发性骨髓瘤细胞） |
| 细胞别称 | U266-B1; U266B1; U-266; U266; U266S; U266BL; U266Bl; 266Bl |
| 来源 | 浆细胞骨髓瘤；男性；53岁 |
| 细胞形态 | 淋巴母细胞样 |
| 细胞类型 | 肿瘤细胞，B淋巴细胞 |
| 生长特性 | 悬浮细胞，部分细胞可能附着 |
| 建立时间 | 1970年（由N.K. Nilsson建立） |
| 收录 | ATCC |
| 生物安全等级 | 1级 |
| 致瘤性 | 是 |
| 推荐培养基 | RPMI-1640 + 15% FBS + 1% P/S |
| 培养环境 | 37℃，5% CO2，饱和湿度 |
| 换液周期 | 2-3天 |
| 培养基体积 | T25瓶：10-12ml；10cm皿：12-15ml |
| 传代比例 | 1:2-1:4（具体情况视细胞生长速度及密度决定） |
| 基因表达 | 免疫球蛋白，单克隆抗体，白细胞介素-6 (IL-6) |
| 同种型 | IgE，λ轻链 |
| 应用 | 3D细胞培养，免疫系统疾病研究，免疫学研究，转染宿主 |
| 冻存液配方 | 92% FBS + 8% DMSO |
| 冻存规格 | 200-300万/ml，1ml每管 |
| 无菌检测 | 细菌、酵母、支原体检测均为阴性 |
| 病原体检查 | HIV、乙型肝炎、丙型肝炎检查均为阴性 |
| 安全性 | 所有肿瘤和病毒转染的细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护 |
| 保存条件 | 液氮存储 |
| 供应限制 | 仅供科学研究之用 |
培养教程
U266人多发性骨髓瘤细胞培养教程
传代方法
混匀细胞: 将培养瓶中的U266细胞轻轻混匀。
收集细胞: 将细胞培养基转移至离心管中，以900rpm离心3-5分钟，弃去上清。
重悬细胞: 加入新的完全培养基，轻轻重悬U266细胞。
分装细胞: 将U266细胞悬液均匀分配到新的培养瓶中。
补充培养基: 补足完全培养基，并将培养瓶放回培养箱继续培养。
冻存方法
离心细胞: 将U266细胞离心后，加入配置好的冻存液轻轻重悬细胞。
移入冻存管: 将细胞悬液快速移入标记好的冻存管中。
程序冻存: 将冻存管放入程序冻存盒，放入-80℃冰箱中过夜，然后转入液氮保存。
无程序冻存盒: 将冻存管放置于泡沫盒中于4℃静置5-10分钟，再转至-20℃冰箱静置2小时，随后转入-80℃冰箱过夜，再转入液氮保存。
细胞复苏
快速解冻: 将冻存管从液氮中取出，立即放入37℃水浴中解冻，轻轻摇动冻存管以加速解冻。
离心去除DMSO: 解冻后将U266细胞悬液转移至含有10ml完全培养基的离心管中，以900rpm离心5分钟，弃去上清。
重悬细胞: 加入新鲜完全培养基，轻轻重悬U266细胞，转移至培养瓶中并放入培养箱培养。
细胞观察
活细胞: 圆形透亮，细胞膜完整的U266细胞。
死细胞: 细胞膜破裂，细胞内容物外泄的U266细胞。
注意事项
悬浮细胞处理: 部分悬浮U266细胞可能会附着于培养瓶底部，轻轻晃动培养基或用吸管轻轻吹打细胞层可使其脱落，无需胰酶消化。
细胞吹打: 使用培养皿更适合吹打U266细胞操作，吹打时应尽量轻柔，避免产生过多气泡以免影响细胞状态。
无菌操作: 所有操作应在无菌条件下进行，防止U266细胞污染。
细胞冻存活性检查: 冻存后及时复苏U266细胞以检查冻存活性，若发现异常，及时调整实验方案。
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STR鉴定及相关
| Amelogenin | X,Y |
| CSF1PO | 12,13 |
| D1S1656 | 12,15 |
| D2S441 | 10,11 |
| D2S1338 | 20,23 |
| D3S1358 | 17 |
| D5S818 | 11,12 |
| D6S1043 | 11,17 |
| D7S820 | 11,12 |
| D8S1179 | 13 |
| D10S1248 | 14 |
| D12S391 | 18 |
| D13S317 | 12 |
| D16S539 | 10 |
| D18S51 | 12,14 |
| D19S433 | 13,15 |
| D21S11 | 28,29 |
| D22S1045 | 15,16 |
| DYS391 | 10 |
| FGA | 18 |
| Penta D | 10,13 |
| Penta E | 10,12 |
| TH01 | 5,7 |
| TPOX | 8 |
| vWA | 17 |
参考文献
- 肾癌细胞系786-O中Rho~（high）类干细胞侧群的生物学特征研究 《兰州大学》 2009年
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