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P3X63Ag8(小鼠骨髓瘤细胞)货号:STM-CL-6506 规格:1×10⁶cells/T25培养瓶或1mL冻存管

P3X63Ag8(小鼠骨髓瘤细胞)

  • 来源:B淋巴细胞;浆细胞;骨髓瘤
  • 细胞特征:悬浮细胞 , 淋巴母细胞样
  • 培养基:DMEM+10% FBS+1% P/S
  • 其他:抗原表达:表达H-2d抗原; 基因表达:能够表达免疫球蛋白和单克隆抗体
价格:¥ 950.00
提供STR鉴定报告

P3X63Ag8鼠骨髓瘤细胞源自P3K细胞株,后者起源于浆细胞MOPC-21的组织培养株。P3X63Ag8细胞系为超二倍体,模态数为65。P3X63Ag8细胞表达抗原H-2d和免疫球蛋白,并产生单克隆抗体。经检测,发现鼠痘病毒呈阴性。

P3X63Ag8小鼠骨髓瘤细胞特性特征

  • 抗原表达:表达H-2d抗原。

  • 基因表达:能够表达免疫球蛋白和单克隆抗体。

  • p3x63ag8细胞缺乏3-酮类固醇还原酶活性,是胆固醇营养缺陷型细胞。

  • 对0.1 mM 8-氮鸟嘌呤具有抗性。

  • 在HAT(次黄嘌呤-氨基喋呤-胸腺嘧啶)培养基中无法存活。

  • p3x63ag8细胞能够生成但不分泌免疫球蛋白

P3X63Ag8小鼠骨髓瘤细胞参数表

细胞名称P3X63Ag8(小鼠骨髓瘤细胞)
细胞类型小鼠骨髓瘤细胞
细胞来源P3K细胞株,源自浆细胞MOPC-21的组织培养株
细胞形态淋巴母细胞样
生长特性悬浮生长
模态数65(超二倍体)
抗原表达H-2d
基因表达免疫球蛋白,单克隆抗体
倍增时间2-3天
安全等级BSL1
培养基RPMI-1640 + 10% FBS
培养条件37°C,5% CO2
传代比例1:2
冻存条件基础培养基 + 8% DMSO + 20% FBS,液氮保存
细胞密度1x10^5 到 1x10^6 cells/mL
pH值7.0-7.4
渗透压280-320 mOsm/kg
抗性对0.1 mM 8-氮鸟嘌呤具有抗性
敏感性在HAT培养基中死亡
胆固醇营养由于缺失3-酮类固醇还原酶活性,这些细胞是胆固醇营养缺陷型细胞
病毒检测鼠痘病毒阴性
支原体检测阴性
细菌、酵母和真菌检测阴性
主要用途杂交瘤融合的配体细胞,单克隆抗体生产
其他用途骨髓瘤相关研究,化学药物和MicroRNA治疗研究

培养教程

P3X63Ag8小鼠骨髓瘤细胞培养教程

P3X63Ag8细胞复苏

  • 从液氮中取出冻存的P3X63Ag8细胞,在37°C水浴中快速解冻(1-2分钟)。

  • 将P3X63Ag8细胞悬液转移到含10mL预热培养基的15mL离心管中。

  • 以800 rpm离心5分钟,弃去上清。

  • 用新鲜培养基重悬P3X63Ag8细胞,转移到培养瓶中。

常规培养

  • 保持P3X63Ag8细胞密度在1x10^5到1x10^6 cells/mL之间。

  • 每2-3天观察P3X63Ag8细胞状态,根据需要进行传代。

传代步骤

  • 收集P3X63Ag8细胞悬液,以800 rpm离心5分钟。

  • 弃去上清,用新鲜培养基重悬P3X63Ag8细胞。

  • 按1:2的比例分配到新的培养瓶中。

  • 补充新鲜培养基至适当体积。

P3X63Ag8细胞冻存

  • 准备冻存液:基础培养基 + 8% DMSO + 20% FBS。

  • 收集对数生长期的P3X63Ag8细胞并计数。

  • 调整P3X63Ag8细胞浓度至2-5x10^6 cells/mL。

  • 将P3X63Ag8细胞悬液与等体积的2倍浓度冻存液混合。

  • 分装到冻存管中,每管1mL。

  • 使用程序降温盒在-80°C冰箱中缓慢降温。

  • 24小时后转移到液氮中长期保存。

注意事项

  • 定期检查P3X63Ag8细胞形态和生长状态。

  • 保持无菌操作,防止污染。

  • 避免P3X63Ag8细胞过度生长或密度过低。

  • 定期进行支原体检测。

  • 若不使用抗生素,需更频繁地更换培养基。

特殊处理

  • 由于P3X63Ag8细胞是胆固醇营养缺陷型,可能需要在培养基中额外添加胆固醇或相关前体物质。

质量控制

  • 定期检查P3X63Ag8细胞的生长曲线和倍增时间。

  • 监测P3X63Ag8细胞的抗体产生能力(如适用)。

  • 进行P3X63Ag8细胞特性鉴定,如流式细胞术分析表面标记物。

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