
P3X63Ag8(小鼠骨髓瘤细胞)
- 来源:B淋巴细胞;浆细胞;骨髓瘤
- 细胞特征:悬浮细胞 , 淋巴母细胞样
- 培养基:DMEM+10% FBS+1% P/S
- 其他:抗原表达:表达H-2d抗原; 基因表达:能够表达免疫球蛋白和单克隆抗体
P3X63Ag8鼠骨髓瘤细胞源自P3K细胞株,后者起源于浆细胞MOPC-21的组织培养株。P3X63Ag8细胞系为超二倍体,模态数为65。P3X63Ag8细胞表达抗原H-2d和免疫球蛋白,并产生单克隆抗体。经检测,发现鼠痘病毒呈阴性。
P3X63Ag8小鼠骨髓瘤细胞特性特征
抗原表达:表达H-2d抗原。
基因表达:能够表达免疫球蛋白和单克隆抗体。
p3x63ag8细胞缺乏3-酮类固醇还原酶活性,是胆固醇营养缺陷型细胞。
对0.1 mM 8-氮鸟嘌呤具有抗性。
在HAT(次黄嘌呤-氨基喋呤-胸腺嘧啶)培养基中无法存活。
p3x63ag8细胞能够生成但不分泌免疫球蛋白
P3X63Ag8小鼠骨髓瘤细胞参数表
细胞名称 | P3X63Ag8(小鼠骨髓瘤细胞) |
细胞类型 | 小鼠骨髓瘤细胞 |
细胞来源 | P3K细胞株,源自浆细胞MOPC-21的组织培养株 |
细胞形态 | 淋巴母细胞样 |
生长特性 | 悬浮生长 |
模态数 | 65(超二倍体) |
抗原表达 | H-2d |
基因表达 | 免疫球蛋白,单克隆抗体 |
倍增时间 | 2-3天 |
安全等级 | BSL1 |
培养基 | RPMI-1640 + 10% FBS |
培养条件 | 37°C,5% CO2 |
传代比例 | 1:2 |
冻存条件 | 基础培养基 + 8% DMSO + 20% FBS,液氮保存 |
细胞密度 | 1x10^5 到 1x10^6 cells/mL |
pH值 | 7.0-7.4 |
渗透压 | 280-320 mOsm/kg |
抗性 | 对0.1 mM 8-氮鸟嘌呤具有抗性 |
敏感性 | 在HAT培养基中死亡 |
胆固醇营养 | 由于缺失3-酮类固醇还原酶活性,这些细胞是胆固醇营养缺陷型细胞 |
病毒检测 | 鼠痘病毒阴性 |
支原体检测 | 阴性 |
细菌、酵母和真菌检测 | 阴性 |
主要用途 | 杂交瘤融合的配体细胞,单克隆抗体生产 |
其他用途 | 骨髓瘤相关研究,化学药物和MicroRNA治疗研究 |
培养教程
P3X63Ag8小鼠骨髓瘤细胞培养教程
P3X63Ag8细胞复苏
从液氮中取出冻存的P3X63Ag8细胞,在37°C水浴中快速解冻(1-2分钟)。
将P3X63Ag8细胞悬液转移到含10mL预热培养基的15mL离心管中。
以800 rpm离心5分钟,弃去上清。
用新鲜培养基重悬P3X63Ag8细胞,转移到培养瓶中。
常规培养
保持P3X63Ag8细胞密度在1x10^5到1x10^6 cells/mL之间。
每2-3天观察P3X63Ag8细胞状态,根据需要进行传代。
传代步骤
收集P3X63Ag8细胞悬液,以800 rpm离心5分钟。
弃去上清,用新鲜培养基重悬P3X63Ag8细胞。
按1:2的比例分配到新的培养瓶中。
补充新鲜培养基至适当体积。
P3X63Ag8细胞冻存
准备冻存液:基础培养基 + 8% DMSO + 20% FBS。
收集对数生长期的P3X63Ag8细胞并计数。
调整P3X63Ag8细胞浓度至2-5x10^6 cells/mL。
将P3X63Ag8细胞悬液与等体积的2倍浓度冻存液混合。
分装到冻存管中,每管1mL。
使用程序降温盒在-80°C冰箱中缓慢降温。
24小时后转移到液氮中长期保存。
注意事项
定期检查P3X63Ag8细胞形态和生长状态。
保持无菌操作,防止污染。
避免P3X63Ag8细胞过度生长或密度过低。
定期进行支原体检测。
若不使用抗生素,需更频繁地更换培养基。
特殊处理
由于P3X63Ag8细胞是胆固醇营养缺陷型,可能需要在培养基中额外添加胆固醇或相关前体物质。
质量控制
定期检查P3X63Ag8细胞的生长曲线和倍增时间。
监测P3X63Ag8细胞的抗体产生能力(如适用)。
进行P3X63Ag8细胞特性鉴定,如流式细胞术分析表面标记物。
相关资料
- 人胚肺细胞与干细胞的区别
- 人类胚胎肺细胞和干细胞是两种细胞类型,它们在多个方面存在着显著的差异,包括来源、特性和用途...
- 查看完整内容 >