
MS-5细胞(小鼠骨髓基质细胞)
- 来源:骨髓
- 细胞特征:贴壁细胞 , 成纤维细胞样
- 培养基:1640+10% FBS+1% P/S
- 其他:基因表达:MS-5细胞表达多种与造血支持相关的因子,如: 细胞因子:如IL-6、IL-3、GM-CSF等; 生长因子:如SCF(干细胞因子)
MS-5小鼠骨髓基质细胞系是通过从C3H/HeJ小鼠骨髓中提取并经过长期培养建立的贴壁成纤维样细胞系。MS-5细胞系在造血微环境研究中有重要应用,尤其是在支持造血干细胞增殖与分化方面。MS-5细胞来源于遗传稳定性良好的C3H/HeJ小鼠,研究人员通过从其骨髓中分离出细胞,在特定培养条件下长期培养,使细胞逐渐展现出贴壁生长的成纤维样形态。随后,细胞接受辐射处理,抑制其过度增殖,形成稳定的基质细胞系。MS-5细胞系的成纤维样形态及其支持造血功能的能力,使其在干细胞研究、骨髓微环境以及再生医学等领域具有重要的应用价值。
MS-5细胞特性特征
基因表达:MS-5细胞表达多种与造血支持相关的因子,如细胞因子和生长因子,这些因子对造血干细胞的增殖和分化起到促进作用。
表面标志物:MS-5细胞系可能表达一些成纤维细胞特有的标志物,如CD44、CD90等,这些标志物在细胞间相互作用中发挥重要作用。
造血微环境研究:MS-5细胞广泛用于研究骨髓微环境对造血干细胞的影响,能有效模拟体内造血环境。
MS-5细胞参数表
细胞名称 | MS-5细胞(小鼠骨髓基质细胞) |
细胞别称 | MS5; Mouse Stromal-5 |
形态特性 | 成纤维细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
种属来源 | 小鼠 |
组织来源 | 骨髓 |
细胞代数 | 10代以内 |
细胞规格 | 1×10^6 cells/T25培养瓶或1 mL冻存管包装 |
培养体系 | RPMI 1640 + 10% FBS + 1% P/S |
气相条件 | 空气95%;CO₂ 5% |
培养温度 | 37℃ |
pH值范围 | 7.2 - 7.4 |
倍增时间 | ~50 hours (DSMZ=ACC-441). |
传代方法 | 建议当细胞密度达到80%-90%时进行传代,通常1:2比例 |
冻存条件 | 90% FBS + 10% DMSO,推荐使用无血清冻存液 (CX001) |
支原体检测 | 无 |
用途 | 科学研究,不可用于动物或人类疾病的治疗产品 |
培养教程
MS-5小鼠骨髓基质细胞培养教程
细胞复苏
从液氮中取出冻存的MS5细胞,立即将其放入37℃水浴中进行快速解冻(约1-2分钟)。
将解冻后的MS5细胞转移至含9 mL预热培养基的离心管中,轻轻混匀。
在1000 rpm下离心4分钟,弃去上清液。
用1 mL PBS重悬MS5细胞,并进行细胞计数以确认细胞浓度。
根据实验需求,调整MS5细胞的接种密度(通常为1×10^5至1×10^6细胞/mL),将重悬的细胞加入培养瓶中。
将培养瓶放入CO₂培养箱中,让MS5细胞在适宜条件下贴壁生长。
传代
当MS5细胞生长至80%-90%汇合时,进行传代操作。
用PBS洗涤细胞,以去除残留的培养基。
加入适量的0.25%胰酶消化细胞,通常消化时间为2-5分钟。
用培养基中和胰酶,轻轻吹打混匀以确保细胞完全复悬。
在1000 rpm下离心4分钟,弃去上清液并用PBS洗涤一次。
用新鲜培养基重悬MS5细胞,并按照之前的接种密度接种到新的培养瓶中。
冻存
在适当时机(如传代后),进行MS5细胞冻存:
将细胞重悬于90% FBS与10% DMSO的混合液中。
分装至冻存管中,确保标记清楚。
在-80℃冰箱中逐步降温(每小时约降温1℃),然后转移至液氮中保存。