
SUPB15细胞(人Ph+急淋白血病细胞)
- 来源:白血病
- 细胞特征:悬浮细胞,淋巴母细胞样
- 培养基:IMDM+20% FBS(澳洲胎牛)+0.05mM β-mercaptoethanol+1% P/S
- 其他:SUP-B15细胞表达多个B细胞标记物,如β-2微球蛋白、Leu12、My7(CD13)、OKT9(CD10),但不表达T细胞标记物
SUP-B15是一株人源的Ph+急性淋巴细胞白血病(ALL)B淋巴母细胞系,是从一位8岁白人男童的骨髓样本中分离。SUPB15细胞系广泛应用于免疫学和相关疾病的研究。SUP-B15细胞核型为46, XY,具有以下染色体标记:t(9;22)(q34;q11) 费城染色体,t(4;14)(p11;q24),及der(4)t(1;4)。
SUP-B15细胞系主要由悬浮生长的圆形B淋巴母细胞组成。由于其Ph+表型,在急性淋巴细胞白血病的生物学特性及其对化疗药物敏感性研究中被广泛使用。
SUPB15细胞特性特征
SUP-B15细胞表达多种B谱系标记,但不表达T细胞标记。
阳性表达:CD10+、CD13+、CD38+、CD71+、HLA-DR+。
阴性表达:CD1a-、CD2-、CD3-、CD4-、CD5-、CD8-、sIg-(表面免疫球蛋白)。
免疫球蛋白:SUPB15细胞内表达免疫球蛋白(Ig),显示出其B细胞的特性。
SUPB15细胞对表面免疫球蛋白和EB病毒(EBV)检测也呈阴性。
对CB1、Leu 1(CD5)、Leu2(CD8)、Leu3(CD4)、Leu4(CD3)、Leu5(CD2)、亮氨酸6(CD1a)、Leu9、Leu M1(CD15)、My9(CD33)、表面免疫球蛋白(sIg-)和爱泼斯坦-巴尔病毒呈阴性。
血管新生相关基因:SUPB15细胞中VEGF、Flt-1、PlGF、Ang1、Ang2和IGF-1等基因的表达相对较低,这些基因在血管新生的启动及整个血管形成过程中起重要作用。
药物敏感性:SUPB15细胞对化疗药物(如长春新碱、柔红霉素、左旋门冬酰胺酶及地塞米松)表现出不同程度的敏感性,尤其对柔红霉素和地塞米松的敏感性较高。
SUPB15细胞参数表
细胞名称 | SUPB15细胞(人Ph+急淋白血病细胞) |
别名 | Sup-B15; SUPB-15; SUPB15; SupB15; SupB15W; SupB15WT |
来源 | 一名8岁白人男性急性淋巴细胞白血病患者骨髓 |
细胞形态 | 圆形 |
生长状态 | 悬浮生长 |
纯度规格 | 99.99% |
培养基 | IMDM+20% FBS(澳洲胎牛)+0.05mM β-mercaptoethanol+1% P/S |
培养条件 | 37°C,5% CO₂ |
保存条件 | 常温培养或液氮冻存 |
细胞传代 | 每3-4天传代一次,细胞密度达到70%-80%时传代 |
细胞密度 | 1-2 x 10^6 cells/mL |
免疫球蛋白表达 | 细胞质中表达免疫球蛋白 |
相关基因表达 | VEGF、Flt-1、PlGF、Ang1、Ang2、IGF-1等 |
抗原阳性 | CD10+、CD13+、CD38+、CD71+、HLA-DR+ |
抗原阴性 | CD1a-、CD2-、CD3-、CD4-、CD5-、CD8-、sIg- |
药物敏感性 | 对柔红霉素、左旋门冬酰胺酶和地塞米松敏感 |
IC50值 | 柔红霉素:26.3 µmol/L,地塞米松:较高敏感 |
迁移侵袭能力 | 迁移和侵袭能力相对较低 |
细胞凋亡率 | 在药物处理后早期凋亡率和晚期凋亡率分别为9.47%和4.77% |
细胞聚集 | 与基质细胞共培养时呈现聚集生长趋势 |
培养教程
SUPB15人Ph+急淋白血病细胞培养教程
细胞复苏步骤
从液氮中取出冻存的SUPB15细胞管,迅速在37°C水浴中融化,确保迅速操作以保护SUPB15细胞活性。
将融化的SUPB15细胞缓慢加入预热的完全培养基中,轻轻混匀。
以100-150 g离心5分钟,弃去上清液以保留SUPB15细胞。
使用5 mL预热的培养基重悬SUPB15细胞。
将重悬的SUPB15细胞接种到T25培养瓶中,置于37°C,5% CO₂培养箱中静置培养。
常规传代操作
SUPB15细胞通常每3-4天传代一次,细胞密度达到0.5-1 x 10^6 cells/mL时进行传代。
轻轻吹打SUPB15细胞悬液使其均匀分布。
取适量SUPB15细胞悬液,100 g离心5分钟,弃去上清。
使用适量预热培养基重悬SUPB15细胞,并根据所需接种密度调整悬液体积。
将重悬后的SUPB15细胞接种至新培养瓶中,继续在37°C,5% CO₂条件下培养。
重要注意事项
SUPB15细胞对胎牛血清的质量要求较高,建议使用优质胎牛血清以确保SUPB15细胞的健康生长。
复苏后的SUPB15细胞生长较慢,应优先选用复苏良好的细胞进行实验。
培养基中需额外添加0.05 mM β-巯基乙醇,以提高SUPB15细胞的增殖活性。
SUPB15细胞密度不宜超过2 x 10^6 cells/mL,过高密度可能影响其生长状态。
培养过程中如SUPB15细胞出现团块,可轻轻吹打以散开,确保其悬浮生长状态。
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Amelogenin | X,Y |
CSF1PO | 11,12 |
D2S1338 | 20,23 |
D3S1358 | 15,16 |
D5S818 | 12,13 |
D7S820 | 10,11 |
D8S1179 | 11,14 |
D13S317 | 8,14 |
D16S539 | 11,12 |
D18S51 | 14 |
D19S433 | 13,15 |
D21S11 | 28,31 |
FGA | 19,20 |
Penta D | 9,12 |
Penta E | 21 |
TH01 | 6,9.3 |
TPOX | 8,9 |
vWA | 15,17 |