ARH77细胞（人浆细胞白血病细胞系）

ARH77细胞系是来源于一名33岁白人女性（患有IgG型浆细胞白血病）的外周血样本。最初被认为是浆细胞白血病的模型，但研究发现，ARH77细胞系是通过EB病毒（EBV）转化形成的B淋巴母细胞样细胞系。
ARH77细胞系也用于衍生其他相关细胞株，如HMy2.C1R，通过照射和选择I类抗原丢失的突变体HMy2后，进一步开发出C1R-neo、C1R-sB7和C1R-B7细胞株。
ARH77细胞系广泛用于研究免疫学及相关免疫系统疾病，尤其在多发性骨髓瘤和浆细胞白血病的药物筛选及治疗靶点探索中具有重要意义。ARH77细胞系在美国国家标准与技术研究院（ATCC）被命名为CRL-1621。

ARH77细胞特性特征

• ARH77细胞表面表达经典的浆细胞标志CD38和CD138
  

• 少数细胞表达CD20、CD44、CD45、CD19和CD23

• ARH77细胞对EB核抗原（EBNA+）和EB病毒衣壳抗原（EBVCA+）呈阳性，表明细胞被EB病毒转化

• ARH77细胞表达CD11a、CD19、CD28、CD49e，不表达CD38

• ARH77细胞免疫球蛋白表型为IgG1，κ轻链

• ARH77细胞之前曾感染支原体，但已经治愈
  

• ARH77细胞系被广泛用于多发性骨髓瘤和浆细胞白血病的研究，尤其是药物筛选和治疗靶点的探索

ARH77细胞参数表

ARH77人浆细胞白血病细胞培养教程

ARH77细胞复苏

• 配制完全培养基：RPMI-1640培养基，添加10%胎牛血清（FBS）和1%青霉素/链霉素（P/S）。提前将完全培养基预热至37℃。
  

• 将冻存的ARH77细胞悬液快速放入37℃水浴中，注意甩动冻存管使ARH77细胞均匀解冻，避免长时间水浴。
  

• 解冻后的ARH77细胞悬液转移至15ml离心管，加入4ml完全培养基，轻轻混匀。以1000 RPM离心4分钟，弃去上清液。
  

• 使用1-2ml完全培养基轻轻吹打重悬ARH77细胞。确认细胞充分分散，避免细胞团聚。
  

• 将重悬的ARH77细胞悬液转移至T25培养瓶中，或将其放入10cm培养皿中，补充约8ml完全培养基。置于37℃、5% CO₂培养箱中孵育过夜。
  

ARH77细胞传代

• 第二天观察ARH77细胞的生长状态，确保细胞密度达到80%-90%，并确认无污染。ARH77细胞为悬浮生长型细胞，容易在培养基中形成悬浮团块。
  

• 传代时，先弃去旧的培养基，用无钙、镁的PBS洗涤ARH77细胞1-2次。
  

• 因ARH77细胞为悬浮细胞，无需胰蛋白酶消化，直接通过离心收集细胞悬液。将细胞悬液转移至15ml离心管中，1000 RPM离心4分钟，弃去上清。

• 使用新鲜的完全培养基重悬ARH77细胞悬液，按1:2或1:3比例进行稀释传代。重悬后的ARH77细胞移入新的培养瓶中，添加8-10ml新鲜培养基。继续孵育于37℃、5% CO₂的培养箱中。
  

ARH77细胞冻存

• 当ARH77细胞生长良好、密度合适时（通常为80%-90%），准备冻存。
  

• 先将ARH77细胞收集并离心，弃去上清。使用冷冻保护剂（如90%胎牛血清+10%DMSO）重悬细胞，确保细胞密度不低于1 x 10⁶/ml。

• 每管冻存1ml的ARH77细胞悬液，并对冻存管进行清晰标识。
  

• 将冻存管置于程序降温盒中，慢速降温至-80℃，之后转移至液氮罐中长期保存。

ARH77细胞培养中的注意事项

• ARH77细胞为悬浮型生长，进行传代时要注意小心处理悬浮细胞，避免操作时细胞流失。离心步骤尤其重要，避免使用胰酶等消化剂。
  

• 培养基需按标准配制，新鲜的培养基能够提供更好的ARH77细胞生长环境，避免使用经过多次处理的旧培养基。
  

• 所有操作应在二级生物安全柜内进行，防止污染。工作人员需穿戴合适的个人防护装备，确保安全操作。