DAMI细胞系（人巨核细胞白血病细胞系）

DAMI细胞是一株从巨核细胞白血病患者外周血中建立的人类巨核细胞白血病细胞系，广泛用于研究巨核细胞的生化特性及分化机制。

DAMI细胞在巨核细胞研究中具有独特的优势，适合用于探索血小板生成和巨核细胞分化的生物过程。尽管DAMI细胞系与另一个巨核细胞白血病细胞系HEL 92.1.7在STR（短串联重复序列）检测中表现出相似性，但由于DAMI细胞被存入ATCC专利库以支持专利申请，其仍然对研究者公开使用。

DAMI细胞系特性特征

• 生长特性：DAMI细胞主要以悬浮形式生长，倍增时间为24-30小时。这种生长方式使其适合于大规模培养和实验研究。

• 形态特征：DAMI细胞呈现淋巴母细胞样的形态，主要以悬浮形式存在，少量细胞可能贴壁。

• 阳性反应：至少89%的DAMI细胞能够与血小板糖蛋白（如GP Ib和IIb/IIIa）及血型糖蛋白单克隆抗体反应。
  

• 阴性反应：DAMI细胞不与抗淋巴腺、单核细胞、粒性白细胞和巨噬细胞抗原的抗体反应。是研究巨核细胞特异性功能的重要工具。

• 基因表达：DAMI细胞的基因表达特征与巨核细胞的分化和功能密切相关，具体的基因表达谱尚需进一步研究以揭示其在巨核细胞生物学中的作用。

• 细胞标记：DAMI细胞的特定糖蛋白标记使其在流式细胞术和其他免疫学研究中具有重要应用价值。

DAMI细胞系参数表

DAMI人巨核细胞白血病细胞系培养教程

细胞复苏

• 冻存DAMI细胞：从液氮中取出冻存管，迅速放入37℃水浴中并轻轻摇动，直至完全解冻。

• 移液：将解冻的DAMI细胞悬液转移至15ml离心管中，加入9ml预热的IMDM培养基。

• 离心：以1000rpm（约200g）离心3-5分钟，去除上清液以去除冻存介质。

• 重悬细胞：使用适量预热的IMDM培养基重悬DAMI细胞，并转移至T25培养瓶中，轻轻混匀。

• 初始培养：将DAMI细胞置于37℃、5% CO₂培养箱中培养，24小时后观察细胞的附着及生长状态。

细胞培养

• 细胞生长环境：将DAMI细胞培养瓶放置于37℃、5% CO₂的培养箱中，维持悬浮状态。
  

• 换液频率：每2-3天更换培养基，确保DAMI细胞的良好生长。

• 细胞观察：每隔1-2天通过显微镜观察DAMI细胞的形态和生长情况，确认细胞处于健康状态。

细胞传代

• 传代条件：当DAMI细胞密度达到3×10⁵ - 7×10⁵ cells/mL时，进行传代。一般传代比例为1:3或1:5。

• 吸去旧培养基，用PBS轻轻冲洗DAMI细胞。
  

• 加入胰酶（1-2分钟）消化悬浮细胞至脱落。

• 立即加入培养基终止消化反应，确保细胞完整性。

• 1000rpm离心3-5分钟，去除上清液后用新鲜培养基重悬DAMI细胞。

• 传代培养：将DAMI细胞悬液按1:3至1:5的比例重新分至新培养瓶中，继续在培养箱中孵育。

DAMI细胞冻存

• 冻存液准备：使用90% FBS和10% DMSO配制冻存液。

• 细胞状态：在DAMI细胞进入对数生长期时进行冻存，以确保细胞活性和存活率。

• 将DAMI细胞悬液重悬于冻存液中，轻轻混匀。
  

• 按比例分装至冻存管中，贴好标签。

• 将冻存管放入-80℃冰箱中降温过夜，随后移至液氮中长期保存。

注意事项

• 无菌操作：所有DAMI细胞操作必须在超净工作台内完成，确保无菌条件，避免污染。

• 细胞状态监测：定期观察DAMI细胞生长状态，检查悬浮细胞的健康状况，及时处理异常情况。

• 冻存和复苏时的速度：冻存和复苏过程需要快速、稳妥，以减少DAMI细胞的损伤和死亡率。

• 细胞培养条件的稳定性：确保DAMI细胞培养环境的稳定性，包括培养箱内的温度和气体条件，避免细胞状态波动。