
IM-9细胞(人外周血B淋巴细胞)
- 来源:外周血,B淋巴细胞
- 细胞特征:悬浮生长,淋巴母细胞样
- 培养基:1640+10% FBS+10% P/S
- 其他:IM-9细胞能够产生多种免疫球蛋白(抗体)
IM-9细胞系源自一名白人女性的外周血,患者患有多发性骨髓瘤。IM9细胞系是通过爱泼斯坦-巴尔病毒(EBV)的感染,使B淋巴细胞发生转化,赋予了其持续增殖的能力,成为永生化的淋巴母细胞样细胞。
IM9细胞系来源于多发性骨髓瘤患者,主要特征是EBV转化的B淋巴细胞。这一转化过程保留了供体的二倍体基因组,细胞遗传学数据表明其基因组在ATCC的初始种子库中保持稳定性,文献中报道了一些细胞系的细胞遗传不稳定性。
IM-9细胞系广泛应用于免疫学和肿瘤学研究,尤其在B淋巴细胞相关疾病、抗体生成机制以及免疫反应的研究中。由于保留了供体的完整基因组,IM9细胞在遗传研究和疾病易感性分析中具有重要的研究价值。
IM-9细胞特性特征
IM9细胞为悬浮生长的淋巴母细胞样细胞,形态上与正常B淋巴细胞相似。
抗原表达:CD11a+;CD19+;CD20+;CD38-;CD49e+
受体表达:生长激素受体、胰岛素受体、降钙素受体
免疫球蛋白:IM-9细胞能够产生多种免疫球蛋白,尤其是IgG和IgM,这使得它们在抗体研究中具有重要价值。
IM9细胞呈EBNA阳性。
同工酶特征:ES-D,1;G6PD,B;GLO-I,1-2;Me-2,2;PGM1,1-2;PGM3,0
IM-9细胞参数表
细胞名称 | IM-9细胞(人外周血B淋巴细胞) |
细胞别称 | IM 9; IM9; GM04680 |
种属 | 人 |
组织来源 | 外周血,B淋巴细胞 |
生长特性 | 悬浮细胞 |
细胞形态 | 淋巴母细胞样 |
生物安全等级 | 2(含有疱疹病毒) |
培养基 | RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S |
气相 | 空气95%;CO2 5% |
温度 | 37℃ |
倍增时间 | ~45小时 |
推荐传代比例 | 1:2 - 1:4 |
推荐换液频率 | 每周2~3次 |
冻存液 | 55% 基础培养基 + 40% FBS + 5% DMSO |
储存温度 | 液氮 (-196℃) |
抗原表达 | CD11a+;CD19+;CD20+;CD38-;CD49e+ |
受体表达 | 生长激素受体;胰岛素受体;降钙素受体 |
同工酶特征 | ES-D: 1;G6PD: B;GLO-I: 1-2;Me-2: 2;PGM1: 1-2;PGM3: 0 |
检测项目 | 包括细菌、真菌、支原体、内毒素检测等 |
STR检测 | 确保细胞系的身份和纯度 |
用途 | 科学研究,不可用于临床诊断或治疗 |
说明 | 非药用,非食用,产品信息以出库为准 |
培养教程
IM-9人外周血B淋巴细胞培养教程
IM9细胞复苏
解冻细胞:将IM9细胞从液氮中取出后,迅速置于37℃水浴中解冻,并轻轻摇动以确保IM9细胞均匀解冻。
稀释DMSO:立即加入4 ml RPMI-1640培养基,轻轻混合以稀释IM9细胞冻存液中的DMSO。
离心:在1000 RPM下离心4分钟,去除上清液,以保留IM9细胞。
重悬细胞:用1-2 ml新鲜培养基重悬IM9细胞,并将其转移至T25培养瓶中。
培养环境:将IM9细胞培养瓶置于37℃的CO2培养箱中,气相为95%空气和5% CO2,适合IM9细胞的生长条件。
细胞观察:每周定期检查IM9细胞的形态和生长状态,及时更换培养基以避免污染。
IM9细胞传代操作
传代时机:当IM9细胞的密度达到80%-90%时需进行传代操作。
洗涤细胞:弃去旧的培养基后,用无钙、无镁的PBS缓冲液洗涤IM9细胞1-2次。
消化细胞:加入0.25%胰蛋白酶和0.53 mM EDTA混合液,在37℃下消化1-2分钟,待IM9细胞脱附。
终止消化:加入少量培养基终止消化,并轻轻吹打以使IM9细胞悬浮。
离心与重悬:在1000 RPM下离心4分钟,去除上清液,加入6-8 ml新鲜培养基重悬IM9细胞。
分瓶培养:按1:2的比例将IM9细胞悬液分至新的T25或T75培养瓶中,继续培养。
建议每周换液2-3次,以保持良好的IM9细胞生长环境。
IM9细胞冻存步骤
准备工作:当IM9细胞状态良好时进行冻存,弃去培养基后,用PBS缓冲液洗涤细胞。
消化与终止:轻微消化IM9细胞,加入含血清的培养基终止反应。
离心重悬:离心后去掉上清液,重悬IM9细胞,并加入DMSO使其终浓度为10%。
分装冻存:将IM9细胞悬液分装至冻存管中,放入-70℃预冻,然后转移至液氮中(-196℃)保存。
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Amelogenin | X |
CSF1PO | 10,11 |
D2S1338 | 24,26 |
D3S1358 | 14,18 |
D5S818 | 13 |
D7S820 | 11,12 |
D8S1179 | 12,13 |
D13S317 | 9,11 |
D16S539 | 9,13 |
D18S51 | 14,17 |
D19S433 | 13,14 |
D21S11 | 30,30.2 |
FGA | 20,23 |
Penta D | 9,11 |
Penta E | 13,15 |
TH01 | 6,9.3 |
TPOX | 11 |
vWA | 14,17 |