MEC-1细胞（人慢性B细胞白血病细胞）

MEC-1细胞系来源于人类慢性B细胞白血病（B-CLL）的细胞系，于1993年从一名61岁男性患者的外周血中建立。该患者患有B-CLL并经历了前淋巴细胞样转化（B-PLL），与MEC-2细胞系同源。MEC-1细胞属于慢性淋巴细胞白血病细胞系，能在体外持续增殖，保持其B细胞特性，是研究CLL的重要模型。

MEC-1细胞系与MEC-2细胞系共同建立，两者都从患者的外周血中获得，并表现出不同的培养特性。MEC-1细胞在液体培养中表现为附着生长，形成微小团块；而MEC-2细胞则表现为悬浮生长，形成较大的细胞团块。MEC-1的倍增时间为40小时，MEC-2为31小时。

MEC-1细胞特性特征

• 表面标志物：MEC-1细胞高表达成熟B细胞标志物，如CD19、CD20、CD21、CD22、CD80和CD86，同时表现出CD5阴性和CD23阳性。与之相比，MEC-2细胞的CD5表达在培养几个月后丢失。
  

• 轻链和重链：MEC-1细胞系表达与新鲜亲本B-CLL细胞相同的轻链（κ）和重链（μ，δ）。

• 细胞信号通路：MEC-1细胞与Bax一起过表达Bcl-2，并表达大量Bcl-xL和微量Bcl-xS，这表明其在细胞凋亡调控方面的特性。

• 基因组特征：MEC-1细胞的肿瘤起源通过IgH位点的Southern印迹分析和Ig基因DNA测序得到证实，使用VH4-Ig家族，没有发生体细胞突变，其与种系Ig基因4-59的同源性为94.8%。
  

• 复杂核型：MEC-1细胞具有复杂的核型，显示出其遗传多样性

MEC-1细胞参数表

MEC-1人慢性B细胞白血病细胞培养教程

MEC1细胞复苏步骤

• 从液氮中取出MEC1细胞冻存管，立即置于37°C的水浴中快速解冻，时间约为1-2分钟，直至MEC1细胞完全解冻。

• 将解冻后的MEC1细胞缓慢加入预先准备好的37°C IMDM培养基中，轻轻混匀以保护MEC1细胞的完整性。

• 将MEC1细胞悬液转移至T25培养瓶中，并补充适量培养基至总体积达到5-10 mL。

• 将培养瓶置于37°C、5% CO₂的培养箱中，确保MEC1细胞在稳定的环境中复苏。

MEC1细胞传代步骤

• 每2-3天检查MEC1细胞的生长状态，当MEC1细胞达到80%汇合时，进行传代。

• 使用无菌PBS轻轻洗涤MEC1细胞层1-2次，去除残留的培养基。

• 加入适量的预热胰酶-EDTA溶液，置于37°C孵育2-3分钟，直至MEC1细胞开始脱落。

• 当MEC1细胞层脱落后，加入等量预热的IMDM培养基终止胰酶作用。

• 将MEC1细胞悬液转移至15 mL离心管中，以1000 rpm离心5分钟，沉淀MEC1细胞。

• 弃去上清液后，用新鲜预温IMDM培养基重悬MEC1细胞，并按所需密度调整接种。

• 将MEC1细胞重新接种至新的培养瓶中，加入适量培养基，并置于37°C、5% CO₂培养箱中继续培养。

细胞冻存

• 收集对数生长期的MEC-1细胞，离心收集细胞沉淀。

• 弃上清，用预冷的冻存液重悬细胞，调整细胞浓度至1×10⁶-1×10⁷cells/mL。

• 将MEC-1细胞悬液分装至预冷的冻存管中，每管1-2 mL。

• 将冻存管置于-80°C的冰箱或制冰机中缓慢冻结（降温速率为1°C/min）。

• 次日，将冻存管迅速转入液氮罐中保存

注意事项

• 操作MEC1细胞时应严格遵循无菌操作，以防止污染。

• 由于培养基中已包含血清和抗生素，通常不需为MEC1细胞额外添加其他成分。

• 不宜将MEC1细胞的培养基长时间暴露在室温或高温下，以防其失效。

• 确保所有实验材料在有效期内使用，以保证MEC1细胞培养的成功率。

• MEC1细胞系仅限于科研用途，禁止用于任何临床或治疗应用。