
MT4细胞(人T细胞白血病细胞)
- 来源:T细胞白血病
- 细胞特征:悬浮细胞,淋巴细胞样
- 培养基:1640+10% FBS+1% P/S
- 其他:MT-4细胞通常表达CD3和CD7等T细胞标志物,但CD1a和CD8阴性
MT4细胞来源于一名50岁的日本患有成人T细胞白血病(ATL),伴有全身性淋巴结肿大和肝脾肿大的男性,通过将患者的外周血单核细胞与男性脐带淋巴细胞共培养建立。MT4细胞具有T细胞特征,并携带人类T细胞白血病病毒1型(HTLV-1),能够支持人类免疫缺陷病毒(HIV)的复制和生长。在实验室中处理MT-4细胞时,需遵循生物安全三级(BSL-3)标准,以确保操作的安全性。
MT4细胞特性特征
MT4细胞携带人类T细胞淋巴病毒1型(HTLV-1)
MT4细胞表达T细胞相关抗原CD3和CD7,但CD1a和CD8阴性
部分MT4细胞表达CD5,表达水平低于75%
具有淋巴母细胞形态学特征、以悬浮生长方式存在
MT4细胞能够支持人类免疫缺陷病毒(HIV)的生长
MT4细胞是一种男性细胞系,ECACC的STR分析证实存在Y染色体
MT4细胞参数表
细胞名称 | MT4细胞(人T细胞白血病细胞) |
细胞类型 | 人T细胞白血病细胞系 |
来源 | 50岁日本男性成人T细胞白血病(ATL)患者外周血白细胞 |
培养方式 | 悬浮生长 |
免疫表型 | CD3+、CD7+、CD1a-、CD8-、部分CD5+ |
携带病毒 | 人类T细胞淋巴瘤病毒1型(HTLV-1) |
培养基 | RPMI-1640培养基+10%胎牛血清、2mM L-谷氨酰胺、100 U/mL青霉素、100 μg/mL链霉素 |
传代比例 | 1:2 至 1:4 |
培养环境 | 气相:空气,95%;CO2,5% 温度:37℃ |
倍增时间 | 24-48小时 |
形态 | 淋巴母细胞样,圆形或卵圆形 |
染色体 | 近四倍体,高度不稳定 |
基因表达 | 高表达HTLV-1相关基因,如tax、rex |
生物安全等级 | BSL-3 |
应用 | 研究T细胞白血病机制、药物筛选、病毒学研究 |
培养教程
MT4人T细胞白血病细胞培养教程
MT4细胞复苏
从-80°C或液氮储存中取出冻存的MT4细胞,迅速置于37°C水浴中解冻。解冻过程应快速进行,通常在1-2分钟内完成,以避免MT4细胞损伤。
解冻后,将MT4细胞悬液转移至含有10 mL RPMI-1640培养基的离心管中,并轻轻混匀。
离心与重悬
将MT4细胞以300 x g的速度离心5分钟,以去除冻存保护剂(如DMSO)。
弃去上清液,并将MT4细胞重悬于10 mL新鲜的RPMI-1640培养基中。
MT4细胞接种
将重悬后的MT4细胞转移至一个预热的培养瓶中,并补充适量的培养基至25-50 mL。
将培养瓶放置于37°C、5% CO2的培养箱中进行培养。
MT4细胞培养与维护
每2-3天观察MT4细胞的生长状态。根据细胞密度和培养基的颜色判断是否需要更换培养基。通常,当培养基pH值降低时(培养基变黄),应更换50%的培养基以维持MT4细胞的最佳生长状态。
当MT4细胞生长至70-80%汇合时,进行传代。
MT4细胞传代
吸去旧培养基,用PBS洗涤MT4细胞,然后以300 x g离心5分钟。
弃去上清后,用适量的培养基重悬MT4细胞,并按1:2至1:4的比例将MT4细胞接种到新的培养瓶中进行继续培养。
MT4细胞冻存(如需要)
当MT4细胞生长至适当密度时,可进行冻存。将MT4细胞以300 x g离心,重悬于含10% DMSO和90% FBS的冻存液中。
将MT4细胞分装至冻存管中,先置于-80°C保存24小时,然后转移至液氮中长期保存。
注意事项
生物安全性:MT4细胞携带HTLV-1,并支持HIV的生长,因此在处理MT4细胞时,应严格遵循生物安全三级(BSL-3)标准,在生物安全柜中进行操作,以防止感染和污染。
MT4细胞监控:定期检查MT4细胞形态,观察其悬浮生长状态和细胞密度,确保MT4细胞的健康和活力。
培养环境稳定性:确保培养箱的温度保持在37°C,CO2浓度稳定在5%。避免频繁打开培养箱门,以维持稳定的培养环境。
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STR鉴定及相关
Amelogenin | X,Y |
CSF1PO | 11,12 |
D3S1358 | 17 |
D5S818 | 10,11 |
D7S820 | 8,9.3,10 (JCRB=JCRB1216) |
8,10 (JCRB=JCRB0135; PubMed=31554688; PubMed=32938764) | |
D8S1179 | 10,15 |
D13S317 | 12 |
D16S539 | 9,12 |
D18S51 | 13 |
D21S11 | 28,30.3 |
FGA | 23 |
Penta D | 10,13 |
Penta E | 5,15 |
TH01 | 7 |
TPOX | 11 |
vWA | 17,18 |