
Hut-102细胞(人T淋巴瘤细胞)
- 来源:外周血
- 细胞特征:悬浮细胞 , 淋巴母细胞样
- 培养基:RPMI-1640+10% FBS+100-200U/mL recombinant IL-2+1% P/S
- 其他:基因表达: 释放与T细胞淋巴瘤相关的单一C型逆转录病毒,即HTLV-I (Human T cell leukemia virus)
HuT 102细胞系源自一位26岁黑人男性患者(患有T细胞淋巴瘤)的外周血。hut-102细胞系广泛用于免疫学研究。
Hut-102细胞特性特征
IL-2受体表达:hut-102细胞表面呈现IL-2活性,具有IL-2受体。
E花环阳性(E+)、表面免疫球蛋白阴性(sIg-)、EBV核抗原阴性(EBNA-)、末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)反应阴性。
白细胞介素2(IL-2)受体表达:细胞对IL-2有反应,IL-2可刺激其生长。
辅助/诱导活性:具有成人T细胞的特性,表现出辅助/诱导活性。
HTLV-I(人T细胞白血病病毒)表达:可释放与T细胞淋巴瘤相关的单一C型逆转录病毒HTLV-I。
IL-2 mRNA表达:早期研究认为可产生IL-2,但最近研究未能检测到IL-2 mRNA的产生。
对IL-2的反应:在推荐培养基中加入IL-2可显著提高细胞存活率和增殖率
Hut-102细胞参数表
细胞名称 | Hut-102细胞(人T淋巴瘤细胞) |
别称 | HUT 102; Hut 102; HuT-102; Hut-102; HUT-102; HuT102; Hut102; HUT102; NCI-H102 |
来源信息 | 种属:人;年龄:26岁;性别:男性;组织:外周血 |
细胞形态 | 淋巴母细胞样 |
生长特性 | 悬浮生长 |
生物安全等级 | 2级 |
倍增时间 | 约38小时 |
细胞代数 | 10代以内 |
受体表达 | 白细胞介素2(IL-2)受体 |
基因表达 | HTLV-I(人T细胞白血病病毒) |
表面标记 | IL-2活性阳性,E花环阳性(E+) |
阴性标记 | 表面免疫球蛋白(sIg-),EBV核抗原(EBNA-),末端脱氧核苷酸转移酶(TdT-) |
培养基 | RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S |
培养条件 | 气相:95%空气 + 5% CO₂;温度:37°C |
传代与换液 | 传代比例:1:3-1:4;换液频率:2~3次/周 |
冻存条件 | 冻存液:55%基础培养基 + 40% FBS + 5% DMSO;温度:液氮 |
支原体检测 | 无 |
保藏机构 | ATCC (TIB-162), KCLB (90102), RCB (RCB1979) |
应用 | 免疫学研究、T细胞淋巴瘤研究、药物筛选、细胞生物学研究、基因表达研究 |
特殊特性 | 可释放与T细胞淋巴瘤相关的单一C型逆转录病毒(HTLV-I) |
培养教程
Hut-102人T淋巴瘤细胞培养教程
收货处理
T25瓶: 收到HuT 102细胞后,立即检查细胞状态。若细胞悬浮在培养基中,轻轻摇晃瓶子使其均匀分布。
冻存管: 收到冻存管后,立即在37°C水浴中快速解冻。解冻后,迅速将HuT 102细胞悬液转移到含有10 mL完全培养基的离心管中,1000 rpm离心5分钟,弃上清。
细胞培养
将HuT 102细胞沉淀重悬于10 mL新鲜完全培养基中,转移至T25培养瓶。
将培养瓶置于37°C,5% CO₂培养箱中培养。
每2-3天观察HuT 102细胞状态并更换培养基,保持悬浮细胞在适当密度范围内,避免过度密集。
传代
当HuT 102细胞密度达到适当水平(通常为1x10⁶ cells/mL)时,进行传代。
将细胞悬液转移至离心管中,1000 rpm离心5分钟,弃上清。
按推荐传代比例(1:3-1:4),将HuT 102细胞沉淀重悬于新鲜完全培养基中,转移至新的培养瓶。
将新传代的HuT 102细胞置于37°C,5% CO₂培养箱中继续培养。
冻存
将HuT 102细胞悬液转移至离心管中,1000 rpm离心5分钟,弃上清。
将细胞沉淀重悬于冷冻保护液(55%基础培养基 + 40% FBS + 5% DMSO)中,细胞浓度为1x10⁶ cells/mL。
将HuT 102细胞悬液分装至冻存管中,每管1 mL。
将冻存管置于程序降温盒中,-80°C过夜。
次日,将冻存管转移至液氮中长期保存。
传代比例对实验结果的影响
传代比例过高(如1:6或更高):
可能导致HuT 102细胞生长缓慢,延长实验周期。
影响HuT 102细胞的表型特征,如受体表达水平。
增加HuT 102细胞突变或表观遗传改变的风险。
传代比例过低(如1:2或更低):
可能导致HuT 102细胞过快达到高密度,影响细胞活力。
改变HuT 102细胞的代谢状态,影响实验结果的一致性。
增加细胞分泌物的积累,影响生长环境。
推荐传代比例(1:3-1:4):
有助于维持HuT 102细胞的稳定生长状态。
保持HuT 102细胞的表型特征相对稳定。
有利于实验结果的可重复性和一致性。
实验设计考虑:
根据实验需求调整传代比例。例如,若需要大量HuT 102细胞,可能需要降低传代比例。
在长期培养或连续传代实验时,保持一致传代比例尤为重要。
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STR鉴定及相关
Amelogenin | X,Y |
CSF1PO | 8,11 |
D2S1338 | 19,23 |
D3S1358 | 15,16 |
D5S818 | 8,13 |
D6S1043 | 11,18 |
D7S820 | 8,10 |
D8S1179 | 13,15 |
D12S391 | 16,19 |
D13S317 | 11,13 |
D16S539 | 12 |
D18S51 | 20 |
D19S433 | 14 |
D21S11 | 28,29 |
FGA | 24 |
Penta D | 8,10 |
Penta E | 7,8 |
TH01 | 7,8 |
TPOX | 6 |
vWA | 16,19 |