
A3细胞(人T淋巴细胞白血病细胞)
- 来源:T细胞白血病,T淋巴细胞
- 细胞特征:悬浮细胞,淋巴母细胞样
- 培养基:1640+10% FBS+1% P/S
- 其他:A3细胞为悬浮细胞,请注意离心收集细胞悬液;请勿直接倒掉细胞培养液。
A3细胞人T淋巴细胞白血病细胞来源于Jurkat细胞系,通过用Fas抗体处理Jurkat细胞,并采用限制性稀释法分离,获得了对Fas药物诱导的细胞凋亡具有低自发抗性的细胞系。
其中两个ICR-191处理过的克隆中的两个已被保藏在ATCC。它们是I 9.2(ATCC CRL-2571),一个半胱氨酸蛋白酶胱天蛋白酶8/FLICE突变的克隆,和I 2.1(ATCC CRL-2572), 一种衔接子FADD突变的克隆。
A3细胞特性
A3细胞亚克隆自Jurkat细胞系。
用Fas抗体处理Jurkat细胞,并通过限制性稀释进行分离,获得对Fas药物诱导的细胞凋亡具有低自发抗性的细胞系。
野生型A3亚克隆对Fas介导的细胞凋亡非常敏感。
使野生型A3细胞对新霉素产生耐药性,并用三个周期的移码诱变剂ICR-191处理,分离出对Fas抗体杀伤具有耐药性的隐性突变的克隆。
在Fas抗体存在下,将ICR-191处理的克隆在96孔板中连续稀释3-5周。
ICR-191处理过的克隆中的两个已被保藏在ATCC。它们是I 9.2(ATCC CRL-2571)和I 2.1(ATCC CRL-2572)。
A3细胞对Fas介导的凋亡产生自发抗性的比例较低,因此对Fas-介导的凋亡十分敏感。
A3人T淋巴细胞参数表
细胞名称 | A3细胞 (人T淋巴细胞白血病细胞) |
别称 | Jurkat clone A3 |
种属 | 人 |
性别/年龄 | 男 |
组织来源 | T细胞白血病,T淋巴细胞 |
疾病 | 急性T细胞白血病 |
细胞类型 | 肿瘤细胞 |
肿瘤类型 | 白血病细胞 |
生长特性 | 悬浮细胞 |
生物安全等级 | BSL-1 |
冻存条件 | 55% 基础培养基 + 40% FBS + 5% DMSO;液氮储存 |
生长培养基 | RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S |
培养条件 | 37℃, 95% 空气, 5% CO2 |
推荐换液频率 | 2-3次/周 |
污染检测 | 支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性 |
细胞用途 | 仅供科研使用 |
背景描述 | A3细胞亚克隆自Jurkat细胞系,是通过用Fas抗体处理Jurkat细胞,用有限稀释法获得一个细胞系。 |
保藏机构 | ATCC |
培养教程
A3人T淋巴细胞白血病细胞培养
A3细胞复苏
将含有1mL A3细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻。
将解冻后的A3细胞悬液加入含有5mL培养基的离心管中混合均匀。
在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液。
用4-6mL培养基重悬A3细胞,并将细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或加入6cm皿中培养)。
第二天换液并检查A3细胞密度。
A3细胞传代
当A3细胞密度达80%-90%时,可进行传代培养。
方法一:
收集A3细胞,1000RPM条件下离心8-10分钟,弃去上清液。
用1-2mL培养液重悬A3细胞,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含有8mL培养基的新皿或瓶中。
方法二:
弃去半数培养基后,将剩余A3细胞悬起。
按1:2到1:3的比例将A3细胞悬液分到新的含有8mL培养基的新皿或瓶中。
A3细胞冻存
A3细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。
贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,待A3细胞变圆脱落后,进行离心收集。
在1000RPM条件下离心8-10分钟,去除上清。
按冻存数量加入血清及DMSO,冻存比例为90%FBS+10%DMSO。
将A3细胞分配到冻存管中,标注名称、代数、日期等信息。
置于程序降温盒中,在-80℃冰箱中过夜后转入液氮容器中储存,并记录好位置。