
C8166-CD4细胞(人T淋巴细胞白血病细胞)
- 来源:外周血
- 细胞特征:悬浮细胞,聚团,淋巴母细胞样
- 培养基:RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
- 其他:C8166-CD4细胞显著表达CD4分子,这使其在功能上更接近于成熟的T辅助细胞。
C8166-CD4细胞系是通过将新生儿脐带血中的T细胞与患有T细胞白血病患者的HTLV-1转化细胞融合获得的。C8166-CD4细胞系融合了原代T细胞的特性和白血病细胞的特征,具有持续增殖能力并呈现典型的淋巴母细胞样形态学特征。其基因组中含有缺陷的HTLV-1基因组,这与T细胞白血病的发展密切相关。
C8166-CD4细胞在HIV感染下可能会形成合胞体。C8166-CD4细胞系广泛应用于免疫学和肿瘤学的研究,特别是在T淋巴细胞增殖、凋亡机制以及药物筛选等领域,因其来源于白血病细胞,在白血病的临床相关研究中具有重要价值。
C8166-CD4细胞特性特征
基因组特征:C8166细胞含有HTLV-1病毒的基因组,该病毒与T细胞白血病的发生密切相关。C8166-CD4细胞系在HIV感染下能够形成合胞体,进一步影响其生物学行为。
CD4表达:C8166-CD4细胞显著表达CD4分子,这使其在功能上更接近于成熟的T辅助细胞。CD4作为T细胞表面标志物,在免疫反应中起着重要作用。
C8166-CD4细胞也可能表达其他相关的免疫表面标志物,如CD25和CD69,具体取决于培养条件和刺激状态。
C8166-CD4细胞应用于研究T细胞白血病的机制、药物筛选、信号通路分析以及HIV感染与合胞体形成等方面。
C8166-CD4细胞来源于人类白血病患者,因此在基础研究和临床前研究中具有重要价值。
C8166-CD4细胞参数表
细胞名称 | C8166-CD4细胞(人T淋巴细胞白血病细胞) |
细胞名称 | C8166-CD4 |
细胞类型 | 人T淋巴细胞白血病细胞 |
细胞来源 | 新生儿脐带血细胞与成人T细胞白血病淋巴瘤(HTLV-1)细胞融合获得 |
细胞形态 | 淋巴母细胞样 |
生长特性 | 悬浮生长 |
培养基 | RPMI-1640 + 2mM Glutamine + 10% Foetal Bovine Serum (FBS) |
培养条件 | 气相:空气,95%;CO2,5% 温度:37℃ |
传代方法 | 1:2至1:6,每周2次 |
传代密度 | 2~3x10^5 cells/ml |
冻存介质 | 90% 完全培养基 + 10% DMSO;液氮保存 |
支原体检测 | 阴性 |
细胞活力 | ≥95% |
代数 | ≤5代 |
规格 | 1×10^6 cells/T25培养瓶 |
用途 | 仅用于科研,不得用于其他目的 |
培养教程
C8166-CD4人T淋巴细胞白血病细胞培养教程
收到C8166-CD4细胞后的处理
收到C8166-CD4细胞后,检查包装是否完好,是否有漏液。如有任何异常,需立即与供应商联系。
使用显微镜观察C8166-CD4细胞的状态,确认细胞健康并无污染。将培养瓶置于37°C培养箱中静置2-3小时,使C8166-CD4细胞适应环境。
弃去原始培养基,加入6mL RPMI-1640完全培养基(含10%胎牛血清FBS和1%青霉素-链霉素),以确保C8166-CD4细胞能够在最佳条件下生长。
定期检查C8166-CD4细胞的生长状态。当细胞密度达到80%-90%时,需进行传代操作。
收到C8166-CD4细胞后的第二天,需再度检查是否有污染迹象。如发现污染,立即处理。
C8166-CD4细胞复苏步骤
将冻存的C8166-CD4细胞在37°C水浴中迅速解冻,轻轻摇晃冻存管,以确保细胞均匀混合。解冻后需立即进行后续操作,以减少细胞损失。
将解冻后的C8166-CD4细胞悬液转移至含4mL完全培养基的离心管中,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液。
用1-2mL完全培养基重悬C8166-CD4细胞,轻轻吹打,使细胞均匀分布。然后将细胞悬液转移至新的培养瓶中培养过夜。
注意:为了防止重新排列和/或删除的粘粒扩增,我们建议在30°C的LB+amp平板上划线培养,并挑选小菌落进行液体培养,以确保后续实验的准确性。
C8166-CD4细胞传代培养
当C8166-CD4细胞密度达到80%-90%时,应及时进行传代培养。合适的传代比例(1:2或1:3)有助于保持C8166-CD4细胞的生长活力。
弃去培养瓶中的培养基,用无钙、无镁的PBS润洗C8166-CD4细胞1-2次,去除残留的血清和代谢废物。
加入1mL胰酶-EDTA消化液(0.25%胰蛋白酶+0.53mM EDTA),置于37°C培养箱中消化1-2分钟。当C8166-CD4细胞变圆并开始脱落时,立即加入完全培养基中和消化作用。
收集C8166-CD4细胞至离心管中,在1000RPM下离心4分钟,去除上清后用1-2mL完全培养基重悬细胞。
将C8166-CD4细胞悬液按1:2或1:3的比例分装至新的培养瓶中,加入适量培养基(8-10mL),放回培养箱中继续培养。
C8166-CD4细胞冻存
当C8166-CD4细胞生长状况良好时,可进行冻存操作。首先,弃去培养基,用PBS洗涤细胞,并使用胰酶处理使细胞脱落。
在1000RPM下离心4分钟,弃去上清。加入适量的培养基重悬C8166-CD4细胞,然后加入DMSO,使终浓度为10%。
将重悬的C8166-CD4细胞按1×10^6/mL的密度分装至冻存管,每管冻存1mL细胞悬液,并做好标识。
将C8166-CD4细胞冻存管放入程序降温盒,在-80°C冰箱中保存24小时后,转移至液氮罐中长期保存。
注意事项
在C8166-CD4细胞操作过程中,需严格遵循无菌操作,避免污染。
定期观察并记录C8166-CD4细胞的生长状态,以确保实验数据的准确性。
在传代培养时,需避免过度消化,以免损伤C8166-CD4细胞。
C8166-CD4细胞冻存时,DMSO浓度应严格控制,以确保细胞的存活率。
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Amelogenin | X,Y |
CSF1PO | 10 |
D13S317 | 10,11 |
D16S539 | 12,13 |
D18S51 | 14,17 |
D21S11 | 27,30 |
D3S1358 | 15,16 |
D5S818 | 12 |
D7S820 | 9,10 |
D8S1179 | 11,14 |
FGA | 21,22 |
PentaD | 11,15 |
PentaE | 7,11 |
TH01 | 6,9.3 |
TPOX | 11 |
vWA | 15,16 |