
J.gamma1 人急性T细胞白血病细胞
- 来源:T细胞,急性T细胞白血病
- 细胞特征:悬浮生长, 淋巴母细胞
- 培养基:生长培养基:RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
- 其他:J.gamm1细胞系是Jurkat的E6-1克隆的磷脂酶C-gamma1(PLC-gamm1)缺陷突变体
J.gamma1人急性T细胞白血病细胞来源于患有急性T细胞白血病的男性患者的T细胞组织。J.gamma1细胞系是通过使用移码诱变剂ICR-191对野生型Jurkat细胞进行诱变,并分离出对渗透酸盐反应不能增加钙的克隆。在P98克隆上重复选择程序建立的J.gamma1细胞系。
J.gamma1人急性T细胞白血病细胞特性
J.gamm1细胞系是Jurkat的E6-1克隆的磷脂酶C-gamma1(PLC-gamm1)缺陷突变体。
J.gamma1.WT衍生物有与Jurkat细胞系相当的水平稳定表达PLC-gamma1。
γ1亚系不含可检测的PLC-gamm1蛋白。γ1细胞中PLC-gamm1表达的缺乏导致T细胞受体(TCR)钙动员和活化T细胞核因子(NFAT)活化的严重缺陷。
通过用野生型PLC-gamm1表达载体转染P98细胞来逆转这些转录缺陷。
J.gamma1人急性T细胞白血病细胞参数表
细胞名称 | J.gamma1人急性T细胞白血病细胞 |
别称 | Jgamma1细胞;Jurkat gamma1细胞 |
来源 | 急性T细胞白血病患者的T细胞组织 |
细胞系 | Jurkat E6-1克隆的磷脂酶C-gamma1(PLC-gamma1)缺陷突变体 |
细胞描述 | - 缺乏可检测的PLC-gamma1蛋白,导致TCR钙动员和NFAT活化严重缺陷 |
- 可通过转染野生型PLC-gamma1表达载体逆转这些转录缺陷 | |
细胞形态 | 淋巴细胞样 |
生长方式 | 悬浮生长 |
倍增时间 | 每周2至3次 |
细胞代数 | 10代以内 |
培养基 | RPMI-1640+10%胎牛血清(FBS)+1%双抗生素(P/S) |
培养条件 | 温度: 37℃ |
气相: 95%空气 + 5%二氧化碳 | |
湿度: 70%-80% | |
冻存条件 | 冻存液: 90% FBS + 10% DMSO 或使用非程序冻存液 |
储存温度: 液氮气相 | |
支原体检测 | 阴性 |
用途 | 仅限于科学研究,不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用 |
应用 | 3D细胞培养和免疫系统紊乱研究 |
运输方式 | 常温运输(T25培养瓶)或干冰运输(冻存管) |
安全性 | 所有肿瘤细胞和病毒转染的细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作 ,操作者需注意自身防护 |
保藏机构 | ATCC; CRL-2678 |
培养教程
J.gamma1 人急性T细胞白血病细胞
细胞传代
当J.gamma1细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时,首先弃去25cm²培养瓶中的培养液,使用PBS清洗细胞一次。
向培养瓶中加入约1ml 0.25%胰蛋白酶消化液,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入5ml完全培养液终止消化。轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,以1000rpm离心5分钟。
弃去上清,沉淀的J.gamma1细胞用1-2ml完全培养基重悬,然后按1:2的比例进行分瓶传代。最后将传代好的细胞放入37℃、5%CO₂的细胞培养箱中培养。
细胞冻存
当J.gamma1细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时,弃去25cm²培养瓶中的培养液,使用PBS清洗细胞一次。
向培养瓶中加入约1ml 0.25%胰蛋白酶消化液,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化,轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,以1000rpm离心5分钟。
使用9:1的FBS比例混合冻存液,重悬J.gamma1细胞,并置于冻存管中。
首先将细胞冻存管放置于-20℃冷冻1.5小时,然后移入-80℃过夜。24小时后转入液氮中进行长期保存。可以使用程序降温盒直接放入-80℃。
细胞复苏
从液氮中取出J.gamma1细胞冻存管(注意佩戴防爆管面具),快速置于37℃水浴中解冻,直至冻存管中无结晶。用75%的酒精擦拭冻存管外壁。
将冻存管中的J.gamma1细胞移至含6ml完全培养基的15ml离心管中,以1000rpm离心5分钟。
弃去上清,沉淀用6ml完全培养基重悬J.gamma1细胞,接种到25cm²培养瓶中。将培养瓶放入37℃、5%CO₂的细胞培养箱中培养。
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Amelogenin | X |
CSF1PO | 11, 12 |
D13S317 | 8, 12 |
D16S539 | 11 |
D5S818 | 9 |
D7S820 | 8, 12 |
THO1 | 6, 9.3 |
TPOX | 8, 10 |
vWA | 18, 19 |