
B95-8细胞(绒猴EB病毒转化的白细胞)
- 来源:外周血淋巴细胞
- 细胞特征:悬浮细胞,淋巴母细胞样
- 培养基:RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
- 其他:B95-8细胞株能够释放高滴度的EB病毒
B95-8细胞株是一种由绒猴(Macaca mulatta)的外周血淋巴细胞通过Epstein-Barr病毒(EB病毒)转化形成的细胞系,将绒猴的EB病毒转化的白细胞暴露于从人类白细胞中提取的EB病毒,进而通过病毒感染实现细胞的持续增殖。B95-8细胞系具备显著的连续传代能力,倍增时间约为40小时,同时能够释放高滴度的EB病毒,被广泛应用于病毒学和免疫学研究中,尤其适合用于EB病毒的转染研究和人类淋巴细胞系的建立。
B95-8细胞特性特征
高滴度EB病毒释放:B95-8细胞是一个连续株,能够释放高滴度的EB病毒,成为研究EB病毒及其相关疾病的重要工具。
EB病毒基因组:B95-8细胞中携带有EB病毒的基因组,能够在感染后持续表达EB病毒的相关蛋白。
表面标志物:B95-8细胞通常表达B细胞特异性标志物,如CD19、CD20等,这些标志物在免疫学研究中具有重要意义。
蛋白质表达:B95-8细胞能够表达多种与EB病毒相关的蛋白质,包括潜伏膜蛋白(LMP)和早期抗原(EA),这些蛋白在研究EB病毒的潜伏感染及其致病机制中至关重要。
基因表达谱:研究表明,B95-8细胞的基因表达谱与正常B细胞有所不同,这为理解EB病毒如何影响宿主细胞提供了线索
B95-8细胞参数表
细胞名称 | B95-8细胞(绒猴EB病毒转化的白细胞) |
细胞别称 | B95.8; B 95.8; B 95-8; B-95-8; B958; GM07404; GM07404D |
来源 | 绒猴外周血淋巴细胞通过EB病毒转化 |
细胞类型 | 悬浮细胞 |
形态特征 | 外周血淋巴细胞样 |
原始来源 | Cotton-top Tamarin Monkey |
细胞特性 | Lymphoblasts(淋巴母细胞) |
培养基 | RPMI-1640+10% FBS+1% P/S |
胰蛋白酶消化浓度 | 0.25% |
倍增时间 | 约40小时 |
接种密度 | 1:2至1:4 |
培养密度 | 3-9 x 10^5 cells/ml |
换液周期 | 每2-3天更换一次培养基 |
培养环境 | 温度:37℃,CO₂浓度:5% |
EB病毒基因组 | 存在EB病毒相关基因 |
表面标志物 | CD19、CD20等B细胞特异性标志物 |
蛋白质表达 | 表达潜伏膜蛋白(LMP)和早期抗原(EA) |
遗传稳定性 | 良好的遗传稳定性,适合长期实验 |
基因表达谱 | 与正常B细胞有所不同 |
其它特性 | 高滴度EB病毒释放;连续传代能力 |
应用领域 | 病毒学、免疫学、疫苗开发 |
冻存条件 | -80℃或液氮中保存 |
培养教程
B95-8绒猴EB病毒转化的白细胞培养教程
细胞复苏
将培养B95-8细胞的培养基预热至37℃。
在生物安全柜内进行操作,确保无菌环境,以避免B95-8细胞受到污染。
从液氮中取出B95-8细胞冻存管,立即置于37℃水浴中,轻轻摇晃,约1-2分钟后完全解冻。
将解冻的B95-8细胞转移至无菌离心管中,加入5-10毫升预热培养基,混匀。
200-300g条件下离心5分钟,弃去上清液以去除冷冻保护剂,确保B95-8细胞复苏的完整性。
用新鲜培养基将B95-8细胞重悬,并根据培养需求选择合适的培养容器,例如在6cm培养皿中加入10ml培养基。
将B95-8细胞培养皿置于37℃、5% CO₂的培养箱中进行培养,以确保细胞正常生长。
细胞传代
每2-3天观察B95-8细胞的形态和密度,注意是否有污染迹象,保持B95-8细胞的健康状态。
当B95-8细胞密度达到70%-80%时进行传代。
弃去旧培养基,用无钙镁的PBS(磷酸盐缓冲液)洗涤B95-8细胞。
加入0.25%胰蛋白酶溶液,在37℃下消化2-5分钟,观察B95-8细胞是否开始脱落。
加入等体积的培养基终止胰酶消化,轻轻吹打使B95-8细胞重悬。
按适当比例(如1:2或1:4)将B95-8细胞重悬液接种至新的培养皿中,加入新鲜培养基。
将B95-8细胞继续在37℃、5% CO₂的培养箱中培养,确保细胞增殖的稳定性。
注意事项
培养B95-8细胞时,应严格无菌操作,避免细菌和真菌污染。
通过显微镜观察B95-8细胞的生长状态,定期检查以确认细胞健康,如发现培养基颜色异常或沉淀等污染迹象,应立即处理。
控制B95-8细胞的传代频率,确保每次传代的细胞密度适中,避免过度或不足的传代。
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