
人鼻咽癌HNE1细胞株
- 来源:鼻
- 细胞特征:贴壁细胞,上皮细胞样
- 培养基:1640+10% FBS+10% P/S
- 其他:HNE1细胞中某些特定基因(如AXL)的表达水平较高
HNE1细胞株源自人类鼻咽癌患者的肿瘤组织,属于低分化鳞状细胞癌。电镜观察显示细胞内存在桥粒结构。传代次数超过100次,且EBV(Epstein-Barr病毒)检测结果为阴性。
HNE1细胞系是在中国建立的,主要用于研究鼻咽癌的生物学特征及其对治疗的反应。作为一种恶性上皮细胞系,它具有典型的上皮细胞特性,贴壁生长能力强,广泛应用于鼻咽癌的基础研究和药物筛选。HNE1细胞系在一定程度上对放疗和化疗敏感,因此经常用于评估不同治疗方法对鼻咽癌细胞的增殖抑制和生存率影响。
人鼻咽癌HNE1细胞株特性特征
EB病毒状态:HNE1细胞系在EB病毒检测中呈阴性,这在鼻咽癌研究中是一个重要的分子特征,因为许多鼻咽癌细胞系都与EB病毒感染相关。
STR图谱:HNE1细胞系的STR(短串联重复序列)图谱与HeLa细胞相似,但与HNE-2几乎相同,这为其身份鉴定提供了依据。
AXL表达:研究表明,AXL在HNE1细胞系中高表达,可能与肿瘤的侵袭性和转移性相关。AXL是一种受体酪氨酸激酶,其表达受到转录因子ETS1的调控,ETS1通过结合AXL启动子区域影响其转录水平。
基因表达:HNE1细胞系中某些基因(如AXL)的高表达与鼻咽癌的恶性进展密切相关,这些基因可能参与调控细胞增殖、迁移和侵袭等生物学过程
人鼻咽癌HNE1细胞系参数表
细胞名称 | HNE1人鼻咽癌细胞株 |
别称 | HNE-1, HNE1 |
种属来源 | 人 |
组织来源 | 鼻咽组织 |
疾病特征 | 低分化鳞状细胞癌 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
传代次数 | 超过100次 |
传代方法 | 1:2至1:6,每周2-3次 |
培养基 | 1640+10% FBS+10% P/S |
生长条件 | 温度:37℃;气相:空气95%,二氧化碳5% |
冻存条件 | 90% 完全培养基 + 10% DMSO,液氮储存 |
支原体检测 | 阴性 |
EB病毒状态 | 检测呈阴性 |
电镜观察特征 | 存在桥粒结构 |
冻存细胞密度 | 不低于1x10^6 cells/mL |
培养教程
人鼻咽癌HNE1细胞系培养教程
HNE1细胞复苏步骤
快速解冻:将冻存的HNE1细胞从液氮中取出,迅速放入37℃水浴中,轻轻摇晃使细胞均匀解冻,直至完全液化(约1-2分钟)。
移液稀释:将解冻后的HNE1细胞悬液迅速移至含有4 mL预热培养基的无菌离心管中,轻轻混匀。
离心:以1000 rpm的速度离心3分钟,弃去上清液。加入1-2 mL新鲜培养基重新悬浮HNE1细胞,轻轻吹匀。
转移培养:将HNE1细胞悬液转移至培养瓶中,加入适量培养基,使细胞在37℃、5% CO₂的培养箱中孵育过夜。
换液观察:约24小时后,更换培养基,检查HNE1细胞的贴壁情况与增殖状态,若细胞密度合适,后续可每2-3天更换一次培养基。
HNE1细胞传代操作
传代时机: 当HNE1细胞铺满培养瓶80%-90%时,即可进行传代操作。
去除旧培养基:弃去培养瓶中的旧培养基,用无钙、无镁的PBS缓冲液洗涤HNE1细胞1-2次,去除残留培养基。
细胞消化:加入0.25%胰蛋白酶-0.02%EDTA消化液,T25培养瓶使用1-2 mL,T75培养瓶使用2-3 mL,确保所有HNE1细胞浸润在消化液中。
观察消化过程:将培养瓶放入37℃的培养箱中消化约3-5分钟,观察HNE1细胞是否变圆脱落。如大部分细胞脱落,立即加入含有胎牛血清的培养基终止消化。
收集细胞:将消化后的HNE1细胞悬液移入无菌离心管中,以1000 rpm离心5分钟,弃去上清液,重新加入1-2 mL培养基轻轻吹匀。
细胞分配:按照1:2或1:3比例将HNE1细胞悬液分配至新的培养瓶中,补充6-8 mL培养基后继续放入培养箱中培养。
HNE1细胞冻存步骤
HNE1细胞冻存时机:当HNE1细胞生长至70%-80%融合时,可进行细胞冻存。
收集细胞:按照上述传代操作收集HNE1细胞,离心后弃去上清液。
制备冻存液:用无血清冻存液(含10%DMSO)制备HNE1细胞悬液,使细胞浓度达到5×10^6至1×10^7/mL。
装管与标记:每支冻存管加入1 mL HNE1细胞悬液,做好冻存管的标识。
冻存过程:将冻存管置于-80℃冷冻24小时后,转移至液氮罐中长期保存。
相关资料
STR鉴定及相关
Amelogenin | X |
CSF1PO | 10,11 |
D2S1338 | 17,23 |
D3S1358 | 15,18 |
D5S818 | 11,12 |
D7S820 | 10,12 |
D8S1179 | 12,16 (PubMed=18196576) |
12,17 (PubMed=25877200) | |
D13S317 | 10,12,13.3 |
D16S539 | 9,10 (PubMed=18196576) |
9,10,11 (PubMed=25877200) | |
D18S51 | 13,16 |
D19S433 | 13 |
D21S11 | 27,30 |
FGA | 18,21 |
Penta D | 9,12 |
Penta E | 17,20 |
TH01 | 6,7,9 (PubMed=18196576) |
6,9 (PubMed=25877200) | |
TPOX | 8,12 |
vWA | 14,16 |