
C666-1细胞(人鼻咽癌细胞系)
- 来源:鼻咽癌
- 细胞特征:贴壁细胞 , 上皮细胞样
- 培养基:生长培养基:1640+10% FBS+1% P/S
- 其他:持续表达EBV编码的RNA;细胞角蛋白阳性;表达EBNA1蛋白、LMP1和LMP2转录物;
C666-1细胞是C666细胞系的一个亚克隆,起源于中国南方的鼻咽癌异种移植物。C666-1细胞以粘附生长为特征,表现出缺乏接触抑制的特性,并持续表达EBV编码的RNA和细胞角蛋白。
C666-1细胞表达EBV核抗原1(EBNA1)、潜伏膜蛋白1(LMP1)和潜伏膜蛋白2(LMP2)转录物,类似于EBV潜伏期II模式。该病毒EBV基因型为EBV-1,具有潜伏膜蛋白1基因羧基末端30bp的缺失。
C666-1细胞是亚二倍体,其染色体模式数为45。在鼻咽癌细胞系中,C666-1细胞独特地携带EBV,C666-1细胞在无胸腺裸小鼠中的致瘤性。
C666-1细胞特性
C666-1细胞是C666细胞系的亚克隆,源自中国南方的NPC异种移植。
C666-1细胞粘附生长,缺乏接触抑制。
C666-1细胞持续表达EBV编码的RNA和细胞角蛋白阳性。
C666-1细胞表达EBNA1蛋白、LMP1和LMP2转录物,类似于EBV潜伏期II模式。
C666-1细胞的EBV基因型为EBV-1,其潜伏膜蛋白1基因存在30bp的羧基末端缺失。
C666-1细胞是鼻咽癌细胞系中唯一携带EBV的。
C666-1细胞在无胸腺裸小鼠中具有致瘤性。
C666-1细胞参数表
细胞名称 | C6661细胞 (人鼻咽癌细胞株) |
别称 | c666-1; C6661 |
组织来源 | 人鼻咽癌 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞代数 | ≤ 10代 |
细胞规格 | 1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管 |
STR鉴定 | 正确 |
支原体检测 | 阴性 |
培养基 | RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S |
培养条件 | 气相:95%空气 + 5%CO2;温度:37℃ |
冻存条件 | 60%基础培养基 + 30% FBS + 10% DMSO,液氮储存 |
生物安全等级 | 2 |
致瘤性 | 是,在无胸腺裸小鼠中 |
主要特征 | 源自中国南方的NPC异种移植;粘附生长;缺乏接触抑制;持续表达EBV编码的RNA ;细胞角蛋白阳性;表达EBNA1蛋白、LMP1和LMP2转录物;类似于EBV潜伏期II模式; 病毒基因型为EBV-1;染色体模式数为45;亚二倍体状态。 |
内毒素含量 | <10 EU/mL |
PH | 7.2-7.4 |
储存条件 | 2℃-8℃,避光储存 |
运输条件 | 冰袋/快递运输 |
品质检测 | 细菌、真菌、支原体检测阴性 |
培养教程
C666-1人鼻咽癌细胞系培养教程
细胞复苏
从-80℃冰箱中取出C6661细胞冻存管,快速置于37℃水浴中解冻,直至无结晶。
将解冻后的C6661细胞悬液转移至含5ml完全培养基的15ml离心管中。
在1000rpm条件下离心5分钟,弃去上清液,重悬C6661细胞用5ml完全培养基。
细胞传代
当C6661细胞密度达到80%-90%时,进行传代培养。
弃去培养瓶中上清液,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
加入1-2ml 0.25%胰蛋白酶-0.53mM EDTA消化液,置于37℃培养箱中消化1-2分钟。
观察C6661细胞消化情况,大部分细胞变圆并脱落后,加入足量完全培养基终止消化。
轻轻吹打C6661细胞层,吸出悬液,离心5分钟后弃去上清液,补充1-2ml完全培养基后吹匀。
将C6661细胞悬液按1:2到1:4的比例分到新的含6ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞冻存
C6661细胞生长至覆盖培养瓶80%面积时,弃去T25培养瓶中的培养液,用PBS清洗C6661细胞一次。
加入1ml 0.25%胰蛋白酶消化液至T25培养瓶中,观察C6661细胞回缩变圆后加入5ml完全培养液终止消化。
吹打C6661细胞使其脱落,将悬液转移至15ml离心管中,1000rpm离心5分钟。
弃上清,加入1ml雅吉生物无血清冻存液,混匀后分装入冻存管中。
将C6661细胞冻存管放入-80℃冰箱保存。
相关资料
STR鉴定及相关
Amelogenin | X,Y |
CSF1PO | 11,15 (PubMed=26116706) |
11,15,16 (PubMed=18196576; PubMed=30405107) | |
D2S1338 | 16,23 |
D3S1358 | 16,17 (PubMed=18196576; PubMed=30405107) |
17 (PubMed=26116706) | |
D5S818 | 11,12 |
D7S820 | 10,11,12 (PubMed=26116706) |
11,12 (PubMed=18196576; PubMed=30405107) | |
D8S1179 | 11,13,14,15 (PubMed=18196576; PubMed=30405107) |
13,15 (PubMed=26116706) | |
D13S317 | 8,11 |
D16S539 | 10 |
D18S51 | 16 (PubMed=18196576; PubMed=30405107) |
16,17 (PubMed=26116706) | |
D19S433 | 13,15.2 |
D21S11 | 28,29,30.2,31.2 (PubMed=18196576; PubMed=30405107) |
29,31.2 (PubMed=26116706) | |
FGA | 21,24 (PubMed=26116706) |
23,24 (PubMed=18196576; PubMed=30405107) | |
Penta D | 9,10 |
Penta E | 11,15 |
TH01 | 6,8 |
TPOX | 8,11 |
vWA | 17,18 |

参考文献
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