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货号：STM-CL-5434 规格：1×10⁶cells/T25培养瓶或1mL冻存管
NPC/HK1细胞（人鼻咽癌细胞）
- 来源：鼻咽癌
- 细胞特征：贴壁细胞， 上皮细胞样
- 培养基：1640+10% FBS+1% P/S
- 其他：在NPCHK1细胞的原代培养或几次传代培养中，未发现病毒颗粒或Epstein-Barr病毒核抗原（EBNA），EB病毒阴性
NPC/HK-1人鼻咽癌细胞系是从一位58岁中国男性鼻咽鳞状细胞癌患者的复发性肿瘤组织中分离。患者在接受放射治疗后，经历了长达17年半的病情缓解期，随后出现复发。这一细胞系由中南大学基础医学院的研究团队成功建立，并经过多次传代，目前已传代72次。
NPCHK-1细胞系的形态呈上皮样，具有典型的贴壁生长特征。核型分析显示NPCHK1细胞系为非整倍体，染色体数为74，并存在数量和结构上的畸变。
NPCHK1细胞特性特征
病毒状态: NPC/HK-1细胞系被认为是EB病毒阴性，未检测到Epstein-Barr病毒核抗原（EBNA）。
细胞标记物: NPCHK1细胞系在多项研究中显示出特定的肿瘤标记物表达，尤其是在与鼻咽癌相关的信号通路中，表现出较高的AXL蛋白表达，这与细胞的增殖、迁移和侵袭能力密切相关。
肿瘤形成: 在移植到裸鼠（BALB/c nu/nu）背部后，NPC/HK-1能够形成与患者原始肿瘤相似的肿瘤组织，组织学检查显示为分化良好的鳞状细胞癌。
NPCHK1细胞参数表
| 细胞名称 | NPC/HK1细胞（人鼻咽癌细胞） |
| 细胞别称 | NPC/HK1; HK1; HK-1 |
| 来源 | 鼻咽癌组织；男性，58岁 |
| 细胞形态 | 上皮细胞样 |
| 生长特性 | 贴壁生长 |
| 倍增时间 | 约28-40小时 |
| 培养基 | RPMI 1640 + 10% FBS + 1% P/S |
| 培养条件 | 温度：37℃；气相：95%空气，5%二氧化碳 |
| 换液周期 | 每2-3天一次 |
| 培养基体积 | T25瓶：10-12 ml；10 cm皿：12-15 ml |
| 传代比例 | 1:2 - 1:4（视细胞生长速度及密度而定） |
| 冻存液配方 | 60%基础培养基 + 30% FBS + 10% DMSO |
| 冻存规格 | 200-300万/ml，1 ml每管 |
| 病毒状态 | EB病毒阴性 |
| 无菌检测 | 细菌、酵母、支原体检测均为阴性 |
| 病原体检查 | HIV、乙型肝炎、丙型肝炎均为阴性 |
| 生物安全等级 | 1 |
| 安全性 | 所有肿瘤和病毒转染的细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作 |
| 细胞供应限制 | 仅供科学研究使用 |
| 细胞规格 | 1 x 10^6 cells/vial |
| 细胞状态确认 | 收到后需在显微镜下确认细胞状态，观察细胞贴壁情况 |
培养教程
NPC/HK1人鼻咽癌细胞培养教程
传代方法
轻轻吸除T25培养瓶中的旧培养基，以防NPCHK1细胞长时间暴露在废弃培养基中。
加入3-4 ml的温PBS，轻轻冲洗NPCHK1细胞10-20秒，随后吸除PBS。
加入约1 ml胰酶，轻轻晃动培养瓶，使胰酶均匀覆盖NPCHK1细胞层。
将培养瓶放置于37°C培养箱中，进行NPCHK1细胞的消化处理。
当NPCHK1细胞间隙变大但尚未完全脱落时，加入2-3 ml完全培养基以终止消化。
轻柔吹打混匀NPCHK1细胞，900 rpm离心3-5分钟，弃去上清。
用新鲜的完全培养基重悬NPCHK1细胞，并均匀接种到新培养瓶中。
补充新鲜的培养基，将NPCHK1细胞放回培养箱中静置培养。
注意事项
控制胰酶消化时间，避免过度消化以防止NPCHK1细胞损伤。
吹打NPCHK1细胞时要轻柔，避免产生气泡，这可能会影响NPCHK1细胞的健康。
每2-3天更换一次培养基，确保NPCHK1细胞获得足够的营养。
冻存方法
冻存液配方: 60%基础培养基 + 30% FBS + 10% DMSO
冻存规格: 每管冻存NPCHK1细胞数为200-300万细胞/ml，每管1 ml
按上述传代方法消化NPCHK1细胞，并通过离心获得NPCHK1细胞沉淀。
将NPCHK1细胞沉淀轻轻重悬于预配好的冻存液中。
将NPCHK1细胞悬液迅速转移至标记好的冻存管中。
将冻存管置于程序冻存盒中，放入-80°C冰箱中过夜，次日转移至液氮中长期保存。
如果缺乏程序冻存设备，可将冻存管先置于4°C静置5-10分钟，再在-20°C静置2小时，最后转入-80°C冰箱中过夜。
复苏与培养
从液氮中迅速取出NPCHK1细胞冻存管，在37°C水浴中解冻，轻轻摇晃直至冰块完全融化。
将NPCHK1细胞悬液转移至15 ml离心管，加入9 ml培养基。
900 rpm离心5分钟，弃去上清，用5 ml培养基重悬NPCHK1细胞。
将NPCHK1细胞悬液接种至T25培养瓶中，放入培养箱中培养。
次日更换培养基，去除未贴壁的死细胞和残余的DMSO。
当NPCHK1细胞贴壁并稳定生长后，根据NPCHK1细胞的生长情况进行传代。
相关资料
STR鉴定及相关
| Amelogenin | X |
| CSF1PO | 11,12 |
| D2S1338 | 20,23 |
| D3S1358 | 15 |
| D5S818 | 11,13 |
| D7S820 | 8,11 |
| D8S1179 | 11,13 |
| D13S317 | 11 |
| D16S539 | 9,11 |
| D18S51 | 17 |
| D19S433 | 14 |
| D21S11 | 28,29 |
| FGA | 26 |
| TH01 | 7,9 |
| TPOX | 8,11 |
| vWA | 18,19 |
参考文献
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