RPMI-2650细胞（人鼻腔上皮细胞）

RPMI-2650细胞系源自一名52岁男性的鳞状细胞癌患者，其肿瘤起源于鼻中隔，并转移至胸腔，导致胸腔积液的产生。该患者的癌症被确诊为间变性鳞状细胞癌，这是一种罕见的鼻中隔恶性肿瘤。

RPMI-2650细胞系具备准二倍体核型，染色体数目保持稳定，是一种特有的永久性人类细胞系。RPMI-2650细胞系的细胞通常较小，倾向于成簇生长，并在培养基中融合形成致密的细胞层。RPMI-2650细胞系在癌症研究和毒理学领域中具有重要意义，尤其是在与鼻腔疾病和药物递送系统相关的研究中。

RPMI-2650细胞特性特征

• 免疫标记：通过免疫过氧化物酶染色，RPMI-2650细胞对角蛋白呈阳性反应，这表明其上皮细胞的特征。

• MUC5AC水平：研究显示，RPMI-2650细胞的MUC5AC水平较低，这与其在鼻腔药物递送模型中的应用相关。MUC5AC是一种重要的粘液糖蛋白，通常与呼吸道上皮的功能相关。
  

• 纤毛标记：RPMI-2650细胞系表现出较低的纤毛标记和跨膜电阻（TEER），这可能影响其在模拟鼻腔生理条件下的功能。

• 基因组稳定性：RPMI-2650细胞可能携带一些与肿瘤发生相关的基因突变或表达异常，但具体的基因组分析数据尚需进一步研究确认。
  

• 应用潜力：RPMI-2650细胞系在癌症研究、药物递送系统开发及毒理学评估中具有广泛应用潜力，尤其是在研究鼻腔相关疾病及药物透过性的机制方面

RPMI-2650细胞参数表

RPMI-2650人鼻腔上皮细胞培养教程

检查和初始处理

• 收到RPMI-2650细胞后，检查运输容器是否完整，是否有漏液现象。如有问题，及时联系供应商。

• 将RPMI-2650细胞置于显微镜下，观察细胞的形态和密度。如果细胞生长正常，继续培养操作。

• 去除培养瓶的封口膜后，将RPMI-2650细胞置于37°C培养箱内孵育2-3小时，使细胞适应新的环境。

• 弃去原培养基，添加6 mL新鲜的DMEM/F12完全培养基，继续培养，待RPMI-2650细胞密度达80%-90%时进行传代操作。

RPMI-2650细胞复苏步骤

• 从液氮中取出冻存的RPMI-2650细胞，迅速置于37°C水浴中，轻轻摇晃，直至完全融化。

• 解冻后，将RPMI-2650细胞悬液加入4 mL预温的培养基中混匀。

• 以1000 RPM离心4分钟，弃去上清液。

• 补加1-2 mL新鲜培养基轻轻吹打细胞悬液，将其移入10 cm培养皿或T25培养瓶中，加入8 mL培养基。

• RPMI-2650细胞在37°C、5% CO₂培养箱中孵育过夜。次日更换新鲜培养基并检查细胞的状态和密度。

RPMI-2650细胞传代

• 当RPMI-2650细胞达到80%-90%汇合度时，准备进行传代操作。

• 弃去培养基，用不含钙、镁离子的PBS冲洗RPMI-2650细胞1-2次，以去除残余的血清和代谢物。

• 加入1 mL 0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液，37°C孵育1-2分钟，观察RPMI-2650细胞变圆并脱落。

• 当细胞大部分脱落后，轻敲培养瓶，并加入少量培养基终止消化。

• 收集消化后的RPMI-2650细胞悬液，1000 RPM离心4分钟后，弃去上清。加入1-2 mL培养基将细胞重新悬浮，并按1:2的比例进行分瓶培养。

RPMI-2650细胞冻存

• 选择状态良好的RPMI-2650细胞，弃去旧培养基并用PBS清洗细胞。

• 加入1 mL胰酶消化RPMI-2650细胞，加入培养基终止消化，利用血球计数板对细胞进行计数，确保每冻存管含细胞密度不低于1×10⁶细胞。

• RPMI-2650细胞收集后离心，加入含10% DMSO和90%血清的冻存液重悬，确保DMSO终浓度为10%。

• 将1 mL RPMI-2650细胞悬液分装至冻存管中，置于程序降温盒中，在-80°C冷冻2小时后移入液氮长期保存。做好冻存管的标识，并记录其位置。