
FRhK-4细胞(恒河猴胚肾细胞)
- 来源:胚胎
- 细胞特征:贴壁细胞 , 上皮细胞样
- 培养基:DMEM+10% FBS+1% P/S
- 其他:FRhK-4细胞系因其来源于非人灵长类动物,在某些研究中被视为人类细胞系的替代品,以更好地模拟人类生理状态
FRhK-4细胞(恒河猴胚肾细胞)源自一只正常雌性恒河猴(Macaca mulatta)胚胎,胚胎重量约300克,组织采自其肾脏。FRhK-4细胞是上皮样、连续型贴壁细胞,具备稳定的生长特性,适用于长期体外培养。由于其来源于非人灵长类动物,FRhK-4细胞在一定程度上可作为人类细胞系的替代模型,在病毒感染机制研究、疫苗开发及抗病毒药物筛选等领域广泛应用,特别是在甲型肝炎研究中,已被多家实验室使用和验证,确保其种属特异性和实验稳定性。
FRhK-4细胞特性特征
标记物:FRhK-4细胞在分子标记方面主要表现出上皮细胞的特征
基因表达:FRhK-4细胞在病毒感染研究中常用作模型,能够有效表达与病毒相互作用相关的基因。例如,在甲型肝炎病毒(HAV)研究中,该细胞系被用于病毒的生长和复制研究。
染能力:FRhK-4细胞能够进行有效的转染实验,这对于研究基因功能及其调控机制非常重要。
基因组信息:虽然具体的基因组序列信息尚未完全公开,但FRhK-4细胞作为恒河猴来源的细胞系,其基因组与人类有一定相似性,这使得其在某些生物医学研究中成为人类细胞系的替代品
FRhK-4细胞参数表
细胞名称 | FRhK-4细胞(恒河猴胚肾细胞) |
细胞别称 | FRHK-4; Frhk-4; FRhK4; Fetal Rhesus Kidney-4 |
ATCC编号 | CRL-1688:ATCC(美国典型培养物保藏中心)编号 |
来源物种 | 恒河猴(Macaca mulatta):来源于300 克重恒河猴正常雌性胚胎的肾组织 |
细胞形态 | 上皮样:细胞呈现典型的上皮细胞形态 |
生长特性 | 贴壁生长:适合在培养基中贴壁生长 |
倍增时间 | 每2-3天:细胞在适当条件下的生长速度 |
培养基 | DMEM+10% FBS+1% P/S |
pH范围 | 7.2 - 7.4:培养基的pH值应保持在此范围内 |
温度条件 | 37°C:培养箱温度应设定为37°C |
CO₂浓度 | 5%:培养箱内应维持5%的二氧化碳浓度 |
传代比例 | 1:2到1:3:当细胞达到80%-90%融合时进行传代 |
传代频率 | 每2-3天:根据细胞生长情况定期传代 |
支原体检测 | 阴性:在使用前需进行支原体检测以确保纯净性 |
真菌检测 | 阴性:确保细胞培养不受真菌污染 |
内毒素含量 | ≤3 EU/mL:确保细胞培养基的内毒素水平符合标准 |
储存条件 | -80°C或液氮:冻存时应将细胞储存在-80°C或液氮中 |
细胞密度 | 1-2 x 10^6 cells/mL:接种时建议的初始细胞密度 |
冷冻保护剂 | DMSO或甘油:冻存时使用的保护剂 |
实验用途 | 病毒学研究、药物开发、疫苗研发:常用于甲型肝炎等病毒研究 |
运输条件 | 在运输过程中需保持低温,避免温度波动影响细胞活性 |
使用限制 | 本产品仅供实验室研究使用,不得用于人类或动物治疗 |
培养教程
FRhK-4恒河猴胚肾细胞培养教程
FRhK-4细胞复苏步骤
从液氮罐中快速取出FRhK-4细胞冻存管,并迅速置于37°C水浴中解冻,解冻期间轻轻摇晃以促进均匀受热。
解冻后,立即将FRhK-4细胞悬液转移至10毫升预热的培养基中,置于离心管内。
以1000 rpm离心5分钟,以去除FRhK-4细胞冻存保护剂(通常为DMSO),避免对细胞造成毒性影响。
轻轻弃去上清,将FRhK-4细胞沉淀用新鲜培养基重悬,缓慢吹打以确保细胞均匀分散。
根据实验需要,将FRhK-4细胞以1-2×10^6个的密度接种到培养瓶中,置入培养箱内进行孵育。
FRhK-4细胞的培养与维护
每2-3天检查FRhK-4细胞的生长情况,根据细胞增殖和培养基变色情况及时更换培养基,以去除废物并补充营养。
使用倒置显微镜检查FRhK-4细胞的形态,确保无污染并健康生长。正常的FRhK-4细胞应呈现典型上皮样形态,密集且有规则排列。
当FRhK-4细胞达80%-90%融合度时进行传代。首先用无钙镁的PBS轻柔洗涤FRhK-4细胞,再加0.25%胰蛋白酶消化2-5分钟。观察到细胞开始脱落时,迅速加入培养基终止消化。
将FRhK-4细胞悬液离心后重悬,再次接种至新培养瓶中,置于恒温箱内继续培养。
注意事项
无菌操作:全程操作应遵循无菌技术,并佩戴手套和口罩以避免污染。
定期支原体检测:为避免支原体污染,应定期检测FRhK-4细胞的培养环境。
研究用途限定:FRhK-4细胞仅供科研实验使用,不可用于人类或动物治疗。