2v6.11细胞 (人胚肾细胞)

2v6.11细胞来源于2001年的人胚胎肾系HEK-293。2V6.11细胞系是研究腺病毒E4癌蛋白，特别是已知参与细胞基因组维持和修复的E4 34K蛋白的宝贵资源。

2V6.11细胞通过用质粒pVgRxR转染，然后用pEKORF6转染获得，导致E4 34K蛋白的诱导表达，这与修复DNA中双链断裂的细胞机制的抑制有关。
2V6.11细胞系证明腺病毒蛋白E4 34k和E1b 55k通过破坏非同源末端连接（NHEJ）和破坏DNA修复蛋白的稳定来抑制染色体DNA修复，将其作用从染色体外扩展到细胞基因组DNA。

2V6.11诱导型细胞系具有粘附的上皮形态，是研究肾来源上皮细胞的行为和特征的理想细胞，包括它们对人类腺病毒40感染的反应。这种可以通过蛋白质印迹检测的多功能细胞系使研究人员能够深入研究腺病毒E4癌蛋白抑制修复过程的分子机制，从而有助于我们理解腺病毒病理学和开发新治疗策略的潜力。

2v6.11细胞特性

• 2V6.11细胞源自2001年的人胚胎肾系HEK-293。

• 细胞转化过程中使用了质粒pVgRXR和pEKORF6，pEKORF6包含编码E4 24K的Ad5 E4ORF6基因。

• 2V6.11细胞可诱导表达人腺病毒E4 34KDa蛋白。

• 2v6.11细胞可用于研究腺病毒E4癌基因的工具。

• 2v6.11细胞细胞形态为粘附的上皮型。

• 2v6.11细胞对人类腺病毒40感染有反应。

• 2V6.11细胞系证明腺病毒蛋白E4 34k和E1b 55k通过破坏非同源末端连接（NHEJ）和破坏DNA修复蛋白的稳定来抑制染色体DNA修复，将其作用从染色体外扩展到细胞基因组DNA。

2v6.11细胞参数表

2v6.11人胚肾细胞培养说明

2V6.11细胞的传代步骤

• 细胞密度达80%-90%时传代培养：

• 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

• 加2 mL消化液（0.25% Trypsin-0.53 mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况。若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。

• 按6-8 mL/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000 RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2 mL培养液后吹匀。

• 收到细胞后首次传代推荐将细胞悬液按1:2的比例分到新的含6 mL培养基的新皿中或瓶中，建议冻存一支备用。后续传代根据实际情况按1:2到1:4的比例进行。

2V6.11细胞的冻存步骤

• 弃去培养基后，PBS清洗一遍后加入1 mL胰酶。细胞变圆脱落后，加入1 mL含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。

• 4分钟1000 RPM离心去掉上清。加1 mL血清重悬细胞，根据细胞数量加入血清和DMSO，轻轻混匀，DMSO终浓度为5%，细胞密度不低于1×10^6/mL，每支冻存管冻存1 mL细胞悬液，注意冻存管做好标识。

• 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80℃冰箱，至少2个小时后转入液氮罐储存。记录冻存管位置以便下次取用。

注意事项

• 细胞传代时，务必在显微镜下确认2V6.11细胞已充分消化但未过度消化，以保证细胞的活性和正常形态。

• 冻存时，确保DMSO浓度和2V6.11细胞密度的准确性，以保证细胞在复苏后的存活率和活力。

• 在整个操作过程中应保持无菌操作，避免细胞污染。