
HEK-293FT细胞(人胚胎肾细胞)
- 来源:胚胎;HEK-293FT细胞系衍生自293F细胞系
- 细胞特征:贴壁细胞 , 上皮细胞样
- 培养基:生长培养基:DMEM+500μg/mL G418+10% FBS+1% P/S
- 其他:使用ViraPower™慢病毒表达系统时,293FT细胞可产生高水平的病毒RNA和所需的包装蛋白
HEK-293FT细胞系衍生自293F细胞系。
HEK-293FT细胞系是一种源自于SV40大T抗原转化的人胚胎肾细胞的衍生物,具有快速生长、高效转染和高病毒滴度的特点。
293FT人胚肾细胞系是使用ViraPower™慢病毒表达系统产生高滴度慢病毒的理想细胞系。当将ViraPower™表达载体和ViraPower慢病毒包装混合物共转染到HEK-293FT细胞中时,会产生高水平的病毒RNA以及包装所需的gag ⁄ pol和rev蛋白。
HEK-293FT细胞是非常适合生产慢病毒的宿主。并稳定表达来自pCMVSPORT6TAg.neo质粒的SV40大T抗原。SV40大T抗原的表达由人巨细胞病毒(CMV)启动子控制,并且是高水平和组成型的。
HEK-293FT细胞特性
HEK-293FT细胞系是通过SV40大T抗原转化的人胚胎肾细胞衍生物,具有快速生长、高效转染能力和高病毒滴度。
HEK293f细胞是慢病毒表达系统中的理想宿主,非常适合生产慢病毒。
HEK293f细胞来源于SV40大T抗原转化的人胚胎肾细胞,具有高度可转染性。
使用ViraPower™慢病毒表达系统时,293FT细胞可产生高水平的病毒RNA和所需的包装蛋白。
HEK293ft细胞系具有高水平和组成型的SV40大T抗原表达。
HEK293ft细胞系生长快速,易于转染。
HEK-293FT细胞参数表
细胞名称 | HEK-293FT细胞(人胚肾细胞) |
别称 | HEK-293FT, HEK 293FT, HEK-293-FT, HEK293FT, 293-FT, 293FT, FT-293 |
种属来源 | 人 |
组织来源 | 胚胎肾 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
细胞纯度 | 93% |
细胞活力 | 87%(ViabilitybyTrypanBlueExclusion) |
污染检测 | 不含HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌 |
冻存条件 | 55%基础培养基+40%FBS+5%DMSO,液氮储存 |
运输条件 | 干冰运输(1Vial)或活细胞运输(T-25flasks) |
细胞培养基 | DMEM-H10%FBS1%NEAA / RPMI-1640培养基(不含Hepes)+ 10%胎牛血清+ 1%双抗+800ng/ml Taxol |
培养温度 | 37.0°C |
CO2浓度 | 空气 95%,CO2 5% |
传代比例 | 1:3-1:5 |
换液频率 | 2-3次/周 |
重要特性 | - 来源于SV40大T抗原转化的人胚肾细胞,具有高度可转染性。 |
- 高水平和组成型的SV40大T抗原表达。 | |
- 适用于ViraPower™慢病毒表达系统,产生高水平的病毒RNA和包装蛋白。 | |
使用建议 | 如果要使用ViraPower™慢病毒表达系统产生高滴度的慢病毒,293FT细胞系是理想的选择。 |
293FT细胞系是生长快速,非常易于转染的克隆分离物。 | |
用途 | 仅限科研使用,不可用于临床诊断和治疗 |
保藏机构 | ATCC; PTA-5077 |
培养教程
HEK-293FT细胞(人胚肾细胞)培养说明
解冻步骤
从液氮中取出细胞冻存管,快速在 37°C 水浴中解冻。
使用 70% 酒精对冻存管外壁消毒,将细胞转移到含 PBS 的 15 mL 无菌试管中,离心并重悬于不含 Geneticin 的 2 mL 完全培养基中。
将细胞转移至含 10 mL 完全培养基的 T-75 cm² 培养瓶中。
在 37°C 下过夜孵育,直至细胞贴附到瓶底。
第二天吸走培养基,替换为含有 500 μg/mL Geneticin 的新鲜完全培养基。
传代培养细胞
吸走培养瓶中的全部培养基,用 10 mL PBS 洗涤细胞,去除多余的培养基和血清。
加入 2 mL 胰蛋白酶/EDTA 溶液,室温下孵育至细胞脱壁,确认大多数细胞已脱壁。
加入 8 mL 含有 Geneticin 的完全培养基,将细胞悬液转移至 15 mL 无菌锥形管中。
测定细胞活力和总细胞数。
使用推荐密度接种细胞至新的培养瓶。
冷冻细胞
将HEK-293FT细胞培养至 70-90% 汇合度。
将细胞悬液离心,去除培养基,转移至预冷的冷冻培养基中。
分装细胞悬液至冻存管,控制冷冻速率并存储于液氮中。
转染细胞
细胞保持在健康状态并达到适当的汇合度。
对细胞进行铺板,使之在转染时达到 90-95% 的汇合度。
将质粒构建体转染至HEK-293FT细胞中。
转染完成后,加入含有 500 μg/mL Geneticin 的新鲜培养基,恢复细胞 24-48 小时后进行实验。
相关资料
STR鉴定及相关
Amelogenin | X |
CSF1PO | 7,12 |
D2S1338 | 19 |
D3S1358 | 15,17 |
D5S818 | 8,9 |
D7S820 | 11 |
D8S1179 | 12,14 |
D13S317 | 12 |
D16S539 | 9,13 |
D18S51 | 17,18 |
D19S433 | 15,18 |
D21S11 | 30.2 |
FGA | 23 |
TH01 | 7,9.3 |
TPOX | 11 |
vWA | 16,19 |
参考文献
- HEK293细胞的传代、建库与高效表达重组HPV16-E6E7腺病毒的研究 中国现代应用药学 > 2015年4期
- 摘要:目的 对HEK293细胞进行三级细胞库的建立,并高效表达重组的HPV16-E6E7腺病毒....
- Endogenous ion channels expressed in human embryonic kidney (HEK-293) cells Pflugers Arch . 2022 Jul;474(7):665-680.
- 摘要:Mammalian expression systems, particularly th...
- Human embryonic kidney (HEK-293) cell line: An alternative for rabies virus diagnosis and research J Virol Methods . 2021 Aug:294:114195.
- 摘要:...n to be the most permissive for infection....
- Transient expression in HEK 293 cells: an alternative to E. coli for the production of secreted and intracellular mammalian proteins Methods Mol Biol . 2015:1258:209-22.
- 摘要:Transient transfection of human embryonic kid...
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