
293E细胞【人胚肾细胞(EBNA1基因修饰)】
- 来源:肾脏
- 细胞特征:贴壁细胞 ,上皮细胞样,多角形
- 培养基:IMDM+10% FBS+1% P/S
- 其他:基因修饰:EBNA1基因;可稳定表达EBNA1
293E人胚肾细胞(EBNA1基因修饰)是从HEK293细胞系衍生而来的。HEK293细胞系最初由Alex van der Eb在1973年通过将人胚胎肾细胞转染腺病毒5型DNA片段建立,具体实验由Frank Graham实施。293E细胞在此基础上引入了EBNA1基因修饰,EBNA1即Epstein-Barr病毒核抗原1,这种修饰增强了细胞的基因表达能力,使293E细胞在稳定表达EBNA1方面具有显著优势。
293E细胞特性特征
293E细胞在19号染色体上整合了约4.5 kb的腺病毒DNA片段。
293E细胞通过引入EBNA1(Epstein-Barr病毒核抗原1)基因进行修饰。
293E细胞参数表
细胞名称 | 293E细胞【人胚肾细胞(EBNA1基因修饰)】 |
细胞别称 | 293 c18; 293c18; HEK 293 c18; HEK-293 c18; HEK293-EBNA1; HEK-293-EBNA; HEK 293-EBNA;HEK 293 EBNA; HEK293EBNA; 293 EBNA; |
细胞来源 | 人;胚胎肾脏 |
细胞类型 | 转化细胞系 |
形态 | 上皮细胞样;多角形 |
基因修饰 | EBNA1基因;可稳定表达EBNA1 |
来源细胞系 | 293 [HEK-293]细胞 |
培养方式 | 贴壁生长 |
培养基 | IMDM + 10% FBS + 1% P/S |
细胞密度 | 1×10^6cells/T25培养瓶 |
培养环境 | 37°C;5% CO2 |
生物安全等级 | BSL-2 |
应用限制 | 仅用于科研或工业,不可用于临床诊断或治疗 |
基因表达 | 可稳定表达EBNA1 |
培养教程
293E人胚肾细胞(EBNA1基因修饰)培养教程
细胞复苏
从液氮中取出冻存的293E细胞,迅速置于37°C水浴中解冻。
将解冻的293E细胞悬液转移到含有预热培养基的离心管中。
离心洗涤293E细胞,去除冻存保护剂。
将293E细胞重悬于新鲜培养基中,并转移到培养瓶中。
常规培养
使用T25培养瓶,初始接种密度为1×10^6 293E细胞/瓶。
每2-3天更换新鲜培养基。
观察293E细胞的生长状态,保持细胞密度在70-80%左右。
传代
当293E细胞密度达到80-90%时进行传代。
用PBS轻轻洗涤293E细胞层。
加入适量胰蛋白酶-EDTA溶液,37°C孵育2-3分钟。
轻轻拍打培养瓶,使293E细胞脱落。
加入含血清的培养基终止消化。
按照1:3 - 1:6的比例进行传代,根据293E细胞的生长状态调整具体比例。
细胞冻存
收集对数生长期的293E细胞。
制备冻存液(90% FBS + 10% DMSO)。
调整293E细胞浓度至1-2×10^6 cells/mL。
将293E细胞悬液分装到冻存管中。
使用程序降温盒缓慢降温,最终转移到液氮中长期保存。
注意事项
定期检查293E细胞形态和生长状态。
保持无菌操作,防止污染。
避免293E细胞过度生长或密度过低。
定期进行支原体检测。
质量控制
定期进行293E细胞活性检测。
进行细菌、真菌、霉菌污染物镜检。
进行衣原体、支原体检测。
必要时进行STR鉴定,确保293E细胞系纯度。
相关资料
STR鉴定及相关
Amelogenin | X |
CSF1PO | 11,12 |
D2S1338 | 19 |
D3S1358 | 15,17 |
D5S818 | 8,9 |
D7S820 | 11,12 |
D8S1179 | 12,14 |
D13S317 | 12,14 |
D16S539 | 9 |
D18S51 | 18 |
D19S433 | 18 |
D21S11 | 28,30.2 |
FGA | 23 |
PentaD | 9,10 |
PentaE | 7,15 |
TH01 | 7,9.3 |
TPOX | 11 |
vWA | 16,19 |
D6S1043 | 11 |
D12S391 | 19,21 |
D2S441 | 11,15 |
参考文献
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