COS-1细胞（非洲绿猴SV40转化的肾细胞）

COS-1细胞系（ATCC CRL-1650）源自非洲绿猴（Cercopithecus aethiops）的肾成纤维细胞，是通过将含有野生型T抗原的SV40病毒转染至CV-1细胞获得的。COS-1细胞株含有SV40基因组早期区域的组成型拷贝，因此能够稳定表达T抗原。COS-1细胞对SV40病毒高度敏感，支持SV40的裂解性生长，可在40℃下有效复制ts A209突变株，并能扩增SV40早期缺失突变体。

作为SV40转化的细胞系，COS-1细胞适合用于携带SV40 T抗原需求的转染实验，且表现出优异的转染效率与较高的稳定性，使其广泛应用于基因表达研究、重组蛋白的生产以及疫苗开发等分子生物学领域。其标准命名为“COS-1 (African Green Monkey SV40-transformed Kidney Cell)”这些特性和高度的转染能力使COS-1细胞成为生命科学研究中重要的实验工具。

COS-1细胞特性特征

• 病毒易感性：COS-1细胞对SV40病毒具有高度敏感性，能够支持SV40病毒的复制。

• 永生化：通过SV40转化获得永生化能力，COS-1细胞中整合有SV40基因组完整早期区域的单个拷贝。

• 表达基因：COS-1细胞主要表达SV40的T抗原。该抗原在细胞增殖和转染中起关键作用。
  

• 其他特征：EBNA阴性、Fc受体阴性和补体受体阴性，这使得COS-1细胞在某些实验中更具特异性。

• COS-1细胞能够支持温度敏感性A209病毒在40°C下的复制，这一特性使其在研究温度敏感病毒时具有重要应用
  

COS-1细胞参数表

COS-1非洲绿猴SV40转化的肾细胞培养教程

COS-1细胞复苏

• 将冻存的COS-1细胞置于37°C水浴中快速解冻，确保快速均匀地恢复细胞活性。
  

• 解冻后的COS-1细胞移入含有4 mL预热的培养基中，轻轻混匀，以防止冻存液对COS-1细胞的影响。
  

• 将COS-1细胞在1000 RPM下离心4分钟，弃去上清液以去除冷冻保护剂。
  

• 将COS-1细胞用1-2 mL新鲜培养基重悬，接种到培养瓶中，并放入培养箱中过夜培养，以帮助COS-1细胞适应新的培养环境。
  

COS-1细胞传代

• 观察COS-1细胞的生长情况，传代在COS-1细胞密度达到80%-90%时进行。
  

• 弃去COS-1细胞培养的上清液，用无钙镁离子的PBS洗涤1-2次，以清除代谢产物。
  

• 使用0.25%胰蛋白酶-EDTA消化液，37°C培养1-2分钟，观察COS-1细胞是否圆化、脱附。
  

• 当COS-1细胞大部分脱附后，立即加入2-3 mL完全培养基终止胰酶作用，避免COS-1细胞受损。
  

• 以1000 RPM离心4分钟，弃去上清液，并用新鲜培养基重悬COS-1细胞。
  

• COS-1细胞可按1:2至1:5比例分装至新的培养瓶，并补充8 mL培养基，继续培养。
  

COS-1细胞冻存

• 使用92%胎牛血清和8% DMSO的混合液作为COS-1细胞的冻存液，或使用92%完全培养基和8% DMSO，以确保COS-1细胞在冻存时维持较高的存活率。
  

• 待COS-1细胞状态良好时，弃去培养基，PBS洗涤后加入胰酶消化，待COS-1细胞变圆后加入培养基终止消化。
  

• 通过离心收集COS-1细胞的沉淀，加入冻存液后轻轻重悬。
  

• 将COS-1细胞悬液分配至冻存管中，每管细胞密度保持在200-300万/mL。
  

• 将COS-1细胞冻存管置于程序降温盒中，放入-80°C冷冻过夜，然后转移至液氮罐中长期保存。
  

注意事项

• 培养COS-1细胞的整个过程中需保持无菌操作，以防止细菌污染。

• 所有试剂在使用前需提前恢复至室温，避免COS-1细胞暴露于温度波动。

• 定期检查COS-1细胞的生长状态，记录COS-1细胞的生长速率和形态，必要时调整培养条件。