
BS-C-1细胞(非洲绿猴肾细胞)
- 来源:肾
- 细胞特征:贴壁细胞 , 上皮细胞样
- 培养基:MEM(含NEAA)+10% FBS+1% P/S
- 其他:对多种病毒敏感,包括: 脊髓灰质炎病毒、SV40病毒、水泡性口炎病毒
BS-C-1细胞系是一种具有上皮形态的细胞,来源于非洲绿猴(学名:Cercopithecus aethiops)的肾脏组织。BS-C-1细胞系于1961年由Hopps等人通过原代培养并筛选而建立,表现出自发永生化的特性,适用于长期培养。在病毒学和药物筛选方面广泛应用,特别在病毒敏感性方面表现突出。BS-C-1细胞系是合适的转染宿主,可用于检测病毒,适合SV40载体转染的非洲绿猴肾细胞系。
BS-C-1细胞特性特征
染色体频率:2n=60,具有一条大型亚中部中心标记染色体。
染色体特征:具备一条大型亚中部标记染色体,部分细胞含有次级收缩染色体和双着丝粒染色体。
基因表达:主要表达角蛋白,表明其上皮细胞的特性。
免疫组化结果:通过免疫过氧化物酶染色,角蛋白呈阳性。
病毒易感性:对1型脊髓灰质炎病毒(Poliovirus type 1)敏感、对SV40病毒(SV40 virus)敏感、对水泡性口炎病毒(Vesicular stomatitis virus)敏感,包括奥赛(印第安纳州)和格拉斯哥(印第安纳州)的株系
BS-C-1细胞参数表
细胞名称 | BS-C-1细胞(非洲绿猴肾细胞) |
细胞别称 | BSC-1; BSC1; GMK, BSC-1; Biologics Standards-Cercopithecus-1 |
来源 | 非洲绿猴(Cercopithecus aethiops)肾脏组织 |
建立时间 | 1961年 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
细胞类型 | 自发永生化细胞 |
生长特性 | 贴壁生长 |
生物安全等级 | BSL-1 |
培养基 | MEM(含 NEAA)+10% FBS+1% P/S |
培养环境 | 空气95%;CO₂ 5%;37℃ |
倍增时间 | ~72小时 |
传代比例 | 1:3 - 1:4 |
换液频率 | 每周2-3次 |
冻存条件 | 55% 基础培养基 + 40% FBS + 5% DMSO |
冻存方式 | 液氮 |
病毒易感性 | 对SV40病毒、脊髓灰质炎病毒(Poliovirus type 1)、水泡性口炎病毒敏感 |
基因表达特征 | 表达角蛋白 |
染色体特征 | 2n=60,含一条大型亚中部中心标记染色体,部分细胞含双着丝粒染色体。 |
培养代数 | 可培养至40-50代 |
保藏机构 | ATCC; CCL-26; BCRC; GDC0033; CLS; ECACC等 |
供应限制 | 仅供科研使用 |
应用领域 | 病毒学研究:用于病毒的传播和分离研究。 |
药物筛选和转染实验:特别适合SV40载体的转染。 | |
基础生物学研究:用于细胞增殖、分化等方面的实验。 |
培养教程
BS-C-1非洲绿猴肾细胞培养教程
BS-C-1细胞复苏
将BS-C-1细胞冻存管从液氮中取出后,迅速置于37℃水浴中解冻,轻轻摇动,直至BS-C-1细胞悬液完全融化。
将解冻后的BS-C-1细胞悬液缓慢加入4 mL完全培养基中,轻轻混匀。
在1000 RPM下离心4分钟,弃去上清。
用1-2 mL新鲜培养基重悬BS-C-1细胞,轻轻吹打均匀。
将重悬的BS-C-1细胞转移至培养瓶或10 cm培养皿,加入8 mL培养基。
放置于37℃、5% CO₂培养箱中过夜,次日更换培养基并观察BS-C-1细胞的状态。
BS-C-1细胞传代
传代条件:当BS-C-1细胞生长密度达到80%-90%时应进行传代。
注意:观察BS-C-1细胞是否开始变圆并脱落。
观察BS-C-1细胞生长状态,移去培养瓶封口膜,将其置于37℃下孵育2-3小时,使BS-C-1细胞恢复状态。
弃去培养基,用预温的无钙镁PBS缓冲液清洗BS-C-1细胞1-2次。
加入1 mL消化液(0.25%胰蛋白酶 + 0.53 mM EDTA),置于37℃培养箱消化1-2分钟。
添加少量培养基以终止消化,轻轻吹打使BS-C-1细胞完全脱壁。
将BS-C-1细胞悬液加入6-8 mL新鲜培养基中混匀,再次在1000 RPM下离心4分钟,弃去上清。
将BS-C-1细胞按比例(1:3或1:4)分装到新的培养瓶中,加入8 mL培养基,并置于培养箱中继续培养。
BS-C-1细胞冻存
冻存条件:在BS-C-1细胞状态良好且处于对数生长期时进行冻存。
配制BS-C-1细胞冻存液:55%基础培养基 + 40% FBS + 5% DMSO。
收集BS-C-1细胞并离心,弃去上清后,用冻存液重悬BS-C-1细胞。
将BS-C-1细胞悬液分装入冻存管,标记清晰。
将BS-C-1细胞冻存管放入-80℃冰箱中过夜,随后转移至液氮罐中保存。