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COS7细胞系(非洲绿猴SV40转化的肾细胞)货号:STM-CL-8224 规格:1×10⁶cells/T25培养瓶或1mL冻存管

COS7细胞系(非洲绿猴SV40转化的肾细胞)

  • 来源:肾;SV40转染
  • 细胞特征:贴壁细胞 , 成纤维细胞样
  • 培养基:DMEM+10% FBS+1% P/S
  • 其他:COS7细胞能够持续表达SV40 T抗原,这使得它们在转染实验中表现出良好的转染效率。
价格:¥ 900.00
提供种属鉴定报告

COS-7细胞系是从非洲绿猴(Chlorocebus aethiops)肾脏细胞经过SV40病毒转化而得到的细胞系,其来源追溯至最初从非洲绿猴肾脏组织分离出的CV-1细胞。在1980年代初,研究人员通过将带有编码野生型T抗原并具有起始失活突变的SV40病毒转染到CV-1细胞中,成功建立了COS7细胞。COS7细胞携带了SV40基因组中全部早期区域的组成型拷贝,持续表达SV40 T抗原,具备增殖能力和高效的转染特性。

COS7细胞形态类似于成纤维细胞,在体外条件下具有显著的增殖优势,适用于长时间培养。COS7细胞广泛应用于多种生物学研究,包括基因表达、蛋白质生产及药物筛选等领域,是一种极为重要的细胞模型系统。

COS7细胞系特性特征

  • COS7细胞含有来自SV40基因组全部早期区域的组成型拷贝,这使得它们能够持续表达SV40 T抗原。

  • T抗原的表达使得COS7细胞具备了无限增殖的能力,并提高了其转染效率。

  • COS7细胞常用于研究基因表达和蛋白质功能,尤其是在类固醇生成和受体功能相关的研究中。

  • 研究表明COS7细胞能够将激素如睾酮代谢为其他类固醇产物

COS7细胞系参数表

细胞名称COS7细胞系(非洲绿猴SV40转化的肾细胞)
细胞别称Cos-7; COS7; CV-1 in Origin Simian-7
ATCC编号CRL-1651
种属来源非洲绿猴(Chlorocebus aethiops)
组织来源肾脏
细胞形态成纤维细胞样
生长特性贴壁生长
基因表达情况T抗原
传代比例1:2至1:4
传代周期每2-3天一次
培养基组成90% DMEM + 10% FBS + 1% P/S
培养条件温度:37℃;气相:95%空气 + 5% CO2
冻存条件60%基础培养基 + 30% FBS + 10% DMSO,液氮储存
生物安全等级2级
支原体检测无支原体
质量检测细菌、真菌检测均为阴性
细胞规格1×10^6 cells/T25培养瓶
细胞代数限制通常在10代以内
温度敏感性支持40℃时温度敏感性A209病毒的复制
应用领域基础生物学研究、药物筛选、毒性测试、基因表达研究等

培养教程

COS7非洲绿猴SV40转化的肾细胞培养教程

COS7细胞复苏步骤

  • 取出COS7细胞冻存管:将冻存的COS7细胞从液氮罐中取出。

  • 快速解冻:在37℃水浴中快速解冻1-2分钟,轻轻摇动冻存管,直到细胞完全融化。

  • 将解冻后的COS7细胞悬液转移到离心管,加入4-6 mL预热的完全培养基,轻轻混匀。

  • 以1000 RPM离心3-5分钟,去除上清液,减少DMSO对COS7细胞的毒性。

  • 重悬COS7细胞:加入6-8 mL预热的完全培养基,将细胞轻轻吹打均匀。

  • 接种培养:将重悬的COS7细胞移至培养瓶或培养皿,置于37℃、5% CO₂培养箱中培养。

COS7细胞传代

  • 观察细胞密度:当COS7细胞密度达80%-90%时,即可进行传代。

  • 弃去旧培养基,用无钙镁的PBS缓冲液清洗COS7细胞1-2次,以去除血清残留,防止胰蛋白酶消化过程受影响。

  • 加入0.25%胰蛋白酶和0.53 mM EDTA的混合消化液(如T25瓶使用1-2 mL),在37℃下消化1-2分钟。

  • 在显微镜下观察细胞是否变圆、脱落,迅速加入含10% FBS的培养基中和消化作用。

  • 将消化后的COS7细胞转移到离心管,以500 g离心2分钟,弃去上清液。

  • 加入适量培养基重悬细胞,根据实验需求进行细胞计数。

  • 接种新培养瓶:按1:2至1:4的比例将COS7细胞接种至新培养瓶或培养皿中。

COS7细胞冻存

  • 制备COS7细胞冻存液:使用90%胎牛血清和10% DMSO的混合液作为COS7细胞冻存液。

  • 收集细胞:在冻存前将已传代的COS7细胞离心,去除上清液,加入冻存液并轻轻混匀。

  • 分装与冷冻:将混匀的COS7细胞悬液分装至冻存管中,每管约1 mL。

  • 将冻存管放入程序降温盒中,在-80℃环境下预冻一夜后,转入液氮中长期保存。

相关资料

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STR鉴定及相关

参考文献

SV40载体/COS7细胞稳定表达系统的建立与改进 《中国人民解放军军事医学科学院》 2002年
摘要:基于猴病毒40(SV40)载体在COS7细胞内的复制没有节制并对细胞具有致死性,长期以来S...
人骨保护素在COS7细胞内的瞬时表达 《承德医学院学报》 2008年02期
摘要:目的:在COS_7细胞内初步表达人骨保护素(OPG)并观察其表达水平。方法:将OPG的重组...
重组抗血小板多肽在COS7细胞中的表达、纯化和活性检测 《中国现代医学杂志》 2011年30期
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