
HMY2.CIR细胞(人B淋巴母细胞系)
- 来源:B淋巴母细胞
- 细胞特征:悬浮细胞 , 淋巴母细胞样
- 培养基:生长培养基:IMDM+10% FBS+1% P/S
- 其他:HMy2.CIR细胞不表达HLA A或B位点的产物,表达少量HLA Cw4
HMy2.CIR细胞是由ARH-77细胞株的快速生长突变株Hmy.2B经过γ射线照射,并选择HLA I类抗原表达缺失的细胞而形成HMy2.CIR细胞系。
HMY2.CIR细胞特性
HMy2.CIR细胞不表达HLA A或B位点的产物,但表达少量HLA Cw4。
HMy2.CIR细胞用于免疫学研究,也是转染I类主要组织相容性抗原基因的宿主。
HMy2.CIR细胞对EB核抗原(EBNA+)和EB病毒衣壳抗原(EBVCA+)呈阳性。
基于其起源于ARH-77细胞株的快速生长突变株Hmy.2B细胞,推测HMy2.CIR细胞系同样为EBNA阳性。
HMY2.CIR细胞参数表
细胞名称 | HMY2.CIR细胞(人B淋巴母细胞系) |
细胞别称 | Hmy.2 CIR; C1R;hmy2cir |
种属 | 人 |
细胞形态 | 淋巴母细胞样 |
冻存条件 | 冻存液:基础培养基 + 40% FBS + 5% DMSO;液氮保存 |
生长特性 | 悬浮细胞 |
免疫学特性 | EB核抗原阳性 (EBNA+);EB病毒衣壳抗原阳性 (EBVCA+) |
HL类抗原表达 | 不表达HLA A位点和B位点的产物,表达少量HLA Cw4 |
推荐换液频率 | 2-3次/周 |
生物安全等级 | BSL-2 |
组织来源 | 外周血 |
年龄(性别) | 33岁(女性) |
培养基 | IMDM + 10% FBS + 1% P/S |
培养条件 | 气相:空气,95%;CO2,5%;温度:37℃ |
推荐传代方法 | 离心收集细胞悬液 |
推荐传代周期 | 24-36小时 |
推荐传代面积比例 | 不高于1:3 |
推荐换液方式 | 2~3天换液1次 |
细胞来源 | HMy2.CIR细胞是从患者中分离的HMy.2B淋巴母细胞系,是ARH-77细胞系的快速生长突变体,通过γ射线照射和HLA I类抗原表达缺失的选择得到。 |
细胞用途 | 免疫学研究;转染I类主要组织相容性抗原基因的宿主 |
宝藏中心 | ATCC; CRL-1993 ECACC |
培养教程
HMY2.CIR人B淋巴母细胞系培养教程
冻存细胞的复苏
将含有1 mL HMy2.CIR细胞悬液的冻存管置于37°C水浴中,轻轻摇动至完全解冻。
将解冻后的细胞悬液加入含有4-6 mL完全培养基的离心管中,并充分混合。
在1000 RPM条件下离心3-5分钟,弃去上清液。
用完全培养基重悬HMy2.CIR细胞。
将处理后的细胞悬液加入含有6-8 mL完全培养基的培养瓶(或培养皿)中。
在37°C条件下培养过夜。第二天使用显微镜检查细胞生长情况和密度。
细胞传代
当HMy2.CIR细胞密度达到80%-90%时进行传代。
通过向培养瓶中添加完全培养基,维持细胞在1 × 10^5~1 × 10^6个/mL的生长状态。根据具体需求调整细胞密度。
若需要分瓶,将细胞悬液离心收集,离心速度1000 RPM,离心时间5分钟,弃去上清液,补加1-2 mL培养基后重悬混匀。
按1:2的比例将细胞悬液转移到新的T25培养瓶中,加入6-8 mL新鲜的完全培养基。
细胞冻存
在推荐的密度范围(1 × 10^6~1 × 10^7个活细胞/mL)将HMy2.CIR细胞收集到离心管中。
在1000 RPM条件下离心3-5分钟,弃去上清液。
将细胞重悬于冻存液中,每个冻存管中含有1 mL冻存液,细胞密度为1 × 10^6~1 × 10^7个活细胞/mL。
将冻存管置于-80°C冷冻箱中过夜。
转移到液氮容器中长期储存,并记录冻存管的位置信息。
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STR鉴定及相关
Amelogenin | X |
CSF1PO | 6,10 |
D2S1338 | 17 |
D3S1358 | 16 |
D5S818 | 10,13 |
D7S820 | 7,12 |
D8S1179 | 15 |
D13S317 | 11,13 |
D16S539 | 9,13 |
D18S51 | 14,16 |
D19S433 | 14,15 |
D21S11 | 29,30 |
FGA | 20,21 |
Penta D | 10 |
Penta E | 12 |
TH01 | 8 |
TPOX | 8 |
vWA | 17 |