
TMD8细胞(人弥漫性大B淋巴瘤细胞)
- 来源:B细胞
- 细胞特征:悬浮生长 , 淋巴母细胞样
- 培养基:RPMI-1640+10%FBS+1%P/S
- 其他:TMD8细胞携带MYD88 L265P突变、TMD8细胞具备强烈的NF-κB活性
TMD8细胞系源自一位62岁日本男性患者的骨髓样本,患者患有弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL),这是非霍奇金淋巴瘤中最常见的亚型。TMD8细胞系的形态为淋巴母细胞样,表现出典型的悬浮生长特性。作为DLBCL研究的重要工具,TMD8细胞系在探索疾病机制及开发针对性治疗方法方面具有广泛的应用潜力。
TMD8细胞特性特征
遗传异质性:TMD8细胞系表现出遗传异质性,包含多个亚克隆(至少3个亚克隆)。
基因表达:TMD8细胞表达Notch信号通路相关蛋白,如HES1 mRNA,表明其在肿瘤发生中的潜在作用。
信号通路:研究显示,γ-分泌酶对TMD8细胞生长有影响,这可能与Notch信号通路的激活有关。
药物敏感性测试:TMD8细胞用于评估新药物(如盐酸氯丙嗪)在DLBCL中的抑癌作用。
分子机制研究:TMD8细胞用于探讨Notch信号通路及其他相关机制在肿瘤发展中的角色。
TMD8细胞参数表
细胞名称 | TMD8细胞(人弥漫性大B淋巴瘤细胞) |
细胞别称 | TMD-8;Tokyo Medical and Dental University 8 |
组织来源 | B细胞 |
疾病特征 | 弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL) |
细胞形态 | 淋巴母细胞样 |
生长特性 | 悬浮生长 |
细胞代数 | 10代以内 |
细胞规格 | 1×10^6 cells/T25 或 1 mL冻存管 |
支原体检测 | 阴性 |
培养基 | RPMI-1640 + 10% FBS + 1% 双抗 |
培养条件 | 温度:37℃;气相:95%空气 + 5%二氧化碳 |
倍增时间 | ~30小时 |
传代方法 | 每周2次,比例1:2至1:6 |
冻存条件 | 90% 完全培养基 + 10% DMSO,液氮储存 |
遗传特征 | 遗传异质性,包含多个亚克隆(至少3个亚克隆) |
基因表达分析 | 深度外显子组分析、RNA测序分析、SNP阵列分析、转录组分析 |
供应限制 | 仅限于科学研究,不可用于治疗或其他临床应用 |
培养教程
TMD8人弥漫性大B淋巴瘤细胞培养教程
TMD8细胞复苏步骤
从液氮中取出TMD8细胞冻存管,立即放入37℃水浴中快速解冻,时间控制在1-2分钟内。
解冻后,用75%乙醇消毒管表面,将细胞转移至含有4 mL预热培养基的离心管中,轻轻混匀。
以1000 rpm离心3分钟,弃去上清液以去除冷冻保护剂。
加入1-2 mL新鲜培养基,轻轻吹打使TMD8细胞均匀分布。
将细胞悬液转移至培养瓶或培养皿,加入约8 mL培养基,置于培养箱中过夜。
24小时后更换培养基,检查TMD8细胞状态与密度,并继续培养。
TMD8细胞传代步骤
当TMD8细胞密度达到80%-90%时进行传代。
弃去上清液,用无钙、无镁的PBS轻轻漂洗TMD8细胞。
添加1 mL 0.25%胰蛋白酶溶液(含0.53 mM EDTA),覆盖所有TMD8细胞。
在37℃培养箱中消化1分钟,观察细胞形态变化,当TMD8细胞变圆并脱落时,轻敲培养瓶几下,随后加入培养基终止消化。
添加6-8 mL培养基,轻轻吹打均匀后,将TMD8细胞悬液转移至无菌离心管中,在1000 rpm条件下离心4分钟,弃去上清液。
用1-2 mL新鲜培养基重悬TMD8细胞。
按1:2比例将TMD8细胞悬液分配至新的培养皿或培养瓶中,加入适量培养基,继续置于37℃培养箱中培养。
TMD8细胞冻存步骤
当TMD8细胞生长状态良好且密度适宜时,收集培养液和细胞,转移至无菌离心管中,1000 rpm下离心4分钟,弃去上清液。
加入适量血清重悬TMD8细胞,进行细胞计数,确保TMD8细胞密度在5×10^6至1×10^7/mL之间。
按1:1比例将TMD8细胞悬液与10% DMSO的无血清冻存液混合,轻轻吹匀。
将1 mL的TMD8细胞悬液加入冻存管中,做好标识后,将冻存管放入程序降温盒中,置于-80℃冰箱中冷冻24小时。
24小时后,将冻存管转移至液氮中进行长期储存。