
pfeiffer细胞(人弥漫大B细胞淋巴瘤细胞系)
- 来源:淋巴母细胞样
- 细胞特征:悬浮细胞, 淋巴母细胞样
- 培养基:1640+10% FBS+1% P/S
- 其他:滤泡性淋巴瘤相关的t(14;18)(q32;q21)易位;涉及免疫球蛋白重链基因(IgH)与BCL2基因,导致BCL2基因过表达
Pfeiffer细胞系是一株建立于1992年的人源B细胞淋巴瘤细胞系,起源于一位白人成年男性弥漫性大B细胞淋巴瘤(Diffuse Large B-Cell Lymphoma, DLBCL)患者白血病期胸腔积液中的B淋巴细胞。
Pfeiffer细胞系为典型的悬浮生长模式,具备淋巴母细胞样形态,携带多种染色体畸变,其中包括滤泡性淋巴瘤中常见的t(14;18)(q32;q21)易位,具备遗传不稳定性与高度肿瘤性。
Pfeiffer细胞系被国际主流细胞资源库如ATCC收录与供应,广泛应用于弥漫性大B细胞淋巴瘤的发病机制研究、药物筛选、细胞信号通路解析、分子靶点验证及抗肿瘤治疗机制探索等领域,是肿瘤生物学和免疫学研究中具有代表性的体外模型系统。
pfeiffer细胞特性特征
Pfeiffer细胞来源于弥漫性大B细胞淋巴瘤患者,具有恶性肿瘤细胞的典型特性。
Pfeiffer细胞BCL2基因异常表达;免疫表型明确;
阳性表达:CD10、CD19、CD20、CD38
阴性表达:CD23、CD39
Pfeiffer细胞系原始肿瘤患者存在胸腔积液,具有一定的转移性和侵袭性
pfeiffer细胞参数表
细胞名称 | pfeiffer细胞(人弥漫大B细胞淋巴瘤细胞系) |
英文名称 | Pfeiffer Cell Line;PFEIFFER |
细胞来源 | 人,弥漫性大B细胞淋巴瘤患者胸腔积液 |
建系时间 | 1992年 |
细胞形态 | 悬浮生长,淋巴母细胞样 |
细胞周期 | 典型肿瘤细胞周期特征,快速增殖 |
细胞大小 | 约10-15 μm |
细胞形态学描述 | 圆形或椭圆形,核大,染色质粗糙 |
侵袭性/转移性 | 具有侵袭性,患者伴胸腔积液转移 |
染色体异常 | t(14;18)(q32;q21)易位,涉及IgH与BCL2基因 |
基因表达 | BCL2过表达,抗凋亡能力强 |
表面抗原表达 | CD10+、CD19+、CD20+、CD38+;CD23-、CD39- |
培养基 | RPMI-1640 + 10% FBS + 1%青链霉素 |
培养温度 | 37℃ |
培养环境 | 5% CO2,95%空气 |
传代比例 | 1:2至1:3 |
细胞密度 | 维持3×10^5至3×10^6 cells/mL |
传代频率 | 每2-3天换液,适时传代 |
冻存液组成 | 50% RPMI-1640 + 40% FBS + 10% DMSO |
冻存细胞密度 | 1-5×10^6 cells/mL |
冻存方法 | 程序降温(约1℃/分钟)至-80℃,转液氮长期保存 |
主要用途 | 弥漫性大B细胞淋巴瘤发病机制研究、药物筛选、免疫学研究 |
适用研究领域 | 肿瘤生物学、细胞信号传导、细胞周期与凋亡、基因表达调控 |
运输方式 | 干冰运输冻存细胞;活细胞运输需专用培养瓶和温控条件 |
生物安全等级 | BSL-2级实验室操作 |
细胞鉴定方法 | STR分析、免疫表型检测、染色体核型分析 |
细胞污染风险 | 常规无支原体污染,需定期检测 |
细胞系稳定性 | 细胞系稳定,长期传代保持特征 |
培养教程
pfeiffer细胞(人弥漫大B细胞淋巴瘤细胞系)培养教程
Pfeiffer细胞复苏步骤
将冻存的Pfeiffer细胞冻存管迅速从液氮罐中取出,立即置入37℃水浴中快速摇晃,解冻时间控制在1–2分钟内。
解冻后将细胞悬液转移至10 mL预热的完全培养基中,离心(1000 rpm,5分钟)去除DMSO。
弃去上清,用新鲜完全培养基重悬Pfeiffer细胞,接种至25 cm²培养瓶中培养。
放入培养箱培养,24小时后更换培养基以去除残余冻存液。
Pfeiffer细胞传代步骤
由于Pfeiffer细胞为悬浮型细胞,无需消化步骤。
当细胞密度达到1×10⁶ ~ 2×10⁶ 个/mL时,进行传代操作。
取Pfeiffer细胞悬液,按1:2至1:3比例转入新瓶,并补足新鲜培养基。
混匀后继续在标准培养条件下生长。
每2–3天观察细胞状态,动态调整培养密度以维持Pfeiffer细胞最佳活性。
Pfeiffer细胞冻存步骤
选择对数生长期状态良好的Pfeiffer细胞,离心去上清后,用预冷冻存液重悬(配方:50% RPMI-1640 + 40% FBS + 10% DMSO),细胞密度控制在1–5×10⁶ 个/mL。
每管冻存1 mL细胞悬液。
将冻存管放入程序降温盒中,置于-80℃冰箱中逐步降温(约1℃/分钟),过夜保存。
次日将Pfeiffer细胞冻存管转移至液氮罐中长期保存。
相关资料
STR鉴定及相关
Amelogenin | X,Y |
CSF1PO | 10,11 |
D2S1338 | 19 |
D3S1358 | 13,18 |
D5S818 | 10,13 |
D7S820 | 8,12 |
D8S1179 | 12,14 |
D13S317 | 11,12 |
D16S539 | 12 |
D18S51 | 13,14 |
D19S433 | 14 |
D21S11 | 28,32.2 |
FGA | 22,23 |
Penta D | 12,13 |
Penta E | 14,17 |
TH01 | 9,9.3 |
TPOX | 9 |
vWA | 17,18 |
参考文献
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