
OCI-LY7细胞(人弥漫大B细胞淋巴瘤细胞)
- 来源:外周血样
- 细胞特征:悬浮细胞 , 淋巴母细胞
- 培养基:RPMI-1640+20% FBS+1% P/S
- 其他:在接受药物处理后,OCI-LY7细胞中凋亡相关蛋白(如cleaved caspase-3和Bax)的表达水平上升,而抗凋亡蛋白(如survivin)的表达水平下降
OCI-LY7细胞系源自1984年一名48岁男性患者的外周血样本,被诊断为B细胞非霍奇金淋巴瘤(B-NHL),为2A期复发的弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)。OCI-LY7细胞系是通过分离和纯化患者血液中的淋巴细胞获得,具有淋巴母细胞样的形态学特征。文献报道,该细胞系为EBV阴性,并携带涉及MYC-IGH基因重排的t(8;14)易位,同时伴有TP53基因的点突变。
OCI-LY7细胞系因其遗传特性和稳定的生长能力,广泛应用于基础研究及临床前药物测试。其携带的t(8;14)染色体易位导致了MYC-IGH基因的异常表达,这对于淋巴瘤的发生发展具有重要意义。此外,TP53基因的突变进一步影响了细胞的增殖与存活,使其成为研究淋巴瘤发病机制及评估治疗策略的理想模型。
OCI-LY7细胞特性特征
EB病毒状态:OCI-LY7细胞为EBV阴性,这意味着其生长不依赖于EB病毒的感染。
OCI-LY7细胞在不同实验中显示出对多种药物(如干扰素和沙利度胺)的敏感性。
OCI-LY7细胞在接受药物处理后,能够调节凋亡相关蛋白的表达,例如上调Bax和caspase-3,同时下调Bcl-2的表达,这些变化与细胞凋亡过程密切相关。
OCI-LY7细胞的外显子组和RNA序列数据已被记录并可用,这为进一步的基因组学和转录组学研究提供了基础。
OCI-LY7细胞系在分子生物学研究中被广泛应用,特别是在探索淋巴瘤相关基因表达及其调控机制方面
OCI-LY7细胞参数表
细胞名称 | OCI-LY7细胞(人弥漫大B细胞淋巴瘤细胞) |
别称 | OCILY7 |
组织来源 | 外周血(Peripheral blood) |
疾病类型 | B细胞非霍奇金淋巴瘤(B-NHL),弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL) |
患者信息 | 48岁男性 |
疾病阶段 | 2A期,复发 |
生长特性 | 悬浮生长(Suspension) |
细胞形态 | 淋巴母细胞样 |
培养基类型 | RPMI-1640 + 10% 胎牛血清(FBS) |
培养条件 | 温度:37°C;CO₂浓度:5%;湿度:70%-80% |
传代频率 | 每36~48小时传代一次 |
冻存条件 | 90% FBS + 10% DMSO,液氮保存(-196°C) |
运输方式 | 干冰运输或复苏发货 |
质量控制 | 通过细菌、真菌、支原体、内毒素检测;STR鉴定 |
病原体检查 | HIV、乙型肝炎、丙型肝炎均为阴性 |
安全性 | 在二级生物安全台内操作,需注意防护 |
遗传特征 | EBV阴性;携带t(8;14)易位,影响MYC-IGH和TP53点突变 |
外显子组数据 | 可用 |
RNA序列数据 | 可用 |
培养教程
OCI-LY7人弥漫大B细胞淋巴瘤细胞培养教程
OCI-LY7细胞培养步骤
在无菌条件下,将IMDM基础培养基与10%-20%的胎牛血清混合。
添加青霉素(100 U/ml)和链霉素(100 µg/ml)以预防细菌污染。
确保培养基pH值在7.2-7.4范围内,并过滤除菌保存,以备OCI-LY7细胞培养使用。
OCI-LY7细胞的复苏与接种
从液氮中取出冻存的OCI-LY7细胞,迅速放入37°C水浴中解冻,注意甩干管壁以避免污染。
解冻后立即将OCI-LY7细胞悬液转移至含有10 ml新鲜培养基的无菌离心管中。
以1000 rpm离心5分钟,去除上清液,将OCI-LY7细胞重悬于5 ml新鲜培养基中。
将重悬后的细胞转移至T25或T75培养瓶,并将培养瓶置于37°C、5% CO₂培养箱中培养。
细胞培养与维护
每36至48小时使用显微镜观察OCI-LY7细胞生长情况,确认细胞状态正常。
OCI-LY7细胞为悬浮生长,传代时轻轻吹打混匀细胞,避免细胞团块形成。
当OCI-LY7细胞密度达到80%以上时,建议进行传代。将细胞悬液转移至离心管,1000 rpm离心5分钟,去除上清液后用新鲜培养基重悬OCI-LY7细胞。
重悬后的OCI-LY7细胞按照适当比例(通常为1:2至1:5)分配到新的培养瓶中,并补充新鲜培养基。
OCI-LY7细胞传代
OCI-LY7细胞应每2至3天进行传代,具体根据细胞生长速度和密度进行调整。
传代时务必保持无菌操作,避免细胞受到污染。
传代后将OCI-LY7细胞重新置入CO₂培养箱中继续培养。
OCI-LY7细胞冻存
当OCI-LY7细胞处于对数生长期且状态良好时,选择进行细胞冻存。
将OCI-LY7细胞离心后重悬于冻存液中(90% FBS和10% DMSO),分装入冻存管。
将冻存管逐步降温至-80°C保存,随后可长期保存于液氮罐中。
注意事项
无菌操作:所有操作必须在无菌环境下进行,以避免OCI-LY7细胞污染。
细胞健康状态:定期检查OCI-LY7细胞形态,确保细胞处于健康状态。如果出现异常,如细胞生长减慢或污染,应立即采取相应措施。
传代频率:为保持OCI-LY7细胞活力,建议在细胞密度达到80%时传代,避免过度拥挤影响细胞健康。
冻存注意:冻存过程需缓慢降温,以确保OCI-LY7细胞的高存活率。
相关资料
STR鉴定及相关
Amelogenin | X,Y |
CSF1PO | 12,13 |
D2S1338 | 22,24 |
D3S1358 | 14,17 |
D5S818 | 11,12 |
D7S820 | 10 |
D8S1179 | 13,15 |
D13S317 | 11,12 |
D16S539 | 12,13 |
D18S51 | 20 |
D19S433 | 14,16 |
D21S11 | 29,31.2 |
FGA | 20 |
Penta D | 11,13 |
Penta E | 11,12 |
TH01 | 6,9.3 |
TPOX | 8,12 |
vWA | 15,18 |