
WSU-DLCL2细胞(人弥漫大B淋巴瘤细胞)
- 来源:胸腔积液
- 细胞特征:悬浮细胞 ,圆形和椭圆形细胞,单个或小块悬浮生长
- 培养基:RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
- 其他:WSU-DLCL2携带EZH2 Y641F突变, 可用的外显子组和RNA序列数据
WSU-DLCL2细胞系来源于1990年从一名41岁的男性B细胞非霍奇金淋巴瘤(B-NHL)患者的胸腔积液。患者确诊为弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL),其病变由低级别滤泡性小裂细胞淋巴瘤转化而来,最终发展为中级别、非裂解型的弥漫大B细胞淋巴瘤。WSU-DLCL2细胞在体外培养条件下表现为悬浮生长,细胞形态主要为圆形或椭圆形,增殖能力强。
WSU-DLCL2细胞特性特征
基因突变:WSU-DLCL2细胞携带EZH2 Y641F突变,这一突变与肿瘤的生物学行为和治疗反应密切相关。
基因组和转录组数据:外显子组和RNA序列数据可用,为研究提供了丰富的分子背景。
免疫表型:WSU-DLCL2细胞通常表现为CD20阳性,这使其成为研究B细胞功能及淋巴瘤生物学的重要模型。
增殖能力:WSU-DLCL2在体外培养中表现出较高的增殖能力,并且能够在悬浮状态下生长。
研究用途:由于其来源于临床病例,WSU-DLCL2被广泛用于研究淋巴瘤的发病机制、药物敏感性及肿瘤生物学,尤其在新药开发和疗效评估方面具有重要价值
WSU-DLCL2细胞参数表
细胞名称 | WSU-DLCL2细胞(人弥漫大B淋巴瘤细胞) |
细胞别称 | WSU-DLCL-2; WSU-DLCL(2); WSUDLCL2 |
细胞来源 | 1990年41岁男性患者的胸腔积液,诊断为弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL) |
细胞类型 | B细胞非霍奇金淋巴瘤(B-NHL),非裂解型中等级别 |
突变特征 | EZH2 Y641F突变 |
细胞形态 | 圆形和椭圆形,单个或小块悬浮生长 |
细胞规格 | ≥ 1×10^6 细胞 |
培养基 | RPMI-1640 + 10% 胎牛血清 + 1% 双抗 |
培养条件 | 温度:37℃;CO₂浓度:5%;湿度:70%-80% |
传代比例 | 1:2至1:3 |
倍增时间 | 18 hours (PubMed=9607591); ~50-70 hours (DSMZ=ACC-575) |
冻存液配方 | 90% 完全培养基 + 10% DMSO |
储存条件 | - 冻存:-80℃过夜后转入液氮长期保存 |
运输条件 | 冷藏运输(冰袋) |
检测标准 | 细菌检测:阴性;真菌检测:阴性;支原体检测:阴性 |
内毒素含量 | ≤3 EU/mL |
用途 | 仅供科研使用 |
培养教程
WSU-DLCL2人弥漫大B淋巴瘤细胞培养教程
WSU-DLCL2细胞接收后的处理
在收到WSU-DLCL2细胞后,检查运输培养瓶是否完好无损,有无漏液或破损现象。
使用75%酒精擦拭培养瓶外部以消毒表面。
将WSU-DLCL2细胞培养瓶静置于37℃的培养箱中2-4小时,以便细胞适应环境。
WSU-DLCL2细胞复苏步骤
使用RPMI-1640作为基础培养基,补充10%胎牛血清(FBS)和1%青霉素-链霉素混合物(P/S)以制备完全培养基。
从液氮中取出WSU-DLCL2细胞冻存管,迅速置于37℃的水浴中,轻轻摇晃,确保在1分钟内完成解冻。
解冻后,迅速将WSU-DLCL2细胞悬液转入含5ml预热的完全培养基的15ml离心管中。
在1000 rpm下离心5分钟,弃去上清液。
使用2ml完全培养基轻轻重悬WSU-DLCL2细胞,然后将细胞转移至T25培养瓶中,标记并置于37℃、5% CO₂的培养箱中培养。
24小时后检查WSU-DLCL2细胞状态。如果WSU-DLCL2细胞无法贴壁生长或明显死亡,则需要及时更换培养基。通常应更换新鲜预热的完全培养基。
WSU-DLCL2细胞传代步骤
当WSU-DLCL2细胞达到80%-90%的汇合度时,应进行传代。
首先,移除旧培养基,用无钙镁的PBS溶液冲洗WSU-DLCL2细胞一次,以去除残留的培养基和血清。
加入1ml 0.25%胰蛋白酶溶液,放置于37℃培养箱中1-2分钟,直到WSU-DLCL2细胞开始回缩变圆。
然后,加入等体积的完全培养基中和消化反应,轻拍培养瓶使WSU-DLCL2细胞脱落。
将WSU-DLCL2细胞悬液转移至15ml离心管,在1000 rpm下离心5分钟,弃去上清液。
收集WSU-DLCL2细胞沉淀后,用适量完全培养基重悬细胞,按1:3至1:5的比例进行分瓶。
将分瓶后的WSU-DLCL2细胞移入37℃、5% CO₂的培养箱中继续培养。定期观察WSU-DLCL2细胞增殖和状态,确保其健康生长。
WSU-DLCL2细胞冻存步骤
配制冻存液:55%基础培养基 + 40% FBS + 5%二甲基亚砜(DMSO)。
按照传代方法进行WSU-DLCL2细胞消化,收集细胞沉淀并用冻存液重悬。取一部分WSU-DLCL2细胞用于计数,以确保冻存细胞的浓度合适。
将重悬后的WSU-DLCL2细胞转入冻存管,放入-80℃冰箱中进行预冻,待过夜后将WSU-DLCL2细胞移入液氮中长期保存。
相关资料
STR鉴定及相关
Amelogenin | X,Y |
CSF1PO | 11 |
D2S1338 | 22,25 |
D3S1358 | 14,16 |
D5S818 | 11,12 |
D7S820 | 10,12 |
D8S1179 | 12,13 |
D13S317 | 11,14 |
D16S539 | 10,13 |
D18S51 | 15,16 |
D19S433 | 12 |
D21S11 | 29,32.2 |
FGA | 22 |
Penta D | 10,13 |
Penta E | 14,19 |
TH01 | 8,9 |
TPOX | 8 |
vWA | 16,17 |