
GM12878细胞(人B淋巴细胞)
- 来源:外周血
- 细胞特征:悬浮生长,淋巴母细胞样
- 培养基:1640+10% FBS+10% P/S
- 其他:GM12878细胞经EB病毒转化获得,能够持续在体外增殖
GM12878细胞系是一株源自一位白人女性(NA12878)外周血的B淋巴细胞系,GM12878细胞经过Epstein-Barr病毒(EBV)的转化获得,EB病毒是一种常见的疱疹病毒,能够诱导B淋巴细胞转化为具有无限增殖能力的细胞,从而使其在体外维持生长。GM12878细胞表现出典型的淋巴母细胞形态,呈悬浮状态生长。GM12878细胞常用于基因组学、表观遗传学和免疫学等领域的研究。
GM12878细胞参数表
细胞名称 | GM12878细胞(人B淋巴细胞) |
别名 | GM-12878 |
来源 | 一位白人女性的外周血B淋巴细胞 |
转化方法 | Epstein-Barr病毒(EBV)转化 |
细胞类型 | 转化细胞 |
性别/年龄 | 女性 |
组织 | 外周血 |
疾病状态 | 常态 |
细胞形态特征 | 淋巴母细胞样,适合悬浮生长 |
培养基 | RPMI-1640 + 10% 胎牛血清 + 1% 青霉素/链霉素(P/S) |
培养条件 | 37°C,95%空气,5%二氧化碳 |
传代比例 | 1:2 至 1:4 |
生物安全等级 | BSL-1 |
冻存条件 | 60%培养基、30%胎牛血清、10% DMSO,液氮保存 |
保藏机构 | Coriell |
应用领域 | 基因组学、表观遗传学、免疫学研究 |
供应限制 | 仅供科研使用 |
内毒素含量 | <10 EU/mL |
细胞特性 | 无菌操作,支原体检测阴性 |
注意事项 | 使用前需充分预热,保持无菌操作 |
培养教程
GM12878人B淋巴细胞培养教程
细胞复苏
从液氮罐中取出冻存的GM12878细胞管,迅速置于37°C水浴中,轻轻摇晃直至细胞完全融化。
将融化后的GM12878细胞悬液转移至含有10 mL预热完全培养基(RPMI-1640 + 10%胎牛血清(FBS)+ 1%青霉素/链霉素(P/S))的离心管中,混匀。
将混合后的细胞悬液转移至T25培养瓶中。
将培养瓶放入37°C、5% CO2培养箱中进行培养。
细胞传代
每2-3天观察GM12878细胞的生长状态,当细胞达到80%汇合时进行传代。
吸出培养瓶中的旧培养基,用预温的PBS轻轻冲洗细胞层1-2次。
加入2-3 mL预温的胰酶-EDTA溶液,在37°C下孵育2-3分钟,使细胞脱离。
加入5 mL完全培养基终止消化,轻轻吹打以使细胞悬浮。
将细胞悬液转移至15 mL离心管中,1000 rpm离心5分钟。
弃去上清,用5 mL完全培养基重悬细胞。
按1:2或1:3的比例将细胞接种至新的T25培养瓶中。
将新培养瓶置于37°C、5% CO2培养箱中继续培养。
细胞冻存
收集对数生长期的GM12878细胞,离心后弃去上清。
用冻存液(60% RPMI-1640 + 30% FBS + 10%二甲基亚砜(DMSO))重悬细胞,调整细胞密度为1-2×10^6 cells/mL。
将细胞悬液分装至冻存管中,置于-80°C冰箱过夜。
次日,将冻存管转入液氮罐中保存。
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STR鉴定及相关
AMEL X/Y | X |
CSF1PO | 12, 13 |
D13S317 | 11, 12 |
D16S539 | 9, 10 |
D18S51 | 15, 16 |
D19S433 | 14, 15 |
D21S11 | 29, 30 |
D3S1358 | 15, 17 |
D5S818 | 11, 12 |
D7S820 | 8, 9 |
FGA | 22, 23 |
TH01 | 7, 9 |
TPOX | 8, 9 |
VWA | 16, 18 |