
Farage细胞(人B淋巴瘤细胞)
- 来源:弥漫大B淋巴瘤;淋巴结转移
- 细胞特征:悬浮细胞, 淋巴母细胞样
- 培养基:生长培养基:RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
- 其他:Farage细胞对EB病毒呈阳性反应
Farage人B淋巴瘤细胞是一种源自弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)患者的B淋巴细胞系,由H Ben-Bassat在1990年建系,被广泛用于免疫学研究。
Farage细胞特性
Farage细胞属于B淋巴细胞系。
Farage细胞不表达表面或细胞质免疫球蛋白。
Farage细胞染色体组成为11号染色体三体。
抗原表达:CD10+/-、CD11a+、CD19+、CD20+、CD21+、CD22+、CD23+、CD29(VLA-4)+、CD38+、CD39+、CD40+、CD44+、CD54+(ICAM-1)、CD58+(LFA-3)、HLA DR+。不表达CD23-。
Farage细胞经IL-4处理后,CD23、CD54和CD58表达上调,CD21、CD22和CD38表达下调,IL-4孵育6至8天可导致CD11a、CD39、CD40的表达增加,CD21和CD38的消失。
Farage细胞暴露于佛波醇12-肉豆蔻酸13-乙酸酯(PMA)下调CD21和CD23的表达。
Farage细胞不表达末端脱氧核苷酸转移酶基因(TdT),也不表达重组激活基因RAG-1和RAG-2,它们被称为前B细胞阶段的标志物。这些结果表明,Farage代表成熟的B细胞,而不是前B细胞。
Farage细胞对EB病毒呈阳性反应。
Farage细胞参数表
名称 | Farage细胞 (人B淋巴瘤细胞) (STR鉴定正确) |
别称 | FARAGE; Farage OL; Farage Original Line |
种属 | 人 |
来源 | 弥漫性大B淋巴瘤(DLBCL);淋巴结转移;白人女性;70岁 |
年龄(性别) | 成人(女性) |
组织来源 | 源自转移部位:淋巴结 |
细胞类型 | 肿瘤细胞 |
肿瘤类型 | 淋巴瘤细胞 |
细胞形态 | 淋巴母细胞样 |
生长特性 | 悬浮细胞 |
生物安全等级 | BSL-2 |
抗原表达 | CD10+/-、CD11a+(LFA-1)、CD19+、CD20+、CD21+、CD22+、CD23+ 、CD29(VLA-4)+、CD38+、CD39+、CD40+、CD44+、CD54+(ICAM-1)、 CD58+(LFA-3)、HLA DR+ |
IL-4处理反应 | CD23、CD54和CD58表达上调;CD21、CD22和CD38表达下调;CD11a、CD39、CD40表达增加 |
PMA处理反应 | CD21和CD23表达下调 |
免疫球蛋白表达 | 不表达表面或细胞质免疫球蛋白 |
遗传特征 | 不表达TdT、RAG-1和RAG-2,表明成熟B细胞特征 |
病毒感染状态 | EB病毒阳性反应 |
细胞污染检测 | HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性 |
染色体 | 11号染色体三体 |
冻存条件 | 冻存液:55% 基础培养基 + 40% FBS + 5% DMSO;无血清细胞冻存液;温度:液氮 |
培养基 | 生长培养基:RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S; |
推荐换液频率 | 2-3次/周 |
传代方法 | 1:3传代,2-3天传一代 |
注意事项 | 该细胞为悬浮细胞,请注意离心收集细胞悬液;请勿直接倒掉细胞培养液。 |
保藏机构 | ATCC; CRL-2630 |
培养教程
Farage人B淋巴瘤细胞培养
为确保Farage细胞存活率最高,在收到后尽快解冻小瓶并启动培养。如果需要继续冷冻保存,应存放在液氮蒸汽相,而不是在-70°C。在-70°C存放会导致存活率下降。
解冻小瓶时,请在37°C水浴中轻轻摇动。为减少污染可能性,保持O形环和盖子不进入水中。解冻应迅速进行(约2分钟)。
一旦内容物解冻,请立即从水浴中取出,并用70%乙醇浸泡或喷洒消毒。从此步骤开始,所有操作都应在严格无菌条件下进行。
建议立即去除冷冻保护剂。将细胞悬浊液以约125 x g的速度离心5至10分钟。 将细胞沉淀转移到合适大小的容器中(请参阅特定批次信息,了解推荐的稀释比例)。
在细胞恢复过程中,避免培养基碱度过高是很重要的。建议在添加小瓶内容物之前,将含有生长培养基的培养容器放入孵育箱中至少15分钟,以使培养基达到正常pH(7.0至7.6)。
在适当的孵育箱中以37°C孵育Farage细胞。如果使用本产品说明书上描述的培养基,建议在5% CO2和空气的气氛中培养。
传代程序
通过添加新培养基或更换培养基维持Farage细胞的培养。另外,可以通过离心和随后的悬浮将细胞重新建立在3 - 5 x 105 viable cells/mL的浓度。保持细胞密度在3 x 105和3 x 106 viable cells/mL之间。
培养液更换:每2至3天添加新培养基(根据细胞密度而定)。
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STR鉴定及相关
Amelogenin | X |
CSF1PO | 11,12 |
D2S1338 | 24,25 |
D3S1358 | 14,18 |
D5S818 | 12 |
D7S820 | 12 |
D8S1179 | 12 |
D13S317 | 11,13 |
D16S539 | 11,12 |
D18S51 | 12,13 |
D19S433 | 14 |
D21S11 | 29 |
FGA | 20,23 |
Penta D | 9,12 |
Penta E | 7,18 |
TH01 | 8,9 |
TPOX | 9 |
vWA | 14,15 |
