
daudi细胞(人Burkitt's淋巴瘤细胞)
- 来源:外周血;B淋巴母细胞;Burkitt's淋巴瘤
- 细胞特征:悬浮细胞 , 淋巴母细胞样
- 培养基:生长培养基:RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
- 其他:daudi细胞表面免疫球蛋白阳性(sIg+),β2-微球蛋白阴性。对EBNA(Epstein-Barr核抗原)、VCA(衣壳抗原)呈阳性。
Daudi人Burkitt's淋巴瘤细胞系由E. Klein和G. Klein于1967年从一名16岁黑人男性Burkitt's淋巴瘤患者的外周血中分离出的B淋巴细胞。Daudi细胞用于白血病发生研究。
Daudi细胞系具有人的雄性核型,干细胞数为46。其中66%的细胞是二倍体,在干细胞系内是稳定的。
Daudi细胞具有致瘤性。其表达标记为Fc,表达同工酶G6PD和B。Daudi细胞对β-2-微球蛋白呈阴性,对EBNA、VCA和表面免疫球蛋白(sIg+)呈阳性。ATCC通过PCR证实该细胞系对EBV病毒DNA序列的存在呈阳性。
daudi细胞特性
1967年由E. Klein和G. Klein从一名16岁黑人男性Burkitt's淋巴瘤患者的外周血中分离建立,用于白血病研究。
daudi细胞是B淋巴细胞,表现为典型的淋巴母细胞样形态。
daudi细胞表面免疫球蛋白阳性(sIg+),β2-微球蛋白阴性。对EBNA(Epstein-Barr核抗原)、VCA(衣壳抗原)呈阳性。
携带EB病毒。
人类雄性核型,细胞数为46,稳定的二倍体核型。表达Fc标记。
daudi细胞在裸鼠中具有致瘤性,能在琼脂中形成克隆。
PCR证实对EBV病毒DNA序列的阳性反应。
daudi细胞参数表
细胞名称 | Daudi细胞(人Burkitt's淋巴瘤细胞) |
别称 | DAUDI; NK-10A; NK-10a; GM03190; GM3190; GM17346 |
来源患者 | 16岁黑人男性,Burkitt's淋巴瘤患者 |
组织来源 | 外周血 |
细胞类型 | B淋巴细胞,表现为典型的淋巴母细胞样形态 |
应用领域 | 白血病发生机理研究 |
免疫表型 | 表面免疫球蛋白阳性(sIg+),β2-微球蛋白阴性;对EBNA、VCA阳性 |
病毒携带情况 | 携带EB病毒 |
细胞遗传学 | 人类雄性核型,染色体数为46,66%的细胞为二倍体,核型稳定 |
表达标记 | Fc,表达 |
同工酶 | G6PD,B |
PCR结果 | 对EBV病毒DNA序列阳性 |
致瘤性 | 在裸鼠中具有致瘤性,能在琼脂中形成克隆 |
倍增时间 | 24-48小时 |
染色体分析 | 46,XY |
生物安全等级 | BSL-2 |
受体表达情况 | complement, expressed; Fc, expressed |
支原体检测 | 阴性 |
培养基 | RPMI-1640+10% FBS+1% P/S |
培养条件 | 气相:95%空气+5% CO2;温度:37℃ |
传代比例 | 1:2-1:4,每2-3天换液一次 |
传代周期 | 24-48小时 |
冻存条件 | 60%基础培养基+30% FBS+10% DMSO,液氮储存 |
推荐传代比例 | 3×10^5-5×10^5 cells/mL |
推荐换液频率 | 2-3次/周 |
注意事项 | 该细胞为悬浮细胞,注意离心收集细胞悬液;勿直接倒掉细胞培养液 |
保藏机构 | ATCC; CCL-213; BCRC; 60192; Coriell; GM03190; GM17346; DSMZ; ACC-78; ECACC; 85011437; 94071449 |
培养教程
daudi人Burkitt's淋巴瘤细胞培养
细胞特性
生长方式: Daudi细胞悬浮略成团生长
细胞形态: 略不规则圆形,透光性良好,大小较均一,偶尔可看见个别体积较大的细胞
显微特性: 镜下看Daudi细胞胞质饱满,背景干净
生长速度: 中等(一般为3-4×10^6个细胞在10cm皿中两天内长满)
Daudi细胞传代步骤
观察细胞密度: 当Daudi细胞密度达到70-80%时,可进行细胞传代。
预热培养基: 在37°C水浴锅中预热培养基。
收集细胞悬液: 将Daudi细胞悬液全部转移到15ml离心管中。
离心: 室温下300g离心3分钟,倒掉上清,用手轻弹Daudi细胞沉淀。
重悬细胞: 用5ml预热好的培养基重悬混匀Daudi细胞,吸取10ul细胞悬液,稀释10倍后进行计数。
传代培养: 在10cm皿中提前加入9ml培养基,将大约3-4×10^6个Daudi细胞转移到10cm皿中混匀,总培养基量为10ml。
静置培养: 放入37°C、5% CO2孵箱中静置培养。
注意事项
Daudi细胞为悬浮细胞,注意在传代和收集过程中使用离心法收集细胞悬液。
请勿直接倒掉Daudi细胞培养液,应先通过离心法回收细胞。
传代过程中,培养基要在37°C水浴中预热,以防止温度变化对Daudi细胞的影响。
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STR鉴定及相关
Amelogenin | X,Y |
CSF1PO | 12 |
D2S1338 | 17,24 |
D3S1358 | 16,18 |
D5S818 | 8,13 |
D7S820 | 8,10 |
D8S1179 | 14 |
D13S317 | 11,12 |
D16S539 | 10,12 |
D18S51 | 16,18 |
D19S433 | 12,14 |
D21S11 | 34,35 |
FGA | 21,26 |
Penta D | 10,12 |
Penta E | 7,9 (ATCC=CCL-213; DSMZ=ACC-78; PubMed=25877200) |
9 (CCRID) | |
TH01 | 6,7 |
TPOX | 8,11 |
vWA | 15,17 |