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DoHH2细胞系(人B细胞淋巴瘤细胞系)货号:STM-CL-5516 规格:1×10⁶cells/T25培养瓶或1mL冻存管

DoHH2细胞系(人B细胞淋巴瘤细胞系)

  • 来源:胸腔积液
  • 细胞特征:悬浮细胞,淋巴细胞样
  • 培养基:RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
  • 其他:DoHH2细胞系表达BCL2 mRNA,BCL2蛋白与细胞凋亡的抑制有关
价格:¥ 2,300.00
提供STR鉴定报告

DOHH2细胞系来源于一名患有难治性免疫母细胞型B细胞淋巴瘤的60岁男性患者,其原发病为滤泡性中心母细胞型/中心细胞淋巴瘤,后期病情进展为胸腔积液。DOHH2细胞系携带t(14;18)染色体易位,形成IGH-BCL2融合基因,并能够表达BCL2 mRNA。原始培养物是EBV-和EBV+细胞的混合物,其中EBV-细胞被分离并克隆扩增。外显子组和RNA序列数据可用(见参考18187和外显子序列和RNA-Seq)。

DOHH2细胞系为悬浮生长的淋巴母细胞样细胞,DOHH2细胞系常用于研究弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)的病理机制。特别适合研究由于IGH-BCL2易位导致的BCL2基因过表达,这与DLBCL的抗凋亡特性密切相关。

DoHH2细胞系参数表

细胞名称DoHH2细胞系(人B细胞淋巴瘤细胞系)
别名DOHH2; DoHH-2; DOHH-2
年龄/性别60岁/男性
组织来源胸腔积液
疾病特征难治性免疫母细胞型B细胞淋巴瘤
细胞类型肿瘤细胞
形态学淋巴母细胞样
生物安全等级BSL-1
基因易位t(14;18)导致IGH-BCL2融合基因
基因表达表达BCL2 mRNA
EB病毒状态原始培养物为EBV阳性和阴性细胞混合,分离后获得EBV阴性细胞
培养基RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S
生长条件95%空气 + 5% CO₂, 温度37℃
推荐传代比例1:2至1:6
推荐换液频率每周2-3次
倍增时间~40小时
冻存液90% 完全培养基 + 10% DMSO
冻存条件液氮储存
支原体检测阴性
保藏机构DSMZ; ACC-47
应用领域B细胞淋巴瘤的病理机制研究、药物筛选等

培养教程

DoHH2人B细胞淋巴瘤细胞系培养教程

DoHH2细胞复苏

  • 从液氮中取出DoHH2细胞冻存管,迅速在37℃水浴中解冻,期间轻轻摇动以加速解冻。

  • 解冻完成后,将细胞悬液缓慢加入4 mL新鲜的完全培养基中,并轻轻混匀。

  • 以1000 RPM离心4分钟,去除上清液,保留细胞沉淀。

  • 用1-2 mL新鲜培养基重悬细胞,随后将DoHH2细胞悬液转移至培养瓶中。

  • 将培养瓶放入37℃培养箱中,静置过夜,以便细胞适应生长环境。

日常维护与传代

  • 换液频率:每2-3天进行一次换液。方法为轻轻吸去一部分旧培养基,补充新鲜培养基,确保DoHH2细胞始终处于健康的生长环境中。

  • 传代操作:当DoHH2细胞密度达到80%-90%时,进行传代操作。

  • 将细胞培养液轻轻吸出并离心沉淀细胞。

  • 重悬DoHH2细胞于新鲜培养基中,按比例(1:2至1:6)分装到新的培养瓶中。

  • 转入培养箱继续培养。

DoHH2细胞冻存

  • 冻存培养基配方为90%完全培养基 + 10%二甲基亚砜(DMSO)。

  • 将DoHH2细胞悬液分装至冻存管,逐步降低温度至-80°C,最后转移至液氮中长期保存。

  • 按照前述复苏步骤操作,将DoHH2细胞快速解冻并重新培养。

注意事项

  • 无菌操作:整个培养过程中需严格遵守无菌技术,防止细胞污染。操作时尽量使用无菌工具,定期检查培养环境及设备。

  • 污染监控:每天观察DoHH2细胞形态和培养基的澄清度。如发现培养基浑浊或细胞形态异常,应及时采取措施处理。

  • 健康监测:DoHH2细胞为悬浮生长细胞,定期监测细胞生长状态,避免细胞过度密集导致营养耗尽。此外,注意检查悬浮细胞的均匀性,确保细胞分布一致。

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D7S82011
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D13S31712,13
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D18S5111,14
D19S43314.2,15.2
D21S1130
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Penta D9,12
Penta E12,16
TH019
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vWA14,19

参考文献

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