
SP20细胞(Sp2/0-Ag14小鼠骨髓瘤细胞)
- 来源:脾脏
- 细胞特征:半贴半悬细胞,淋巴母细胞样
- 培养基:1640+10% FBS+1% P/S
- 其他:Sp2/0-Ag14细胞不分泌免疫球蛋白,这使其成为单克隆抗体生产的理想选择
Sp2/0-Ag14细胞系是通过通过将经过绵羊红细胞免疫的BALB/c小鼠脾细胞与P3X63Ag8骨髓瘤细胞融合而形成的,是一种小鼠骨髓瘤细胞系,由B淋巴细胞从小鼠脾脏分离。主要用于单克隆抗体的生产。SP20细胞在免疫学研究中具有重要应用。
SP20细胞特性特征
不分泌免疫球蛋白: SP20细胞不分泌免疫球蛋白,这使其成为单克隆抗体生产的理想选择.
药物敏感性: SP20细胞系对20μg/ml的8-氮鸟嘌呤具有抗性,并且对HAT(次黄嘌呤-氨基蝶呤-胸苷)敏感.
病毒检测: SP20细胞系鼠痘病毒(ECTV)呈阴性,并通过了支原体检测.
抗原表达: SP20细胞系表达H-2d抗原,这是小鼠的主要组织相容性复合体(MHC)抗原之一.
基因特征: 由于其不分泌免疫球蛋白的特性,SP20细胞系在基因水平上缺乏相关的免疫球蛋白基因表达,这使其在单克隆抗体生产中具有独特的优势
SP20细胞参数表
细胞名称 | SP20细胞(Sp2/0-Ag14小鼠骨髓瘤细胞) |
细胞别称 | SP2/0-Ag14; SP2/0-AG14; SP2/0-ag14; Sp2/O-Ag14; SP2/O-Ag14; Sp2/0-Ag-14;SP2-0-Ag14; SP2/0 Ag-14; SP-2/0-AG14; Sp 2/0-Ag 14; Sp2/0; SP2/0; Sp2/O; SP2/O; SP-2;SP2;GM03569; GM03569B; GM3569 |
细胞类型 | 小鼠骨髓瘤细胞 |
物种 | 小鼠(Mus musculus) |
来源 | 经过绵羊红细胞免疫的BALB/c小鼠脾细胞与P3X63Ag8骨髓瘤细胞融合 |
形态 | 淋巴母细胞样,悬浮生长 |
培养基 | DMEM,10%胎牛血清(FBS),青霉素和链霉素 |
培养条件 | 37°C,95%空气,5%二氧化碳 |
传代 | 1:2至1:3,每周3次,传代时达80%-90% |
抗原表达 | H-2d |
免疫球蛋白 | 不分泌 |
8-氮鸟嘌呤 | 对20μg/ml抗性 |
HAT | 敏感 |
病毒检测 | 鼠痘病毒(ECTV)阴性 |
支原体检测 | 阴性 |
应用 | 单克隆抗体生产、细胞融合实验、抗体工程 |
复苏活力 | 存活率 > 90% |
冻存温度 | -196°C(液氮) |
运输温度 | -80°C(干冰) |
培养教程
Sp2/0-Ag14小鼠骨髓瘤细胞培养教程
细胞复苏
从液氮中取出冻存的SP20细胞,迅速放入37°C水浴中解冻。
将解冻的SP20细胞悬液转移到含有预热培养基的离心管中。
以1000rpm离心5分钟,弃去上清。
用新鲜培养基重悬SP20细胞,并转移到培养瓶中。
将培养瓶置于37°C,5% CO2培养箱中培养。
细胞传代
传代比例:1:2至1:4;传代频率:每周2~3次
当SP20细胞密度达到80%-90%时进行传代。
收集细胞悬液,1000rpm离心5分钟。
弃去上清,用新鲜培养基重悬SP20细胞。
按照传代比例将SP20细胞分配到新的培养瓶中。
添加新鲜培养基至适当体积。
将培养瓶置于培养箱中继续培养。
换液
频率:每周2~3次
方法:更换50-70%的旧培养基为新鲜培养基。
细胞冻存
冻存液配方:55%基础培养基 + 40%FBS + 5%DMSO
收集对数生长期的SP20细胞。
以1000rpm离心5分钟,弃去上清。
用冻存液重悬SP20细胞,调整密度至1-2×10^6个/ml。
将SP20细胞悬液分装到冻存管中。
将冻存管放入程序降温盒中,置于-80°C冰箱中缓慢降温。
24小时后转移到液氮中长期保存。
注意事项
定期检查SP20细胞形态和生长状况。
保持无菌操作,避免污染。
定期进行支原体检测。
细胞密度应保持在适当范围内,不宜过高或过低。
避免反复冻融SP20细胞,以防影响细胞活性。
SP20细胞的实验优势
单克隆抗体生产:由于不分泌免疫球蛋白,SP20细胞是制备杂交瘤和生产单克隆抗体的理想选择。
细胞融合实验:SP20细胞可以作为细胞融合中的B细胞组分,用于制备杂交瘤。
抗体工程:在抗体工程和改造中,SP20细胞可作为重要的工具细胞。
药物敏感性研究:SP20细胞对20μg/ml的8-氮鸟嘌呤有抗性,对HAT培养基敏感,可用于相关药物研究。
肿瘤学研究:作为骨髓瘤细胞模型,SP20细胞可用于评估新治疗方法和药物的有效性,以及研究浆细胞瘤的发生和发展机制。
基因转染和蛋白质表达:SP20细胞适用于基因转染和蛋白质表达的体外实验模型。
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