
NCI-H929细胞(人骨髓瘤细胞)
- 来源:骨髓;恶性胸腔积液
- 细胞特征:悬浮细胞, 淋巴母细胞样
- 培养基:RPMI-1640+0.05mM β-mercaptoethanol+10% FBS+1% P/S
- 其他:基因特征:c-myc原癌基因重排,并表达c-myc RNA;存在一个激活的ras等位基因表达
NCI-H929细胞系来源于一名62岁白人女性多发性骨髓瘤患者的恶性胸腔积液。NCI-H929细胞是一种B淋巴细胞,接近四倍体,并且大多数8号染色体的拷贝具有8q+异常。
NCI-H929细胞系具有以下特性和特征
抗原阳性表达:浆细胞抗原1(PCA-1)、CD38(T10)、转铁蛋白受体
抗原阴性表达:HLA-DR、CALLA、早期B细胞发育标志物、EB病毒核抗原(EBNA)
分子标志物:表达转铁蛋白
免疫球蛋白表达:产生IgA类型免疫球蛋白,κ轻链
基因特征:c-myc原癌基因重排,并表达c-myc RNA;存在一个激活的ras等位基因表达
生长特性:悬浮生长,形态呈淋巴母细胞样
NCI-H929细胞参数表
细胞名称 | NCI-H929细胞(人骨髓瘤细胞) |
细胞别称 | NCI-H929; NCI H929; NCIH929; H929; H-929; h929 |
细胞来源 | 人骨髓瘤细胞,62岁白人男性的恶性胸腔积液 |
组织来源 | 骨髓 |
生长特性 | 悬浮生长 |
细胞形态 | 淋巴母细胞样 |
染色体特征 | 接近四倍体,8号染色体大多数拷贝有8q+异常 |
培养基 | RPMI-1640 + 10% 胎牛血清(FBS)+ 0.05 mM β-巯基乙醇,1% 双抗 |
培养条件 | 37°C,5% CO2,湿度70%-80% |
培养参数 | 传代比例 1:2 至 1:3;细胞密度维持 5×10^5 至 1×10^6 cells/ml;换液频率 每周2-3次 |
冻存环境 | 冻存液:90% 血清,10% DMSO ; 液氮或-80°C |
表面抗原表达 | 阳性:PCA-1,CD38,转铁蛋白受体; 阴性:HLA-DR,CALLA,EBNA,早期B细胞发育标志物 |
免疫球蛋白表达 | IgA,κ轻链 |
基因特征 | c-myc原癌基因重排,激活的ras等位基因表达 |
生物安全等级 | BSL-1 |
应用 | 多发性骨髓瘤研究,药物筛选 |
细胞代数 | 10代以内 |
支原体检测 | 阴性 |
保藏机构 | ATCC (CRL-9068); DSMZ (ACC-163); ECACC (9505041); 中国医学科学院基础医学研究所细胞资源中心 |
供应限制 | 仅限于科学研究,不可用于治疗 |
培养教程
NCI-H929人骨髓瘤细胞培养教程
NCI-H929细胞的复苏步骤
在37°C水浴中快速解冻NCI-H929细胞冻存管。
将解冻的NCI-H929细胞悬液转移到含4-6 mL完全培养基的离心管中。
以1000 rpm离心3-5分钟以去除保存液。
弃去上清液,用完全培养基重悬NCI-H929细胞。
将重悬的NCI-H929细胞悬液转移到含6-8 mL完全培养基的培养瓶中。
在37°C下培养NCI-H929细胞过夜。
NCI-H929细胞传代
细胞密度:保持NCI-H929细胞在5×10^5至1×10^6 cells/mL之间。
传代比例:1:2至1:3,确保NCI-H929细胞的健康增殖。
换液频率:每周2-3次,保证NCI-H929细胞的营养供应。
具体传代步骤
收集NCI-H929细胞悬液,以1000 rpm离心5分钟。
弃去上清液,用预热的完全培养基重悬NCI-H929细胞。
按1:2或1:3的比例将NCI-H929细胞分配到新的培养瓶中。
补充完全培养基至适当体积以维持NCI-H929细胞的生长。
NCI-H929细胞冻存
冻存液配方:90%血清,10% DMSO,适用于NCI-H929细胞的长期保存。
收集对数生长期的NCI-H929细胞,以1000 rpm离心5分钟。
弃去上清液,用冻存液重悬NCI-H929细胞。
将NCI-H929细胞悬液分装到冻存管中,每管约1×10^6-1×10^7个细胞。
使用程序降温盒或-80°C冰箱缓慢降温。
24小时后将NCI-H929细胞转移到液氮中长期保存。
注意事项
培养基配方:确保使用高质量的培养基成分,特别是适用于NCI-H929细胞的RPMI-1640、FBS、β-巯基乙醇和双抗。
细胞密度控制:保持适当的细胞密度,以保证NCI-H929细胞的健康生长。
传代频率:根据NCI-H929细胞的生长情况,每周进行2-3次传代。
培养条件:严格控制培养条件,确保培养箱参数适合NCI-H929细胞。
无菌操作:保持严格的无菌操作,防止NCI-H929细胞的污染。
细胞状态观察:每天观察NCI-H929细胞形态、密度和生长状况。
使用低代次细胞:建议使用10代以内的NCI-H929细胞进行实验。
冻存与复苏:按照标准程序进行NCI-H929细胞的冻存和复苏。
培养基更换:定期更换新鲜完全培养基,保证NCI-H929细胞的营养供应。
细胞鉴定:定期进行STR鉴定,确保NCI-H929细胞系的纯度。
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STR鉴定及相关
Amelogenin | X |
CSF1PO | 10,11 (ATCC=CRL-3580; DSMZ=ACC-163) |
11 (CCRID=1101HUM-PUMC000360; Cosmic-CLP=724825; ECACC=95050415; Technion Genomics Center BCF) | |
D1S1656 | 17.3 |
D2S441 | 10,14 |
D2S1338 | 17,19 |
D3S1358 | 15 |
D5S818 | 11,12 |
D7S820 | 10,12 |
D8S1179 | 11,13 |
D10S1248 | 13 |
D12S391 | 19.3 |
D13S317 | 12 |
D16S539 | 9,13 |
D18S51 | 15,18 |
D19S433 | 13,14 |
D21S11 | 28,29 |
D22S1045 | 15 |
FGA | 21,24 |
Penta D | 12,13 (DSMZ=ACC-163) |
12,14 (Technion Genomics Center BCF) | |
Penta E | 7,10 |
TH01 | 9.3 |
TPOX | 8,11 |
vWA | 14,15 |