SJSA1细胞（人骨肉瘤细胞）

SJSA-1细胞系最初于1982年建立，源自一名19岁黑人男性患者的原发性股骨骨肉瘤。SJSA1细胞系最初被称为OsA-CL，后改名为SJSA-1。
SJSA-1细胞表现为上皮样，并具有贴壁生长的特性。
SJSA1细胞系的核型特征为44XY-1、-4、-7、-9、-11、-14、-15，伴有染色体异常，包括+del(1)(q32;q42)、+5p+、+der(7)t(4;HSR;7)(4qter-4q12::HSR::7p22-7qter)、+9p+，扩增的gli原癌基因序列在衍生的7号染色体的HSR中。

SJSA1细胞（人骨肉瘤细胞）特征特性

• SJSA-1细胞含有编码p53相关蛋白MDM2的基因，且该基因有扩增。

• gli原癌基因在SJSA1细胞中有15倍的扩增。

• 编码p53相关蛋白的基因存在，这可能对p53通路的研究有重要意义。

• MDM2基因扩增，这是一个重要的肿瘤抑制基因p53的负调控因子。

• gli基因的扩增可能与细胞的恶性转化有关

SJSA1细胞参数表

SJSA1人骨肉瘤细胞培养教程

SJSA-1细胞复苏

• 将1 mL SJSA-1细胞冻存液在37°C水浴中快速解冻。

• 将解冻的SJSA-1细胞悬液加入到4-6 mL预热的完全培养基中。

• 1000 rpm离心5分钟，弃去上清。

• 用新鲜完全培养基重悬SJSA-1细胞。

• 将SJSA-1细胞转移到T25培养瓶中，总体积约6-8 mL。

• 放入37°C、5% CO2培养箱中培养。

SJSA-1细胞传代

• 当SJSA-1细胞密度达到70%-80%时进行传代。

• 用PBS轻轻清洗SJSA-1细胞1-2次。

• 加入适量胰蛋白酶-EDTA消化液，在37°C下消化2-3分钟。

• 显微镜下观察，当SJSA-1细胞变圆并开始脱落时，轻拍培养瓶。

• 加入含血清的完全培养基终止消化。

• 1000 rpm离心5分钟，弃去上清。

• 用新鲜完全培养基重悬SJSA-1细胞。

• 按1:3至1:6的比例进行传代（首次传代建议1:2）。

日常维护

• 每2-3天更换SJSA-1细胞培养基一次。

• 观察SJSA-1细胞形态和生长状态。

• 控制SJSA-1细胞密度，避免过度生长。

SJSA-1细胞冻存

• 制备冻存液：90%血清 + 10% DMSO。

• 收集对数生长期的SJSA-1细胞。

• 调整SJSA-1细胞浓度至>1x10^6细胞/mL。

• 将SJSA-1细胞悬液分装到冻存管中。

• 使用程序降温仪或逐步降温法将SJSA-1细胞冻存。

• 转移到-80°C冰箱（短期）或液氮（长期）保存。

收到SJSA-1细胞后的处理

• 使用75%酒精消毒SJSA-1细胞培养瓶的外壁。

• 将培养瓶置于37°C细胞培养箱内静置2-4小时，以便稳定SJSA-1细胞状态。

• 在显微镜下观察SJSA-1细胞状态，确认细胞是否完好，拍摄细胞显微照片（10×，20×）各2-3张，以及培养瓶外观照片作为记录。

• 如果SJSA-1细胞密度低于60%，去除培养瓶中的灌液培养基，将未贴壁的SJSA-1细胞离心回收后重悬于新配制的完全培养基中，再加入到原培养瓶中。

• 如果SJSA-1细胞密度达到70%-80%以上，可进行传代处理。由于运输振动可能导致细胞脱落，需要离心回收SJSA-1细胞后进行传代。

• 运输用的培养基（灌液培养基）不能继续使用，应更换为新配制的完全培养基。

注意事项

• 操作过程中保持无菌环境。

• 定期检查SJSA-1细胞是否有污染。

• 避免SJSA-1细胞过度生长或密度过低。

• 不要使用运输用的灌液培养基继续培养SJSA-1细胞。

• 首次传代后，密切关注SJSA-1细胞状态，必要时调整培养条件。