
U2OS细胞(人骨肉瘤细胞)
- 来源:人骨肉瘤
- 细胞特征:贴壁细胞 , 上皮细胞样
- 培养基:McCoy's 5A+10% FBS+1% P/S
- 其他:基因表达:骨肉瘤衍生生长因子;A型血;Rh+;HLA:(A2;Aw30;B12;Bw35;B40(+/-))
U2OS (U-2 OS) 细胞系是一种源自人类骨肉瘤的细胞系,具有上皮样细胞形态。U2OS细胞最早于1964年由瑞典研究人员Pontén和Saksela从一名15岁白人女性患者的胫骨中分离,患者患有中度分化的原发性骨肉瘤。U2OS细胞广泛应用于肿瘤生物学、细胞生物学及药物筛选等多个研究领域。
U2OS细胞表现出高度的染色体结构变化,染色体数目通常在超三倍体范围内。U2OS细胞中几乎没有发现正常染色体,但大量稳定的标记染色体可以被鉴定出来,可以看到涉及相同染色体(特别是N1、N7、N9和N11)的不同染色体重排。共发现22个标记染色体,例如t(9qter→9q21::1p36→1p::?)、7p+、iso(17q)、t(15q;?)、4q+、del(3)(q21)、5q异常等。
U2OS细胞系曾于1972年进行检测,并成功消除支原体污染。
U2OS细胞特性特征
抗原表达:A型血,Rh+,以及多种HLA抗原(HLA A2、Aw30、B12、Bw35、B40)。
基因表达:表达骨肉瘤衍生生长因子(ODGF)和胰岛素样生长因子I(IGF-I)及II(IGF-II)。
同工酶特征:AK-1,1;ES-D,1;G6PD,B;GLO-I,2;PGM1,2;PGM3,1;
在与WI-38细胞共培养及使用补体结合试验(CF法)检测猴空泡病毒SV40、呼吸道合胞病毒RSV或腺病毒时,均未发现病毒感染。
U2OS细胞参数表
细胞名称 | U2OS细胞(人骨肉瘤细胞) |
别名 | U-2 OS; U-2OS; U-2-OS; U2-OS; U20-S; U20S; 2T |
来源 | 人类骨肉瘤细胞,来自一名15岁女性患者的胫骨 |
细胞形态 | 上皮细胞样,贴壁生长 |
培养基 | McCoy's 5A + 10% 胎牛血清 + 1% 双抗 |
培养条件 | 气相:95%空气,5%二氧化碳;温度:37°C;湿度:70%-80% |
传代比例 | 1:2 - 1:4 |
传代周期 | 每2-3天一次 |
冻存液 | 90% 胎牛血清 + 10% DMSO |
冻存条件 | -80°C 保存后转入液氮 |
抗原表达 | A型血,Rh+,HLA A2、Aw30、B12、Bw35、B40 |
基因表达 | 骨肉瘤衍生生长因子(ODGF),IGF-I,IGF-II |
同工酶 | AK-1, ES-D, G6PD, GLO-I, PGM1, PGM3 |
污染检测 | 无支原体、细菌、酵母和真菌污染 |
细胞用途 | 仅供科研使用 |
细胞生长特性 | 适合转染,生长稳定 |
培养教程
U2OS人骨肉瘤细胞培养教程
U2OS细胞复苏
解冻:将冻存的U2OS细胞悬液在37°C水浴中快速解冻,避免U2OS细胞受损。
离心:将解冻的U2OS细胞悬液移至离心管中,加入4-6mL完全培养基,1000rpm离心3-5分钟,去除冷冻保护剂。
重悬:弃去上清后,用完全培养基重悬U2OS细胞。
接种:将U2OS细胞悬液接种到含有6-8mL完全培养基的培养瓶中,并在37°C培养箱中过夜培养,以恢复U2OS细胞的活力。
U2OS细胞常规传代
更换培养基:用新鲜的完全培养基替换旧的培养基,以提供U2OS细胞新的营养物质。
细胞消化:使用预热的0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液,在37°C作用5-10分钟,使U2OS细胞从培养瓶底部分离。
终止消化:加入等量的完全培养基中和胰酶的作用,保护U2OS细胞不受胰酶损伤。
离心:1000rpm离心5分钟,去除消化过程中产生的废液,确保U2OS细胞的完整性。
细胞重悬:用完全培养基重悬U2OS细胞,并按1:2至1:4的比例接种到新的培养瓶中进行继续培养。
U2OS细胞冻存
收集细胞:在U2OS细胞处于对数生长期时进行收集,1000rpm离心5分钟以去除培养基。
冻存:用冻存液重悬U2OS细胞,并将其分装至冻存管中。
冷冻过程:将冻存管先置于-80°C冰箱中过夜,随后转入液氮中长期保存,确保U2OS细胞的活性。
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STR鉴定及相关
Amelogenin | X |
CSF1PO | 12,13 (CLS=300364; DSMZ=ACC-785) |
13 (ATCC=HTB-96; CCRID; Cosmic-CLP=909776; ECACC=92022711; Technion Genomics Center BCF; KCLB=30096; PubMed=25877200) | |
D1S1656 | 16,17.3 |
D2S441 | 10,14 |
D2S1338 | 20,24 |
D3S1358 | 16 |
D5S818 | 8,11 (CLS=300364; DSMZ=ACC-785) |
11 (ATCC=HTB-96; CCRID; Cosmic-CLP=909776; ECACC=92022711; Technion Genomics Center BCF; KCLB=30096; PubMed=19787792; PubMed=25877200) | |
D6S1043 | 11 |
D7S820 | 11,12 (ATCC=HTB-96; CCRID; CLS=300364; Cosmic-CLP=909776; DSMZ=ACC-785; ECACC=92022711; Technion Genomics Center BCF; KCLB=30096) |
12 (PubMed=25877200) | |
D8S1179 | 12,14 |
D10S1248 | 13,14 |
D12S391 | 19,20 |
D13S317 | 13 |
D16S539 | 11,12 |
D18S51 | 12,14 (CLS=300364; DSMZ=ACC-785; Technion Genomics Center BCF) |
14 (ATCC=HTB-96; CCRID; PubMed=19787792; PubMed=25877200) | |
D19S433 | 15 |
D21S11 | 31 |
D22S1045 | 15,16 |
FGA | 20 |
Penta D | 9 |
Penta E | 10,13 (ATCC=HTB-96; Technion Genomics Center BCF; PubMed=25877200) |
13 (DSMZ=ACC-785) | |
SE33 | 19 |
TH01 | 6,9.3 |
TPOX | 11,12 |
vWA | 14,18 |
参考文献
- 白皮杉醇体外抗骨肉瘤U2OS细胞作用及机制的研究 《第十四届中国中西医结合基础理论学术年会会议资料》 2018年
- 摘要:...分子机制。方法:应用MTT比色法测定白皮杉醇对骨肉瘤U2OS细胞活性的影响;利用FI...
- 华蟾酥毒基联合顺铂对人骨肉瘤U2OS细胞增殖及凋亡的影响 《中国临床药理学杂志》 2019年18期
- 摘要:目的观察华蟾素毒基联合顺铂对人骨肉瘤U2OS细胞增殖及凋亡的影响。方法对照1组、对照2组、...
- 骨形态发生蛋白-2和-6对人骨肉瘤细胞U2OS作用的研究 《第四届中国肿瘤学术大会暨第五届海峡两岸肿瘤学术会议论文集》 2006年
- 摘要:目的:骨形态发生蛋白(bone morphogenetic proteins, BMPs)...
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