MG63细胞系（人骨肉瘤细胞系）

MG-63细胞是源自14岁白人男性骨肉瘤患者骨组织的成纤维细胞样人骨肉瘤细胞系。MG-63细胞系最早于1980年代被分离，现已成为研究骨肉瘤的重要模型。
MG-63细胞呈亚二倍体，约44%的细胞具有66条染色体，倍性较高的细胞比例为2.0%。在这些细胞中，可以观察到18至19条标记染色体。MG-63细胞在贴壁条件下生长，表现出成纤维细胞样形态，适用于研究骨肉瘤的生物学特性。

MG-63细胞特性特征

• 基因表达：MG-63细胞能够高水平表达干扰素，且在特定条件下（如使用聚肌苷酸、放线菌酮和放线菌素D）可诱导其产生。

• 受体表达：MG63细胞系表达转化生长因子β（TGF-β）受体Ⅰ和Ⅱ，参与细胞增殖和生长调节。

• MG-63细胞在无血清条件下能够形成细胞球，表现出干细胞特性，相关干性标志物（如CD105）表达显著提高
  

MG-63细胞参数表

MG-63人骨肉瘤细胞培养教程

MG63细胞复苏

• 从液氮罐中取出冻存的MG63细胞，将冻存管立即置于37°C的水浴中迅速融化，直到仅剩少量冰块。

• 使用无菌移液管小心吸取融化的MG63细胞悬液，缓慢加入含10%胎牛血清(FBS)的预热培养基中，以逐步稀释DMSO的浓度。

• 轻轻混匀后，将MG63细胞悬液转移到T25培养瓶中。

• 将培养瓶置于37°C、5% CO₂培养箱中培养过夜，以促进MG63细胞的贴壁。

MG63细胞贴壁与生长

• 次日检查MG63细胞的贴壁情况。如大部分MG63细胞已经贴壁，可进行第一次传代。

• 弃去培养基，使用预热的PBS缓冲液轻轻冲洗MG63细胞层1-2次，去除残留的血清和杂质。

• 加入0.25%胰酶-EDTA溶液，置于37°C下消化3-5分钟，观察MG63细胞开始脱落时，立即加入含10%FBS的培养基终止消化。

• 使用移液管轻轻吹打混匀，得到单细胞悬液。

• 按照1:3的比例将MG63细胞接种到新的培养瓶中，并加入适量预热的培养基。

• 将培养瓶置于培养箱中继续培养，每2-3天更换培养基一次，确保MG63细胞的健康生长。

MG63细胞传代

• 当MG63细胞达到80%左右的融合度时，准备进行传代。

• 弃去旧的培养基，用PBS缓冲液轻轻冲洗MG63细胞层1-2次。

• 加入0.25%胰酶-EDTA溶液，在37°C下消化3-5分钟，待MG63细胞层开始脱落时终止消化。

• 加入新鲜的含10%FBS的培养基，轻轻吹打，使MG63细胞形成单细胞悬液。

• 以1:3至1:4的比例将MG63细胞接种到新的培养瓶中，加入适量预热的培养基。

• 将培养瓶置于培养箱中培养，继续按照每2-3天换液的频率进行培养维护。

MG63细胞冻存

• 在MG63细胞处于对数生长期时收集MG63细胞，通过离心分离MG63细胞，弃去上清液。

• 用冻存液（由55%基础培养基、40%FBS和5%DMSO组成）重悬MG63细胞，并将细胞浓度调整为1×10⁶-5×10⁶ cells/mL。

• 将MG63细胞悬液分装至冻存管中，置于-80°C冰箱中过夜进行初步冷冻。

• 次日将冻存管转移至液氮罐中长期保存，以确保MG63细胞的活性和存储稳定性。

补充说明

• 根据实验需求，可能会额外添加特定的成分，例如：

• 生长因子：如TGF-β，用于促进MG63细胞特定生物学行为。

• 诱导剂：如聚肌苷酸、放线菌酮和放线菌素D，用于诱导MG63细胞产生高水平的干扰素。