
143B人骨肉瘤细胞(胸腺激酶缺陷细胞)
- 来源:143B人骨肉瘤细胞(胸腺激酶缺陷细胞)是从一名患有骨肉瘤的13岁白人女性的骨骼中分离出的混合细胞
- 细胞特征:贴壁细胞,上皮细胞样
- 培养基:生长培养基:MEM+10% FBS+1% P/S
- 其他:143B细胞胸苷激酶阴性(TK-),该细胞是一种合适的转染宿主
143B人骨肉瘤细胞是一种源自于患有骨肉瘤的13岁白人女性的细胞系,由HOS细胞系衍生而来。
HOS细胞是在1971年从患者的骨骼中分离出来的,最初被命名为TE-85 clone F5。后来,研究者在1975年使用Kirsten鼠肉瘤病毒感染了HOS细胞,产生了亚克隆R970-5。直到1979年,另一种称为“143”的R970-5的衍生细胞系被报道,具有“5-溴脱氧尿苷(BUdR)抗性”、“胸苷激酶阴性突变体”特征,之后该细胞系被命名为143B。
143B细胞是一种胸苷激酶阴性(TK-)细胞,具有抗性对5-溴脱氧尿苷(BUdR)。这些细胞属于肿瘤细胞,呈上皮细胞样,并且贴壁生长,被广泛应用于骨肉瘤癌症相关研究中。
将143B细胞注射到免疫缺陷小鼠的胫骨内,可以迅速发展出肿瘤,并且在注射后两周内产生溶骨性原发性肿瘤,并伴有广泛的肺转移现象。
143B细胞产品参数表
细胞名称 | 143B(人骨肉瘤细胞) |
别称 | 143b; 143 B; 143B TK-; 143B.TK-; 143BTK-; 143TK-; HOS-143B; HOS-143b; GM05887; GM05887A |
来源 | 骨肉瘤;女性;13岁 |
形态 | 上皮细胞样 |
类型 | 肿瘤细胞 |
生长特性 | 贴壁细胞 |
完全培养基配置 | MEM培养基;10%胎牛血清;0.015mg/ml 5-溴-2-脱氧尿苷;1%双抗 |
培养环境 | 空气,95%;二氧化碳 (CO2),5% |
细胞简介 | 143B细胞来自患有骨肉瘤的13岁白人男性,胸腺嘧啶激酶阴性(TK-),对BUdR有抗性。143B细胞是胸苷激酶缺陷骨肉瘤细胞株。 |
细胞来源 | 143B源自于同一宿主的HOS细胞系,是其衍生物。 |
传代方法 | 1:2至1:6,每周2次;消化2-3分钟 |
冻存条件 | 90% 完全培养基+10% DMSO,液氮储存 |
ATCC收录 | 是 |
生物安全等级 | 1 |
应用 | 细胞和癌症研究 |
细胞规格 | 1×106cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装 |
培养教程
1. 培养基准备:
使用DMEM/F12培养基,并添加10%胎牛血清。
可选择使用推荐的培养试剂,如DMEM/F12(CellCook cat:CM2012或Gibco cat:11330)和南美级别胎牛血清(CellCook cat:CM1002L)。
需要配套完全培养基(CellCook cat:CC2004M)时,按照说明书的配方进行制备。
2. 培养条件:
将培养基预先加热至37°C,保持在合适的温度。
气相环境设定为空气95%和二氧化碳5%。
准备好消化液,一般使用0.25%胰酶/0.02% EDTA。
3. 培养过程:
将143B细胞培养物从液氮罐中取出,并迅速放入37°C的水浴中解冻。
解冻后,将细胞悬浮液转移到预先加热的培养基中,并轻轻混合。
将含有143B细胞的培养基转移到预先消毒的T25细胞培养瓶中。
将细胞培养瓶放入37°C的培养箱中,确保培养环境稳定。
每周2-3次更换新鲜培养基,以保持143B细胞的健康生长。
当143B细胞密度达到80%时,进行传代,传代比例为1:2至1:4。
4. 细胞处理:
使用消化液对143B细胞进行消化,一般消化时间为2-3分钟。
后续操作时,需注意避免细胞过度消化或过度吸管。
在传代过程中,应注意保持143B细胞培养物的无菌状态,避免细菌或真菌污染。
5. 冻存条件:
使用DMEM/F12培养基加入10%FBS和10%DMSO的冻存液,或使用非程序冻存液进行冻存。
将冻存液与含有143B细胞的培养物混合均匀后,迅速放入液氮罐中进行冻存。
注意事项:
所有操作需在无菌条件下进行,避免细菌、真菌等污染。
143B细胞培养过程中应定期检查细胞状态,确保细胞的健康生长。
气相和温度的稳定性对于143B细胞生长至关重要,需定期检查培养箱的环境参数。
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STR鉴定及相关
STR点位信息
Amelogenin | X |
CSF1PO | 12 |
D2S1338 | 24,25 |
D3S1358 | 15 |
D5S818 | 13 (ATCC; BCRC; CCRID; ECACC; IZSLER; PubMed=25877200) |
13,14 (PubMed=19787792) | |
D7S820 | 11,12 |
D8S1179 | 11,14 |
D13S317 | 12 |
D16S539 | 10,13 |
D18S51 | 17 |
D19S433 | 13 |
D21S11 | 31.2,32.2 |
FGA | 24 |
Penta D | 9,10 |
Penta E | 7,12 |
SE33 | 21 |
TH01 | 6 |
TPOX | 11 |
vWA | 18 (ATCC; BCRC; CCRID; ECACC; IZSLER; PubMed=25877200) |
18,19 (PubMed=19787792) |
参考文献
- 葡萄籽原花青素对人骨肉瘤143B细胞的作用及机制研究 中国细胞生物学学报 > 2017年12期
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