
SK-N-AS细胞(人神经母细胞瘤细胞)
- 来源:脑神经母细胞瘤,转移部位骨髓
- 细胞特征:贴壁细胞 , 上皮细胞样
- 培养基:DMEM+10% FBS+1% P/S
- 其他:SK-N-AS细胞对维甲酸反应,表现为增殖的部分抑制,但不能诱导分化
SK-N-AS细胞是一种人类神经母细胞瘤细胞系,源自一名6岁白人女性患者的神经母细胞瘤。虽然SK-N-AS细胞最初是从患者脑中的神经母细胞瘤组织分离出来的,但真正的组织来源是患者骨髓中的转移性病灶。
SK-N-AS细胞特征特性
sk-n-as细胞源自6岁白人女性患者的神经母细胞瘤、实际取自骨髓转移灶,而非原发脑肿瘤
sk-n-as细胞具有致瘤性,能在裸鼠体内形成肿瘤;具有骨髓转移能力
sk-n-as细胞表达胰岛素样生长因子I(IGF-I)、合成胰岛素样生长因子II(IGF-II)及其RNA、具有I型IGF受体、MDR1基因表达低或完全不表达
sk-n-as细胞对Ref-维甲酸部分抑制增殖、不能被维甲酸诱导分化、低MDR1表达可能影响其在多药耐药性研究中的应用
SK-N-AS细胞参数表
细胞名称 | SK-N-AS细胞(人神经母细胞瘤细胞) |
细胞别称 | SKN-AS; SKNAS |
来源 | 人,6岁白人女性 |
组织 | 脑神经母细胞瘤(骨髓转移) |
形态和生长 | 上皮样,贴壁生长 |
原始组织 | 低分化胚胎性神经细胞瘤骨髓转移 |
培养基 | DMEM + 10% FBS + 1% P/S |
培养条件 | 37°C,5% CO2 |
传代 | 1:2至1:6,每周2次 |
无菌检测 | 细菌、酵母和支原体检测阴性 |
致瘤和转移 | 裸鼠致瘤性,骨髓转移能力 |
分子标记 | 表达IGF-I,合成IGF-II及RNA |
受体和基因 | I型IGF受体,MDR1低表达或不表达 |
维甲酸反应 | 部分抑制增殖,不能诱导分化 |
神经元分化 | 特定条件下可分化为神经元样细胞 |
研究用途 | 神经科学、免疫学、药物筛选 |
特殊应用 | 神经母细胞瘤、信号传导、细胞周期调控研究 |
ATCC编号 | CRL-2137 |
培养教程
SK-N-AS人神经母细胞瘤细胞培养教程
SK-N-AS细胞复苏
从液氮中取出冻存的SK-N-AS细胞,迅速置于37°C水浴中,轻轻摇动直至完全解冻。
将解冻后的SK-N-AS细胞悬液转移至含有预热完全培养基的离心管中。
以1000rpm离心5分钟,弃去上清。
用新鲜的完全培养基重悬SK-N-AS细胞,并将其转移至培养瓶中,置于37°C、5% CO2培养箱中。
SK-N-AS细胞常规培养
培养器皿:使用T25或T75培养瓶
换液频率:每2-3天更换一次培养基
细胞密度:保持在30-80%之间
SK-N-AS细胞传代步骤
频率:每周2次
比例:1:2至1:6
用无菌PBS洗涤SK-N-AS细胞1-2次。
加入适量的胰蛋白酶-EDTA,37°C孵育2-3分钟,观察SK-N-AS细胞脱落。
轻拍培养瓶,使SK-N-AS细胞充分脱落。
加入等体积的完全培养基中和胰蛋白酶。
以1000rpm离心5分钟,弃去上清。
用新鲜完全培养基重悬SK-N-AS细胞,按所需比例接种至新的培养瓶中。
SK-N-AS细胞冻存
配制冻存液:90% FBS + 10% DMSO。
调整SK-N-AS细胞密度至1-2×10^6 cells/mL。
将SK-N-AS细胞悬液分装入冻存管中,置于程序降温盒中,先在-80°C过夜,然后转入液氮中长期保存。
SK-N-AS细胞常见问题及其解决方法
SK-N-AS细胞贴壁不良:确保培养基新鲜,培养条件(37°C,5% CO2)合适;解冻后立即更换培养基以去除DMSO。
SK-N-AS细胞污染:严格执行无菌操作,使用无菌培养基;定期进行支原体检测。
SK-N-AS细胞过度汇合:适时传代,保持SK-N-AS细胞密度适中;传代时遵循1:2至1:6的比例。
培养基pH值变化对SK-N-AS细胞的影响:及时更换培养基,确保其新鲜度;每2-3天更换一次培养基。
SK-N-AS细胞形态异常:定期观察SK-N-AS细胞形态,及时发现和解决异常情况。
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STR鉴定及相关
Amelogenin | X |
CSF1PO | 10,12 |
D2S1338 | 17,24 |
D3S1358 | 14 |
D5S818 | 11,12 |
D7S820 | 11,13 |
D8S1179 | 13,14 |
D13S317 | 9 |
D16S539 | 14 |
D18S51 | 14,15 |
D19S433 | 12,14 |
D21S11 | 32.2,33.2 |
FGA | 20,22 |
Penta D | 9 |
Penta E | 7,14 |
TH01 | 9.3 |
TPOX | 11,12 |
vWA | 16,17 |
参考文献
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