
IMR32细胞(人神经母细胞瘤细胞系)
- 来源:神经母细胞瘤,大脑
- 细胞特征:贴壁细胞 , 成纤维细胞样
- 培养基:生长培养基:MEM(含NEAA)+10% FBS+1% P/S
- 其他:IMR32细胞可能堆积并成片生长,但可能不会100%融合。IMR32细胞系可以传代培养到80代以上。
IMR-32人神经母细胞瘤细胞由W.W. Nichols, J. Lee和S. Dwight于1967年四月建立。IMR32细胞是从一名13个月大的高加索男性腹部肿块中分离,该肿瘤被诊断为神经母细胞瘤,并具有罕见的类器官分化区域。
IMR-32细胞存在两种类型:主要是小的神经母细胞样细胞,另一种是大的透明成纤维细胞。
IMR32细胞具有稳定的雄性核型,干细胞数为49,包含两个大的标记染色体,具有亚中间着丝粒。一条1号染色体缺失,一条16号染色体缺失,C组多出2条染色体。
IMR32细胞系的亚型具有50和48条染色体,分别表现为额外的或缺失的C组染色体。
IMR32细胞特性
IMR32细胞存在两种类型:小的神经母细胞样细胞和大的透明成纤维样细胞。
IMR32细胞具有稳定的雄性核型,染色体数目为49,其中一些亚型具有50或48条染色体。
IMR32细胞具有一定的细胞遗传学不稳定性。
IMR32细胞可能堆积并成片生长,但可能不会100%融合。IMR32细胞系可以传代培养到80代以上。
IMR32细胞对几种病毒的易感性:水泡性口腔炎(奥赛和格拉斯哥,印第安纳州)、单纯疱疹病毒、痘苗病毒、人类柯萨奇病毒B3和人类脊髓灰质炎病毒3。
IMR-32细胞表达同工酶G6PD,B。
IMR32细胞参数表
细胞名称 | IMR-32细胞, ATCC CCL-127细胞, IMR32细胞, 人神经母细胞瘤细胞 |
细胞又名 | IMR 32; IMR32; Institute for Medical Research-32; GM03320; GM03320D |
种属来源 | 人 |
组织来源 | 大脑 |
疾病特征 | 神经母细胞瘤 |
细胞形态 | 神经母细胞,成纤维细胞 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞生长特性 | IMR-32细胞可能堆积并成片生长。 |
生物安全级别 | 2 |
细胞活力 | 95%(Viability by Trypan Blue Exclusion) |
细胞检测 | 细胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌 |
病毒易感性 | 水泡性口腔炎(印第安纳州、格拉斯哥),单纯疱疹病毒,痘苗病毒,人类柯萨奇病毒B3,人类脊髓灰质炎病毒3 |
同工酶 | G6PD,B |
传代方法 | 1:2至1:6,每周2次 |
传代周期 | - |
培养条件 | MEM + 10% FBS;37°C,5% CO2 |
冻存条件 | 90% 完全培养基 + 10% DMSO,液氮储存 |
推荐培养基 | MEM培养基,90%;FBS,10%。 |
生长条件 | 气相:空气,95%;二氧化碳,5%;温度:37℃ |
保藏机构 | ATCC;BCRC;BCRJ;DSMZ;ECACC |
细胞融合 | IMR-32细胞可能不会100%融合。 |
供应限制 | 仅供科研使用 |
培养教程
IMR32人神经母细胞瘤细胞系培养教程
细胞传代
吸走用于培养基,加入3-5mL PBS后轻轻晃动培养瓶润洗IMR-32细胞;
吸干净PBS后加入1mL 0.25%胰酶-0.53mM EDTA,轻轻摇晃培养皿使胰酶浸没IMR-32细胞表面,培养瓶放37°C培养箱消化(IMR-32细胞对于消化比较敏感,消化过度会严重影响细胞状态,导致细胞传代死亡漂浮或者传代后不长。消化到细胞间隙变大但未脱落,可以轻轻吹下时即可终止,禁止消化到细胞完全漂浮。混匀IMR-32细胞时尽量轻柔,不要吹出大量气泡。);
加入6-8mL完全培养基终止消化,轻轻吹下IMR-32细胞混匀;
将混匀的IMR-32细胞1000rpm(约150g)离心3min,弃上清,再用新鲜培养基重悬,37°C培养箱继续培养。
不同细胞生长速度不一,具体传代比例视IMR-32细胞生长速度而定,大部分细胞适用1:3-1:4传代,生长较慢的细胞可以1:2传代。
细胞冻存
将含有1mL IMR-32细胞悬液的冻存管在37°C水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。
在1000rpm条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。
将所有IMR-32细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8mL培养基,培养过夜)。
第二天换液并检查IMR-32细胞密度。
操作注意事项
IMR-32细胞消化时对于消化比较敏感,消化过度会严重影响细胞状态,导致细胞传代死亡漂浮或者传代后不长。消化到细胞间隙变大但未脱落,可以轻轻吹下时即可终止,禁止消化到细胞完全漂浮。混匀IMR-32细胞时尽量轻柔,不要吹出大量气泡。
传代比例视IMR-32细胞生长速度而定,大部分细胞适用1:3-1:4传代,生长较慢的细胞可以1:2传代。
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Amelogenin | X,Y |
CSF1PO | 11,12 |
D2S1338 | 23,24 |
D3S1358 | 16 |
D5S818 | 11,12 |
D7S820 | 9,10 |
D8S1179 | 13 |
D13S317 | 9 |
D16S539 | 8 (ATCC=CCL-127; CCRID; COG; DSMZ=ACC-165; IZSLER=BS TCL 29; JCRB=IFO50283; JCRB=JCRB9050;PubMed=25877200; PubMed=31581737; PubMed=33460449; RCB=RCB1895; TKG=TKG 0207) |
8,10 (CLS=300148) | |
D18S51 | 12,15 |
D19S433 | 14,15 |
D21S11 | 30,31 |
FGA | 21,24 |
Penta D | 11,12 |
Penta E | 7,15 |
TH01 | 7,9.3 (ATCC=CCL-127; CCRID; CLS=300148; COG; DSMZ=ACC-165; IZSLER=BS TCL 29; JCRB=IFO50283; KCLB=10127; PubMed=25877200; PubMed=31581737; PubMed=33460449; RCB=RCB1895; TKG=TKG 0207) |
7,10 (JCRB=JCRB9050) | |
TPOX | 11 |
vWA | 15 |